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关键词： 细胞质浓度   稳态调控   蛋白质合成   生物质   反应速率   负反馈调节   扩散受限  

摘要： 细胞质浓度是细胞生理的重要参数,影响几乎所有生化反应,参与调节细胞生物学过程。近年来,随着显微技术、微流控技术以及合成生物学的发展,研究细胞质浓度的工具不断涌现,促进了对细胞质浓度稳态的调控机理及细胞质生物学的探索,增强了对细胞质浓度参与细胞生理调控的理解。本文介绍了监测细胞质浓度的新方法、新数据,归纳了细胞质浓度稳态调控机制,总结了细胞质浓度在生理生化过程中发挥的作用,从理论和实验角度探讨了细胞质浓度异质性的功能和调控机制,介绍并扩充了细胞质浓度在反应速率、稳态调节中的理论研究。目前对于细胞质浓度的研究在稳态决定机制、与其他生理过程的相互作用及合成生物学中的应用方面还有诸多难题亟待突破。细胞质浓度的探究正逐渐形成一个活跃的研究领域,在多学科交叉、理解生命、人类健康、合成细胞等方面将有重大进展。

关键词： 医学生   人文素养   细胞生物学   立德树人  

摘要： 人文素养教育对于提高医学生的医学教育、科研及医疗服务水平具有重要意义。细胞生物学是医学大类学生的第一门专业课程,可为医学生确立终身继续教育和未来走向临床岗位打下坚实基础。然而,目前尚无将人文素养教育融入细胞生物学教学的相关经验报道。本团队通过在细胞生物学教学计划、运作机制和教学模式等方面融入人文素养教育,从课程设计、教学内容、教学方法和评价方式等环节进行改革与创新,建立并完善了细胞生物学教学与人文素养培育互作体系,以期提升医学生人文素养,为国家和社会培育出高素质型人才。

关键词： 缝隙连接蛋白β2   肺腺癌   细胞增殖   细胞侵袭   细胞迁移   上皮-间质转化  

摘要： 目的:探讨缝隙连接蛋白β2 (GJB2)在肺腺癌(LUAD) A549细胞中的表达情况和生物学功能,为LUAD治疗提供参考。方法:利用TIMER数据库分析多种肿瘤中GJB2基因表达差异,GEPIA数据库检测LUAD中GJB2 mRNA表达情况,分析GJB2基因与LUAD不同临床分期的相关性,采用Kaplan-Meier plotter数据库分析GJB2蛋白与LUAD患者预后的相关性。收集111例LUAD患者癌组织及癌旁正常肺组织样本,采用免疫组织化学染色法观察LUAD患者癌组织和癌旁正常肺组织中GJB2蛋白表达情况。体外培养人肺腺癌A549细胞,将A549细胞分为GJB2过表达组(OE-GJB2组,转染GJB2过表达质粒)及其阴性对照组(OE-NC组,转染GJB2空载质粒)、小干扰RNA (si-RNA)-GJB2组(si-GJB2组,转染GJB2-siRNA)及其阴性对照组(si-NC组,转染对照si-RNA),采用Western blotting法验证细胞转染效率。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测各组A549细胞增殖活性,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组A549细胞阳性表达率,克隆形成实验检测各组A549细胞克隆形成数,细胞划痕实验检测各组A549细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组A549细胞中侵袭细胞数,Western blotting法检测各组A549细胞中GJB2蛋白和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果:GJB2基因在多种肿瘤中均存在异常表达;与癌旁正常肺组织比较,LUAD患者癌组织中GJB2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),且GJB2的高表达与LUAD患者癌的临床病理分期具有关联性(P<0.05);与GJB2低表达LUAD患者比较,GJB2高表达LUAD患者的总生存期明显减少[风险比(HR)=1.71,95%CI:1.34~2.18,P<0.05];GJB2蛋白在癌旁正常肺泡和支气管上皮细胞中均阴性表达,与癌旁正常肺组织比较,LUAD患者癌组织中GJB2蛋白表达明显增强;LUAD患者癌组织中GJB2蛋白阳性表达与淋巴结转移具有明显关联性(P<0.05),但与患者性别(P=0.626)、年龄(P=0.639)和TNM分期(P=0.837)无关联性(P>0.05)。CCK-8法,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞增殖活性明显升高(P<0.05或P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞增殖活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。EdU染色法,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞中EdU阳性表达率明显升高(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞中EdU阳性表达率明显降低(P<0.01)。克隆形成实验,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞克隆形成数明显增加(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞克隆形成数明显减少(P<0.01)。Transwell小室实验,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。细胞划痕实验,细胞划痕24 h后,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞迁移率明显升高(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞迁移率明显降低(P<0.01)。Western blotting法,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞中GJB2和N钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),E钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与si-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞中GJB2和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:GJB2在LUAD患者癌组织中高表达,并与LUAD患者的不良预后有关。GJB2可促进A549细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT。

