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关键词： 期刊   报刊   主编   编辑人员   Cell Research   出版   细胞生物学  

摘要： 《细胞研究》期刊是由中国科学院上海生命科学研究院和中国细胞生物学学会联合出版的一份细胞生物学领域有悠久历史的英文月刊,近年来已从国内的一家小期刊发展成为亚太地区的一流科学期刊之一,该刊目前所享有的国际声望和关注很多都可归功于与自然出版集团(NPG)的一个持续合作项目。这个项目从2006年开始,当时该刊被纳入了后者的"亚洲学术期刊"计划。本文是对在这个合作项目中所涉及的关键人士的五篇系列采访文章当中的第五篇,在这篇文章中,《自然细胞生物学》期

关键词： mTOR   肺癌   A549   慢病毒   RNA干扰  

摘要： 1目的 肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤,近年来肺癌的发病率和病死率均迅速上升,其中男性患者中肺癌的死亡率已居首位。其中非小细胞肺癌的发病率在所有肺癌中比例最高。肺癌的发生及发展与肿瘤相关基因的异常表达存在着密切的关系。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)作为一种高度保守的蛋白激酶,可以通过整合生长因子和营养信号来调节肿瘤细胞生长,是肿瘤生物调节中的关键性基因。目前mTOR已成为肿瘤治疗的生物靶点。 慢病毒介导的RNA干扰是目前公认的最有效的基因沉默手段之一。本文拟通过利用慢病毒介导的RNA干扰技术,以非小细胞肺癌细胞A549为研究对象,以mTOR为目的靶基因。利用MTT、流式细胞术、克隆形成、Transwell及裸鼠体内试验等技术,分别在体外及体内环境中探讨降低mTOR的表达对A549细胞生物学行为的影响。此外通过检测P70S6K, MT1-MMP, HIF-1a, VEGFA, cyclinD1等基因的表达变化,进一步分析mTOR调控肿瘤生物学功能的分子机制。本研究旨在通过以上实验探讨mTOR在肺癌细胞中的作用及其机理,同时为mTOR作为治疗性靶基因在临床方面的应用、为肺癌的基因治疗、基因药物的研制提供必要的实验依据。 2方法 2.1根据mTOR编码区基因序列,设计合成4条shRNA,并克隆到慢病毒表达载体。转染A549细胞后,应用RT-PCR及western blot检测其干扰效果,并确定干扰效率最好的一条shRNA。最后分别将其包装成带有GFP标签及Puro抗性基因的慢病毒颗粒。 2.2体外实验中,将带有GFP绿色荧光标签的慢病毒感染A549细胞。应用MTT、细胞生长曲线、克隆形成、流式细胞术检测A549细胞的增殖和凋亡能力；应用transwell检测细胞侵袭能力；利用western blot检测mTOR的表达降低对P70S6K,MT1-MMP, HIF-1a, VEGFA, cyclinD1蛋白表达的影响。 2.3体内实验中,利用带有Puro抗性基因的慢病毒感染A549细胞并获得持续表达mTOR shRNA及对照病毒的稳定细胞株。将获得的稳定细胞株扩增并以107/只的细胞浓度接种裸鼠。接种后对裸鼠的体重及肿瘤形成进行监测,分析mTOR的低表达对A549细胞成瘤性的影响。 2.4统计学处理：应用SPSS16.0统计分析软件进行统计学处理,计量资料采用均数士标准差(X±s)表示,多样本均数比较采用方差分析,两两比较采用LSD比较,率的比较采用X2检验等进行统计学处理,显著性检验水准取a=0.05。 3结果3.1成功将四条mTOR shRNA克隆至pSIHl-H1-copGFP慢病毒克隆载体,分别为Sh-mTOR-6506, Sh-mTOR-3266, Sh-mTOR-4995, Sh-mTOR-6216。分别转染A549细胞后,通过RT-PCR及western blot验证mTOR的表达水平后发现,Sh-mTOR-6216对A549细胞中mTOR的抑制率可达70%以上,干扰效率明显高于其他干扰组及对照载体组。然后成功包装含有该shRNA序列的带有GFP荧光标记的慢病毒lenti-GFP-mTOR及Puro抗性基因的慢病毒lenti-Puro-mTOR,分别用于以下的体外实验及体内试验。 3.2体外实验中,利用lenti-GFP-mTOR慢病毒感染A549细胞。感染后48h,MTT检测结果显示：空细胞组,对照慢病毒组及lenti-GFP-mTOR组在570nm的吸光度值分别为：0.687±0.103,0.667±0.037,0.356±0.059。lenti-GFP-mTOR组的细胞活力较其它两组有明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)；对照病毒组与空细胞组之间无明显差异,不具有统计学意义。 3.3病毒感染后,A549细胞克隆形成结果显示：空细胞组克隆形成的数量为63±10.536,对照病毒组克隆形成的数量为59.333±9.713,lenti-GFP-mTOR组克隆形成的数量为16±4.583。以上数据说明mTOR的表达降低能够有效地抑制A549细胞克隆形成能力与其余两组相比明显变弱,形成的克隆数量明显变少,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照病毒组与空细胞组之间虽略有差异,但不具有统计学意义。 3.4Transwell实验显示,病毒感染后24h,空细胞组穿膜细胞数为124.333±6.110,对照病毒组穿膜细胞数为109.333±11.504,lenti-GFP-mTOR组穿膜细胞数为18±5.568。lenti-GFP-mTOR穿膜细胞数较空细胞组及对照病毒组相比明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。

