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关键词： 幼儿腹泻   轮状病毒   灭活疫苗   细胞生物学  

摘要： 轮状病毒(Rotavirus，RV)感染是引起5岁以内婴幼儿腹泻的主要病因之一，每年全球大约有53万人因感染RV死亡，而其中的85%发生在发展中国家。目前针对RV感染性腹泻仍无特效药治疗，RV感染已经成为严重的全球公共卫生问题，给世界各国带来沉重的疾病负担和经济负担。开发疫苗预防婴幼儿RV腹泻被认为是最好的防御措施。世界卫生组织(World Health Organization，WHO)全球疫苗及免疫联盟(The Global Alliance for Vaccines and Immunization，GAVI)以及比尔盖茨基金会等机构正在世界范围内积极促进不同形式RV疫苗的发展。目前国内外上市的RV疫苗均为口服减毒活疫苗，减毒活疫苗在安全性方面尚存在一些潜在的风险，因此，研究和开发RV灭活疫苗(Inactivated rotavirusvaccine，IRV)将是预防RV感染的一项重要策略和有效补充。\n 本研究目的在于将实验室的规模培养扩大到中试规模，探索其过程中的条件，并对中试规模获得的疫苗进行初步的免疫原性评价。本实验利用转瓶培养技术和细胞微载体培养技术探索规模化培养RV的工艺，用上述方法制备了Wa和SA11株RV，经纯化、灭活、佐剂吸附等工艺，制备成试验性灭活疫苗；采用两株试验性IRV分别间隔2周经肌肉途径两次免疫Wistar大鼠和恒河猴，应用ELISA法与微量中和试验方法检测大鼠和恒河猴血清中抗RV特异性抗体效价和中和抗体效价，流式细胞术分析恒河猴血液T淋巴细胞亚群变化情况。实验结果表明，通过转瓶培养和生物反应器发酵制备RV，每批次可制备约10～40L的RV病毒收获液，收获的RV制备得到的Wa株和SA11株试验性IRV抗原含量分别为10240EU/ml和5120 EU/ml，达到了中试规模制备的目的和要求。病毒免疫原性试验证明，经2次肌肉注射免疫后，两株试验性IRV诱导大鼠产生的血清IgG抗体效价分别为(43407.71±1654.51)和(41520.61±2047.61)，诱导恒河猴产生的血清IgG抗体效价分别为(13654.45±3125.27)和(10350.68±997.83)；免疫后产生的中和抗体在体外中和实验中，可以中和同型感染性G1型RV和异型感染性G3型RV，显示一定的交叉保护作用。细胞免疫检测发现两株试验性IRV免疫恒河猴后均能刺激其CD4+T淋巴细胞增加，CD8+T淋巴细胞无明显变化。结论：运用转瓶系统和生物反应器微载体培养系统可以实现规模化制备RV；两株试验性IRV能够诱导实验Wistar大鼠和恒河猴产生良好的免疫反应及型间交叉识别作用，为进一步研究轮状病毒规模化培养条件及疫苗研制做出有益探索。

关键词： 肝肿瘤   Skp2基因   慢病毒载体   Sp1基因   p27基因  

摘要： 目的研究Skp2基因表达下调对HepG2细胞生物学特性及p27和SP1蛋白表达的影响。方法构建Skp2基因干扰慢病毒质粒,包装后感染HepG2细胞,48 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况;侵袭小室试验检测细胞侵袭能力;Western blot检测Skp2基因下调后p27和SP1蛋白的表达情况。结果与正常HepG2细胞组相比,Skp2干扰慢病毒组细胞Skp2蛋白的表达明显下调,p27蛋白表达大幅增加,细胞生长速度明显减慢,细胞凋亡率增加近两倍,G0/G1期细胞增多;SP1蛋白表达减少,浸润、迁移的细胞数减少约50%(P<0.05)。结论 Skp2蛋白表达下调抑制了HepG2细胞的增殖,促进HepG2细胞的凋亡,造成细胞侵袭能力减弱。Skp2蛋白表达下调导致p27蛋白表达上调、SP1蛋白表达下调,在上述生物学特性变化中可能发挥了重要作用,为深入探讨肝癌的病理机制奠定了基础。