关键词： 生物信息学   磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1   胆管癌   生物学行为   机制  

摘要： 目的:本研究旨在结合生物信息学探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在胆管癌细胞中的表达,及其对胆管癌细胞增殖、迁移的影响和潜在机制。方法:基于GEO数据库中胆管癌mRNA测序数据筛选差异表达基因。通过STRING网站及Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质互相作用网络(PPI网络),并筛选关键调控网络及基因。通过TCGA数据库及HPA数据库验证关键基因表达量及病理学特征。通过KEGG及GSEA富集分析探究差异基因相关功能及PCK1相关通路。细胞学实验中采用慢病毒转染胆管癌RBE细胞株以过表达PCK1,采用RT-qPCR及蛋白质印迹法验证转染效率。将实验分为阴性对照组(RBE组)、空转组(RBE-NC组)、过表达组(RBE-OE组)及PPARγ抑制剂组(RBE-OE+GW9662组)。采用集落形成实验及CCK8法检测细胞增殖能力,采用划痕愈合实验及Transwell实验检测细胞迁移能力,采用蛋白质印迹检测通路蛋白表达水平。结果:生物信息学分析显示PCK1可以作为胆管癌的关键调控基因,在癌组织中表达水平较低,可能通过PPAR通路发挥作用。细胞学实验显示:RBE细胞经转染后,PCK1 mRNA和蛋白表达水平显著升高。与阴性对照组相比,过表达PCK1抑制RBE细胞体外增殖和迁移能力,同时PPARγ、PTEN蛋白表达升高,而p-mTOR/mTOR水平降低,而抑制剂组则可逆转上述趋势。结论:PCK1可以作为胆管癌的关键调控基因,并可能通路激活PPARγ/PTEN/mTOR信号通路抑制胆管癌增殖及迁移。

关键词： 医学细胞生物学   教学改革   科学精神   学科发展史   案例教学  

摘要： 在高等教育课程思政建设背景下,科学精神的培养在医学教育中已成为塑造学生科研素养与职业品格的关键途径。文章聚焦医学细胞生物学这一生命科学基础学科,系统梳理了细胞生物学学科发展史中的经典案例,根据探索、批判、求实、理性与协作五个维度的科学精神对细胞生物学发展中的经典案例做出了整理和归纳。揭示了探索精神驱动认知边界拓展,批判精神促进科研创新,求实理性精神体现科研本质,协作精神扩展科研视野,加速科研发展。通过将科学精神要素与专业知识模块深度融合,教学设计可引导学生从历史案例中更好把握学科知识,进而形成持久的内驱力。

关键词： 扁蒴藤素   Hippo-Yes相关蛋白信号通路   子宫内膜癌   增殖   迁移  

摘要： 目的探讨扁蒴藤素(pristimerin,PTR)调节Hippo通路中的Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物行为的影响。方法用不同浓度的PTR分别处理Ishikawa细胞48 h,根据细胞存活率筛选合适的PTR浓度用于正式实验。在2.5、5、10μmol/L PTR处理下,CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western Blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、p53、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、大肿瘤抑制基因1(LATS1)、p-YAP1水平。此外,通过转染pcDNA-YAP构建YAP过表达模型,进一步研究PTR对YAP信号通路的调控作用。结果PTR处理剂量依赖性抑制Ishikawa细胞的细胞活力、克隆形成率、细胞迁移力和侵袭力,下调MMP-2、PCNA、MMP-9、p-YAP1水平,增加细胞凋亡率及p53、LATS1蛋白水平;PTR处理产生的上述作用可被过表达YAP所减弱。结论PTR抑制Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭及促进细胞凋亡的机制可能与抑制Hippo-YAP通路有关。