关键词： 慢性粒细胞白血病   急性变   骨髓间充质干细胞   基因芯片   细胞凋亡  

摘要： 目的：慢性粒细胞白血病(CML)是一种起源于异常造血干细胞克隆的骨髓增殖性疾病,细胞遗传学特征是具有Ph染色体(philadelphia chromosome),即t(9;22)(q34;q11),在其分子水平形成BCR/ABL融合基因。CML从慢性期发展到急变期,往往伴随着BCR/ABL mRNA水平的明显升高。BCR/ABL与CML的发病密切相关。CML的自然病程可以分为慢性期(chronic phase, CP)、加速期(accelerated phase, AP1和急变期(blast crisis phase, BP)。进展到急变期后生存期仅3-6个月,治疗效果差,急性变是引起患者死亡的主要原因。如何阻止CML急变的发生是治疗中的关键。这就要求深入了解CML急变的分子机制,早期诊断早期治疗,具有重要的临床意义。研究CML急变发病机制,寻找适合的治疗靶点,已成为国内外研究的热点。现普遍认为,慢性粒细胞白血病的急变涉及多基因、多信号通路调控的异常。涉及到癌基因、抑癌基因的改变,端粒酶的激活,染色体异常变化以及DNA修复功能的异常等多种原因。目前大部分的研究都集中在造血干细胞的异常,例如发现大部分急变患者都有bcr/abl融合基因的异常,另外常常伴随其它基因异常,如抑癌基因p53、p16和Rb,癌基因ras、 mye及转化基因Evi-1等,但是对于骨髓间充质干细胞(BMMSCs)在慢性粒细胞白血病急变中的意义却鲜有人关注。 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)是存在于骨髓当中,不同于造血干细胞的另一类骨髓干细胞,最早由Friedenstein于1968年从骨髓中分离出来发现。具有自我更新、多向分化的能力。 BMMSCs在特定条件下可以分化为多种细胞如成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经细胞等,同时分泌多种细胞因子,参与造血微环境的组成。通过与造血细胞直接接触和表达多种细胞因子,实现对造血细胞增殖和分化的调节作用。 BMMSCs作为另一类骨髓干细胞,参与造血微环境的组成,与造血细胞关系密切。虽然CML急变原因仍不清楚,但是近期的一些研究发现,多数肿瘤细胞是因为信号通路的异常活化而获得了超强的无限增值能力。从这一角度出发,我们想到,急变期BMMSCs功能是否异常,与正常人及慢性期BMMSCs有无区别,在CML急变中扮演何种角色,起到何种作用?CML急变是否有BMMSCs的参与?是由于其本身的变化引起了CML急变,还是白血病细胞急变在先,或是二者之的相互作用最终导致了CML急变?这些问题都需要进一步的探索研究。本研究以急变期BMSC为研究对象,完成CML患者急变期和慢性期BMSC的培养纯化及鉴定,了解CML二期的BMSC在增殖,分化,凋亡等方面的异同点,分别将K562细胞和CML急变期原代细胞与急变期BMMSCs共培养,对比CML慢性期和正常人的BMMSCs,观察急变期BMMSCs对K562细胞及白血病原代细胞增殖、凋亡的影响,并检测其可能的作用机制,探讨BMMSCs参与的信号传导通路在白血病发病中的作用机制。最后通过基因芯片的研究,了解CML急变期的BMSC的基因表达的特点,筛选出关键的差异基因及信号通路变化,从一个全新的、易于实施的研究思路,从BMMSCs的角度探讨CML急变的特点。 方法：1.分离培养扩增CML慢性期BMMSCs和急变期患者BMMSCs;以正常人为对照组。观察急变期患者BMMSCs的原代细胞培养的特点,以及扩增传代的特征。2.显微镜下观察急变期BMMSCs的形态变化：于倒置相差显微镜下观察BMMSCs细胞形态,选取生长良好的P3代以后的细胞,进行瑞氏染色、固定,显微镜下观察形态并照相。3.流式细胞仪检测急变期BMMSCs的表面标志与慢性期和正常组比较有无差异。 ***法测定急变期BMMSCs生长曲线特点,并观察集落形成(CFU-F)的数量变化。 5.流式细胞仪方法检测急变期BMMSCs的细胞周期分布及自发的细胞凋亡。 6.用RT-PCR检测CML急变期BMMSCs表达造血生长因子(SCF、 IL-12、 TPO、 IL-6、 GM-CSF)及成脂成骨分化的标志基因,同时检测Bcr／abl融合基因,与CML慢性期的BMMSCs匕较,了解有无差异。 7.加入分化诱导液研究CML急变期患者BMMSCs和慢性期BMMSCs成脂肪成骨分化能力的检测,以正常人为对照。 8.通过人类全基因组表达谱芯片,研究CML慢性期BMMSCs和急变期患者BMMSCs,了解CML急变期的BMSCs的基因表达的特点,寻找异常表达的基因,荧光实时定量PCR检测分析鉴定基因芯片的准确性。 9.建立BMMSCs与K562细胞或CML-BP原代细胞的共培养体系,直接计