关键词： 医学研究   细胞生物学   疾病认识   人类疾病   分子机制   信息库   临床决策   组织样本  

摘要： 随着对人类疾病认识的新见解的不断提出，逐渐改变了对疾病原有的诊断、治疗及临床决策。是否需要一个分子和细胞生物学角度的新的人类疾病的分类呢？美国国家研究理事会于11月2日提出“走向精确医学”的说法。精确医学中定义疾病除了根据传统的症状和体征之外，还根据疾病的分子机制及其他因素。此外，还需要一个能够有助于获得患者信息和组织样本进行生物医学研究的信息库，该信息库由可供研究使用的庞大的患者人群信息和能够整合疾病病因、并允许研究人员和公众分享及更新信息的知识网络所组成。

关键词： Adult stem cells   Embryonic stem cells   Cancer stem cells   Induced pluripotent stem cells   Mesenchymal stem cells   Tissue-specific stem cells   Genomics  

摘要： To celebrate 30 years of peer-reviewed publication of cutting edge stem cell research in Stem Cells, the first journal devoted to this promising field, we pause to review how far we have come in the three-decade lifetime of the Journal. To do this, we will present our views of the 10 most significant developments that have advanced stem cell biology where it is today. With the increasing rate of new data, it is natural that the bulk of these developments would have occurred in recent years, but we must not think that stem cell biology is a young science. The idea of a stem cell has actually been around for quite a long time having appeared in the scientific literature as early as 1868 with Haeckels' concept of a stamzelle as an uncommitted or undifferentiated cell responsible for producing many types of new cells to repair the body [Naturliche Schopfungsgeschichte, 1868; Berlin: Georg Reimer] but it took many years to obtain hard evidence in support of this theory. Not until the work of James Till and Ernest McCulloch in the 1960s did we have proof of the existence of stem cells and until the derivation of embryonal carcinoma cells in the 1960s-1970s and the first embryonic stem cell in 1981, such adult or tissue-specific stem cells were the only known class. The first issue of Stem Cells was published in 1981; no small wonder that most of its papers were devoted to hematopoietic progenitors. More recently, induced pluripotent stem cells (iPSCs) have been developed, and this is proving to be a fertile area of investigation as shown by the volume of publications appearing not only in Stem Cells but also in other journals over the last 5 years. The reader will note that many of the articles in this special issue are concerned with iPSC; however, this reflects the current surge of interest in the topic rather than any deliberate attempt to ignore other areas of stem cell investigation. STEM CELLS 2012;30:2-9

关键词： 生物医学   讨论会   东亚   细胞生物学   科学研究院   生物化学   专家学者   医学领域  

摘要： 2011年12月7日～9日，第十八届东亚生物医学讨论会议暨第十届两岸生物医学研讨会于上海召开，此次会议由中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所（以下简称：中科院上海生化与细胞所）主办。赛默飞世尔科技（以下简称：赛默飞）赞助了此次会议的欢迎晚宴，与行业内的专家学者进行了积极的交流。此外，赛默飞还在会场设立了展台，向与会嘉宾展示了赛默飞在生物医学领域的先进产品及解决方案。

关键词： 生物物理学   生物化学   征稿简则   分子生物学   细胞生物学   蛋白质组学   系统生物学   学术期刊  

摘要： （2011年12月修订）1 征稿范围与栏目设置1.1征稿范围本刊为国内外公开发行的全国性学术期刊,月刊,每月20日发行.征稿的学科范围是生物化学、分子生物学、生物物理学、细胞生物学、神经科学、免疫学,以及基因组学、蛋白质组学、系统生物学等相关学科领域 .

关键词： 菌物学   征稿简则   学报   中国科学院   系统分类学   资源开发利用   细胞生物学   区系地理学  

摘要： 1 刊物简介 《菌物学报》（曾用名《真菌学报》、《菌物系统》）1982年创刊，是中国科学院主管的菌物学学术期刊，报道菌物（真菌、粘菌、卵菌等）学研究领域最新成果。主要刊登菌物系统分类学、菌物分子与细胞生物学、菌物区系地理学、菌物多样性及资源开发利用、动植物病原菌物学、医学真菌学、食用和药用真菌学等方面的研究论文、简报和综述。本刊是中国自然科学核心期刊，也是国际菌物学界信赖的刊物，已被国内外多家权威检索系统收录。