关键词： 新医科   医学细胞生物学   教学改革与实践   课程思政   问卷调查  

摘要： 为了适应新医学建设的要求,高等医学教育需要落实立德树人的培养目标;因此,作为医学专业的专业基础课,医学细胞生物学教学需要在教学模式的多个环节上进行综合改革。本文从发掘教材中蕴含的思想政治元素、优化教学内容体系、灵活运用多种教学方式、加强课外引导监督这四个环节入手,对医学细胞生物学教学模式进行改革和实践;并采用问卷调查的形式来获取教学反馈信息,这些改革举措不仅为不断深化医学细胞生物学教学改革奠定了基础,也能为其他院校的教学改革提供借鉴。

关键词： 综合性学术期刊   细胞生物学  

摘要： 《生命科学》是由中国科学院上海营养与健康研究所主办,国家自然科学基金委员会生命科学部和中国科学院生命科学和医学学部共同指导的综合性学术期刊。本刊宗旨是以评述、综述、研究简讯(动态)等形式报道生命科学研究的发展趋势、学术动态和研究成果,以促进学术交流。欢迎踊跃投稿。1投稿范围 细胞生物学与发育生物学、免疫学、遗传学、生物化学与分子生物学、生物医学工程学、药物学与药理学、动物学、植物学、微生物学、林学、农学、生态学、生物物理学、神经科学、畜牧兽医学与水产学、生理学与病理学、预防医学、临床医学基础学科等与生命科学相关的研究领域。只刊登综述和评述类文章。

关键词： 杂交瘤   单克隆抗体   癌胚抗原细胞黏附分子5   抗体偶联药物  

摘要： 目的 制备靶向人癌胚抗原相关细胞黏附分子5(carcinoembryonic antigen cell adhesion molecule 5,CEACAM5)单克隆抗体及其抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC),并对其生物学活性进行初步评价。方法 用人CEACAM5与hFc融合蛋白免疫雌性BALB/c小鼠,采用电融合技术制备杂交瘤,ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株。通过RACE PCR法获得鼠源抗体的可变区序列,并构建嵌合抗体,采用ELISA法和流式细胞术对嵌合抗体的特性进行评价,报告基因法对嵌合抗体的抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)活性进行检测。利用糖基偶联技术制备ADC,并对其活性进行评价。结果 利用杂交瘤技术筛选获得1株具有特异性结合活性的杂交瘤细胞株,命名为mAb186;成功获得抗体可变区序列,并构建了嵌合抗体ch186,其特异性结合人CEACAM5的B3结构域,未检测到对靶细胞的ADCC活性。成功制备了偶联甲基澳瑞他汀E(monomethyl auristatin E,MMAE)小分子的ADC,其对靶细胞具有杀伤作用,且具有一定的剂量效应。结论 成功制备了特异性结合人CEACAM5的单克隆抗体,并对嵌合抗体和ADC的结合活性及细胞杀伤活性进行了评价。

关键词： 胃癌   SORT1   预后   上皮间质转化,Wnt/β-连环蛋白通路  

摘要： 目的探讨SORT1在胃癌组织中的表达情况,分析其与患者临床预后的关系以及参与胃癌进展的途径及机制。方法采用基因表达谱交互分析数据库、Western blot和免疫组织化学染色预测并分析SORT1在胃癌及癌旁组织中的表达情况。收集2015年4月至2017年4月蚌埠医科大学第一附属医院行胃癌根治术的109例患者的临床病例资料,分析SORT1与患者临床病理参数以及预后的关系。采用CCK-8法和克隆形成实验检测胃癌细胞的增殖情况,细胞划痕实验和Transwell实验检测胃癌细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测胃癌细胞上皮间质转化(EMT)过程中相关蛋白表达,并进一步分析SORT1调控胃癌细胞EMT的分子机制。结果Western blot和免疫组织化学染色结果显示,SORT1在胃癌组织中呈高表达(P=0.003,P<0.001),且与肿瘤的恶性进展呈正相关(P均<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,SORT1高表达患者的术后生存期明显缩短(P<0.001);Cox回归模型显示,SORT1表达是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(P<0.001)。上调SORT1表达显著促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭以及EMT过程(P均<0.05),而下调SORT1结果则相反(P均<0.05)。Western blot结果显示,高表达SORT1显著促进β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1及c-Myc的蛋白表达(P均<0.05),且体外使用Wnt/β-连环蛋白通路抑制剂(XAV939)能够明显抑制高表达SORT1导致的胃癌细胞EMT能力的增强(P均<0.05)。结论SORT1在胃癌中高表达且影响患者术后生存期,其参与胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并可能通过激活Wnt/β-连环蛋白通路促进胃癌细胞EMT过程。