关键词： 核干细胞因子   白血病细胞   PPP2R5A   脂质体转染   细胞生物学   流式细胞术  

摘要： 目的： Nucleostemin是2002年发现并被命名的一种基因,其表达产物NS蛋白参与维持干细胞和肿瘤细胞的增殖状态,广泛表达于干细胞和肿瘤细胞的胞核中,可以通过与P53蛋白相结合影响细胞的生物学效应。人为下调NS的表达可以改变细胞的生物学性状。先前的研究证实NS在多种白血病细胞系以及急性白血病中都存在高表达现象,也通过一系列分析推测NS除了与细胞内的P53相结合外,还有可能存在另外一条信号转导通路发挥作用。有关资料显示NS与人蛋白磷酸酶2A(PP2A)上的调节亚基的α异构体PPP2R5A之间有着相互作用。PP2A是哺乳动物中含量最为丰富的丝/苏氨酸特异性蛋白磷酸酶,约占细胞总蛋白的0.3%,被认为在许多生命活动中扮演了重要的角色,尤其是细胞的分化、增殖和凋亡,通过对蛋白激酶的反馈调节,在许多信号通路中起着重要的作用,在细胞膜、质和核中都行使着重要的功能,同时也参与了肿瘤的发生与发展。先前的课题研究证实PPP2R5A在急性白血病细胞中也存在表达并通过免疫组化和免疫共沉淀技术证实两者之间有着相互结合,此现象提示了PPP2R5A有可能是NS除P53外的另一条信号转导通路。这也解释了对于大部分急性白血病细胞都是p53缺失或者突变,不能产生有正常功能的P53蛋白的同时,NS是通过何种途径发挥其维持细胞增殖状态作用的。导师课题的总目标是探讨是否存在非P53依赖性的NS信号传导途径,如果存在,此通路是否与PPP2R5A介导的信号通路有关?本课题为其中一个小子课题,旨在验证PPP2R5A是否和细胞的增殖、分化、凋亡相关,人为抑制PPP2R5A的表达,细胞的生物学状态是否有所改变,为寻找非P53依赖性信号转导通路奠定基础。 方法： (1)利用脂质体转染技术将针对PPP2R5A的siRNA转染到白血病细胞HL-60、THP-1和Raji细胞内,沉默PPP2R5A基因。 (2) RT-PCR法和免疫细胞化学法检测siRNA的转染效果并找出最佳转染浓度和时间。 (3)倒置显微镜观察转染组和对照组细胞的生长状态并绘制细胞生长曲线。 (4)瑞-吉染色观察转染组和对照组细胞的胞核、染色质及形态改变。 (5)流式细胞术Annexin V/PI双染法进行细胞凋亡分析,PI DNA染色法进行细胞周期测定。 (6)数据结果用SPSS17.0统计软件处理,对定量资料的统计学均数用均数士标准差来表示,对于定性资料用卡方检验,多样本均数比较采用方差分析,如果方差不齐则进行变量变换。显著性检验水准为a=0.05。 结果： (1) RT-PCR法和免疫细胞化学染色显示1×105/ml的细胞浓度,siRNA-PPP2R5A终浓度为65nM时转染后细胞PPP2R5A表达量显著降低。 (2)倒置显微镜观察显示转染48h后细胞出现大小不均,聚团性变差,细胞散在或不聚团,细胞形状不一,部分细胞胞体不完整,细胞碎片增多。 (3)瑞-吉染色显示转染后细胞形态变的不规则,胞体大小不一,胞体不完整,碎片增多,核趋于聚集,并有凋亡小体形成。 (4)细胞凋亡分析和细胞周期测定显示转染组凋亡细胞百分比率增高,G1期和G2/M期细胞百分比上升,而S期细胞百分比减低,表明细胞增殖减弱。 结论 (1)本实验成功转染急性白血病细胞,显著干预了PPP2R5A基因的表达,细胞呈现出一系列趋于凋亡和细胞周期改变的迹象。 (2)验证了PPP2R5A和细胞的凋亡分化有一定关系,为验证NS非P53途径的信号通路是否与PPP2R5A有关奠定了基础。