关键词： 胰岛素样生长因子1   血小板源性生长因子   髓核细胞   退变   组织工程  

摘要： 背景:有研究表明胰岛素样生长因子1和血小板源性生长因子可抑制人椎间盘细胞凋亡。目的:观察在体外培养条件下胰岛素样生长因子1、血小板源性生长因子对人退变髓核细胞生物学活性的影响。方法:体外单层培养人退变髓核细胞,通过免疫组织化学鉴定细胞。对传3代人退变髓核细胞采用分别不同生长因子干预,实验分4组:胰岛素样生长因子1组,血小板源性生长因子组,胰岛素样生长因子1+血小板源性生长因子组及对照组。结果与结论:胰岛素样生长因子1、血小板源性生长因子均可促进细胞增殖,促进细胞合成Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖,其中胰岛素样生长因子1促Ⅱ型胶原合成作用强于血小板源性生长因子(P<0.05),血小板源性生长因子促蛋白聚糖合成作用强于胰岛素样生长因子1(P<0.05)。胰岛素样生长因子1促进细胞合成Ⅰ型胶原,血小板源性生长因子抑制细胞合成Ⅰ型胶原。结果证实,胰岛素样生长因子1、血小板源性生长因子均可通过促进细胞增殖、促进细胞合成Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖,从而提高人退变髓核细胞的生物学活性。

关键词： 成纤维细胞   碱性成纤维细胞生长因子   诱导分化   生物学特性   体外培养  

摘要： 目的：初步探索碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)对体外培养的成人包皮成纤维细胞(fibroblast)CD表型、相关蛋白表达及体外分化的影响。\n 方法：运用酶两步消化法由成人包皮中分离成纤维细胞(fibroblast)，对照组细胞用不含bFGF培养液(含体积分数10％胎牛血清的低糖DMEM培养液、10mg/ml L-谷氨酰胺、10 mg/ml青霉素和链霉素)培养，实验组细胞用含bFGF培养液(含体积分数10％胎牛血清的低糖DMEM培养液、10mg/ml L-谷氨酰胺、10mg/ml青霉素和链霉素、5ng/ml bFGF)培养。观察两组细胞贴壁及增殖情况；分别选取两组第3代贴壁细胞进行生物学特性鉴定：应用流式细胞技术(FCM)检测两组细胞表面标志CD105、CD14、CD73、CD34、CD44、CD45及CD90的表达；免疫细胞化学法检测两组第3代贴壁细胞CK19、Oct4、Nanog及波形蛋白的表达情况；并对两组第3代贴壁细胞进行成脂、成骨及成软骨细胞多向诱导分化能力的鉴定。\n 结果：实验组和对照组的原代细胞形态无明显差别，多为纺锤形或多角形，均呈放射状集落样生长。体外培养连续多次传代后，实验组细胞形态无明显差别，以梭形为主，细胞排列规则，呈放射状集落样生长；对照组细胞形态以多角形居多，细胞皱缩、胞核大、边缘毛糙，细胞排列较杂乱。细胞生长曲线显示，两组细胞在培养1-2天生长均较缓慢，实验组细胞从第3天细胞生长增快，到第6天生长开始进入平台期；对照组细胞从第4天细胞生长增快，到第8天生长放缓开始进入平台期。流式细胞仪检测：实验组和对照组细胞均高表达CD73、CD105、CD44、CD90等间充质干细胞表面标志，不表达CD14、CD34、CD45等造血干细胞表面标志；免疫细胞化学法检测显示：两组细胞间充质细胞标志物波形蛋白的表达均为阳性，上皮细胞标志物CK19的表达均为阴性；实验组细胞对多能干细胞标志物Oct4和Nanog呈阳性表达，对照组细胞对多能干细胞标志物Oct4和Nanog呈阴性表达。多向诱导分化实验显示实验组和对照组细胞都可以向成骨细胞、软骨细胞和成脂细胞分化，均具有多向分化潜能。\n 结论：碱性成纤维细胞生长因子可以刺激成纤维细胞分裂增殖，并诱导其表达部分多能干细胞标志物。成纤维细胞体外可以诱导为成骨细胞，成软骨细胞和成脂肪细胞。碱性成纤维细胞生长因子对成纤维细胞的CD表型及体外分化无明显影响。

关键词： 细胞生物学   教学改革   设计性实验  

摘要： 在八年制细胞生物学实验课中开展设计性实验,对传统的教学模式进行改革,充分调动学生的主观能动性,培养学生自主学习和团结协作的能力,激发学生的创新和科研思维能力,得到了较好的教学质量和效果。