关键词： 分子细胞生物学   IFCC   生化  

摘要： 详情请登录中国生物化学与分子生物学会网站http://***/或者是登录培训班网站:http://***/ifcc2012/查询,或者直接联系我们:联系人:宋娟孙

关键词： podoplanin   CLEC-2   蜕膜基质细胞   增殖   侵袭   早孕期  

摘要： 目的：探讨跨膜糖蛋白podoplanin在人早孕期母胎界面的表达及其对蜕膜基质细胞增殖及侵袭等生物学功能的影响。 方法：收集正常早孕期蜕膜及绒毛组织，应用本实验室建立的胰酶消化、密度梯度离心法分离和培养蜕膜基质细胞（decidual stromal cells，DSCs）和滋养细胞（trophoblasts，Tros）。采用免疫组织化学、免疫细胞化学以及流式细胞术分别检测podoplanin和及其受体C型凝集素样受体-2（C-type lectin-like receptor-2，CLEC-2）的表达水平和特点;并以siRNA干扰技术沉默蜕膜基质细胞podoplanin的表达，然后采用MTT比色法检测其活力、BrdU细胞增殖ELISA法检测其增殖能力、以流式细胞术分析其凋亡情况以及Transwell法分析podoplanin沉默后细胞侵袭能力的改变。 结果：正常早孕蜕膜基质细胞和滋养细胞均表达podoplanin和CLEC-2，podoplanin在DSCs的表达水平显著高于Tros者，而CLEC-2在Tros和DSCs中表达水平均较低;采用siRNA干扰podoplanin在DSCs的表达后，在显著降低细胞活力并抑制细胞增殖和侵袭能力的同时，促进了该细胞的凋亡。 结论：人早孕期母-胎界面均表达podoplanin及其受体CLEC-2，且podoplanin在蜕膜基质细胞的表达水平较高，提示podoplanin可能通过与内源性受体CLEC-2的相互作用参与调节DSCs的生物学功能并维持正常妊娠。Podoplanin可能在促进蜕膜基质细胞的增殖和侵袭、抑制其凋亡的信号通道中发挥着中介作用，这种作用有利于维持细胞自身的正常生物学功能和调节滋养细胞侵袭过程，从而最终有利于胎盘的形成和正常妊娠的维持。

关键词： 中国科学院院士   生物化学   细胞生物学   中科院院士   基础医学   中国科学院上海生物化学研究所   李林  

摘要： 2011年中科院院士增选结果12月9日揭晓,51名科学家新当选为中科院院士,中国蛋白质专业委员会委员、上海生物化学与细胞生物学研究所李林研究员当选。李林,1961年生,1983年毕业于南京大学生物系,1989年在中国科学院上海生物化学研究所获博士

关键词： 元基因组学   生命   功能   蛋白质   物理原理   细胞生物学   新书推介   出版社   文化机构   新生物学   菲利普斯   基因组文库   定量模型   筛选技术  

摘要： 细胞的物理生物学新生物学丛书R.菲利普斯J.康德夫J.塞里奥特著涂展春等译2012年3月978-7-03-033516-6平装16开$158.00本书从物理生物学的角度将物理原理相似的生物学问题放在一起统一处理,探讨如何将物理和数学的工具和观念应用于分子和细胞生物学的研究,讲述如何针对细胞生物学中典型的实例和实验建立简单而实用的物理模型,从而表明由基本物理原理导出的定量模型可以深刻而直观地理解细胞生物学和生命现象的深层规律.

关键词： 间充质干细胞   胎盘组织   生物学特性   细胞移植   局灶性脑缺血   动物实验  

摘要： 间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells，MSCs)是一种具有自我更新和多向分化能力的干细胞，有着潜在的临床应用价值。以往研究主要集中在人骨髓来源的间充质干细胞，但由于人骨髓来源的间充质干细胞的获得需要通过骨髓穿刺，而且其数量随年龄的增长而急剧下降，限制了人骨髓源间充质干细胞的应用。近年来有实验表明，MSCs还可从脐血、胎盘、羊水、脐静脉内皮下层、外周血及肌肉等组织中分离得到。其中，胎盘组织最受关注，它除了在胎儿发育、营养支持和维持耐受中发挥重要作用外，含有丰富的成体干细胞，成为寻找人类成体干/祖细胞的新组织来源。胎盘来源MSCs的表型、分化潜能与骨髓MSCs相似，且胎盘作为孕妇分娩后的废弃物，易于获得且对其研究和应用无伦理道德的争论，目前已成为间充质干细胞来源的新的研究热点。<br>　　 胎盘羊膜中胚层(Amniotic Mesoderm)和绒毛膜中胚层（Chorionic Mesoderm）分别是体外分离获得羊膜间充质干细胞(Amniotic Mesenchymal stem cells，AMSCs)和绒毛膜间充质干细胞(Chorionic Mesenchymal stem cells，CMSCs)的组织来源，两者均由胚胎发育过程中的胚外中胚层(Extroembryonic Mesoderm)发育而来，但是随着胚外中胚层被分割并与不同的胚胎组织发生相互作用，分布于不同位置的胚外中胚层组织发生了不同的变化，这些变化是否会导致体外分离培养获得的MSC具有不同的生物学特性，进一步深入研究不同来源MSCs生物学特性，将为不同疾病模型的修复提供更有针对性的种子细胞。<br>　　 本研究旨在建立了有效的AMSCs和CMSCs体外扩增体系，比较两群MSCs的生物学特性，并在此基础上，将AMSCs通过立体定向技术注入大鼠局灶性脑缺血MCAO模型（大脑中动脉闭塞脑出血模型，middle cerebral artery occlusion model，MCAO模型）脑内，观察植入细胞的存活、迁移、分化及大鼠神经功能恢复，初步探讨AMSCs移植治疗局灶性脑缺血的作用和可能机制。<br>　　 第一部分AMSCs和CMSCs组织分布及体外扩增体系的建立。<br>　　 目的:分析AMSCs、CMSCs在人胎盘组织中的分布特性、并建立相应的体外扩增体系。<br>　　 方法:取健康产妇正常剖宫产之足月胎儿的新鲜胎盘组织，钝性分离羊膜层与绒毛膜层，采用不同方法对羊膜、绒毛膜组织进行消化及体外培养，倒置显微镜观察体外培养AMSCs、CMSCs的细胞形态;流式细胞仪分别检测其表面标志;采用多种诱导条件分别将两群MSC细胞向脂肪细胞、软骨细胞及骨细胞方向诱导，并用特异性染色法对诱导后细胞进行鉴定。比较多种因子不同浓度下对CMSCs体外扩增效果，选取75ng/mlFL进一步比较其对两群MSC细胞的扩增效果，流式细胞仪检测优化培养条件下培养的两群MSC的细胞表型;细胞计数分析FL对两群MSCs的促增殖作用;RT-PCR分析两群MSC中FL受体flt3基因表达;分别将FL作用下的两群MSC细胞向脂肪细胞、软骨细胞及骨细胞方向诱导，RT-PCR分析脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞特异性基因在诱导后两群MSC细胞中的表达情况。<br>　　 结果:(1)免疫荧光染色显示:羊膜组织中CD90和CD166阳性细胞主要分布于羊膜上皮和羊膜间质中，而绒毛膜组织中CD90和CD166阳性细胞主要分布血管内皮下、血管附近间质内;免疫组织切片染色结果显示:羊膜上皮、绒毛膜板间质内以及绒毛中轴血管周围间质内可见CD105阳性染色的细胞;(2)倒置显微镜观察AMSCs、CMSCs均呈典型的成纤维细胞样贴壁生长，流式细胞仪分析显示，两群MSC均高表达CD73、CD90和CD105，不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR;(3)体外扩增培养的AMSCs、CMSCs成骨诱导后，细胞均由长梭形向立方形转变，Von Kossa染色可见细胞呈集落生长并出现钙结节;成软骨诱导2周后，AMSCs、CMSCs形态逐渐变得扁平，anti-collagen typeⅡ免疫组织化学染色可见阳性细胞表达Ⅱ型胶原;成脂肪诱导2周，培养的两群MSC细胞内均有明显的脂滴出现，油红O染色阳性;(4)细胞计数结果表明，含FL的培养基能有效地促进两群细胞的体外增殖，且FL对CMSCs的促增殖作用更强;(5)流式细胞仪分析显示，含FL的培养基培养的两群MSC仍高表达CD73、CD90、CD105，不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR;(6) RT-PCR结果显示，AMSCs、CMSCs均表达flt3的mRNA;添加

关键词： 肝细胞生长因子   髓核细胞   椎间盘退变  

摘要： 背景椎间盘退变（intervertebral disc degeneration，IVD）是椎间盘突出、椎体滑脱、椎管狭窄等脊柱疾病的首要病因。研究证实，占椎间盘体积1%的髓核细胞在维持正常椎间盘细胞和细胞外基质平衡以及在修复退变的椎间盘过程中发挥着核心作用。肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）是人体中重要的细胞因子，存在于多种组织与细胞，发挥促进细胞增殖、基质表达、血管新生、抑制细胞凋亡等作用，在生命的器官发生、形态形成、个体发育以及组织修复中发挥作用。通过肝细胞生长因子对髓核细胞作用，研究髓核细胞增殖活性以及细胞外基质表达变化，为修复退变的椎间盘寻求切实可靠的方法。 目的1.探讨肝细胞生长因子（HGF）对体外培养的人退变髓核细胞的生物学作用。 2.研究肝细胞生长因子与胰岛素样生长因子联合作用对人退变髓核细胞的影响。 方法收集人退变髓核组织标本，分离培养髓核细胞；免疫组织化学法检测髓核细胞Ⅱ型胶原表达，HE染色观察细胞形态；免疫组化染色观察HGF受体在髓核细胞中表达；设立HGF：0 ng/ml、5ng/ml、50ng/ml、500ng/ml组，采用MTT法测细胞生长曲线，筛选HGF最佳作用浓度；选取第3代髓核细胞，实验分HGF组、HGF+IGF组、IGF组、对照组，RT-PCR检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9 mRNA表达；流式细胞术测定细胞增殖的周期。 结果免疫组化Ⅱ型胶原染色可见细胞外和胞浆内棕褐色颗粒；HE染色细胞核染成紫色；免疫组化显示髓核细胞表达HGF受体；MTT法提示不同浓度肝细胞生长因子对体外培养的人退变髓核细胞均有明显的促增殖作用，与对照组相比差异均有意义，50ng/ml是实验中肝细胞生长因子的最佳作用浓度；HGF、HGF+IGF、IGF刺激后髓核细胞进入增殖期比例增加，同时促进髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9 mRNA表达量增加，其中HGF+IGF效果更为显著。 结论1.人退变髓核细胞存在HGF受体； ***对体外培养的人退变的髓核细胞有促增殖作用，可以促进细胞外基质表达；HGF与IGF联合作用效果优于两者单独作用。