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关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒   肺泡巨噬细胞   生物学特性   分析  

摘要： 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强、弱毒株在PAM细胞上的增殖特性,本研究在体外分离培养了健康猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM),然后分别用高致病性PRRSV强毒HuN4株和弱毒疫苗HuN4-F112株感染PAM细胞,细胞病变观察和间接免疫荧光检测结果显示,二者在体外均可以感染PAM细胞,其中强毒HuN4株感染PAM细胞CPE较为明显。在两个毒株感染PAM细胞后12、24、36、48、60h分别收获病毒感染的细胞,利用抗PRRSV N蛋白单抗进行Western blot分析检测病毒核蛋白在不同时间表达量的变化,结果表明,强毒株在感染PAM细胞的早期,N蛋白合成表达量明显高于弱毒疫苗株,而弱毒疫苗株在感染Macr-145细胞早期,N蛋白的合成量则明显优于强毒株。比较HuN4株与HuN4-F112株在PAM细胞和Marc-145细胞的生长曲线,结果显示强、弱毒在PAM细胞和Marc-145细胞生长趋势存在明显差异,其中强毒HuN4株在PAM细胞上增殖能力明显强于弱毒株,而弱毒HuN4-F112株在Marc-145细胞上的增殖能力明显强于其在PAM细胞上的增殖能力,表明PRRSV强毒株对靶细胞PAM的感染能力较强,弱毒疫苗株对其感染能力相对较弱。本研究为深入了解PRRSV强毒株与弱毒疫苗株的致病性差异提供了理论依据。

关键词： 尼古丁   维生素C   成骨细胞   增殖   分化  

摘要： 为了探究不同浓度尼古丁对体外细胞增殖分化的影响以及维生素C对尼古丁的生物学作用的影响,该文以兔成骨细胞为实验材料,对细胞增殖和各项分化指标进行了检测。MTT结果显示:与空白对照组相比,1×10-6,1×10-5mmol/L尼古丁组有促细胞增殖的作用,但是高浓度尼古丁(1 mmol/L)组对细胞增殖有明显的抑制作用。RT-PCR检测发现:用低浓度尼古丁处理细胞,ALP、COLI和OCN的基因表达上调;相反,高浓度尼古丁下调了细胞ALP、COLI和OCN的表达。ALP染色和Von Kossa钙结节染色也显示出高浓度尼古丁对成骨细胞的毒性作用。加入维生素C后,1 mmol/L尼古丁组对成骨细胞增殖和各基因表达的影响有所改善,类似的结果也见于ALP染色和Von Kossa染色。由此证实,极低浓度尼古丁对成骨细胞确有促进增殖、增强ALP活性和上调ALP、COLI、OCN基因表达的作用;但是,高浓度尼古丁却有相反的作用,抑制成骨细胞的增殖和分化。同时,维生素C具有部分拮抗高浓度尼古丁对成骨细胞毒性作用的能力。

关键词： 肿瘤生物治疗   细胞免疫治疗   临床应用   现代分子生物学   自体   肿瘤治疗模式   分子免疫学   细胞生物学  

摘要： 肿瘤生物治疗最早在20世纪70年代提出,由Burnet教授应用卡介苗治愈某些肿瘤,开创了肿瘤生物治疗的先河,随着这些年生物治疗发展,已取得了较为良好的临床疗效,使得生物治疗成为继手术、放疗、化疗之后的第4种肿瘤治疗模式。生物治疗的主要机制是肿瘤的免疫治疗,是以现代分子生物学、细胞生物学和分子免疫学等前沿科学为基础,

关键词： 免疫疗法   肿瘤   单克隆抗体   免疫治疗   攻击   表面蛋白   细胞生物学   癌细胞  

摘要： 用单克隆抗体治疗癌症一直是肿瘤免疫学研究的热点之一。以往的抗体治疗均以癌细胞表面蛋白为靶标,因为全抗体分子太大而不能穿过细胞膜。最近新加坡科技研究局下属的分子与细胞生物学研究所(IMCB)曾琦博士及其团队的研究发现,抗体治疗不仅能以胞外癌蛋白为靶标,也能以胞内癌蛋白为靶标,进入胞内杀死癌细胞,从而抑制癌细胞的生长;这些发现对癌症的免疫治疗具有突破性的意义。现将其主要内容摘录如下,供我国学者参考。读者有意阅读原文请看:[Ferrone *** immunotherapy targets challenge dogma,Sci Transl Med,2011,3(99):99ps38]

关键词： 细胞生物   网络教学  

摘要： 细胞生物学是生命科学的四大基础学科之一，知识更新迅速。网络教学突破了传统课堂教学的局限，对构建创新型教学模式有重要意义。针对医学本科专业教学特点，总结建立医学细胞生物学网络教学平台的实践经验；并指出，互动式网络教学有利于知识层面的及时更新，有利于发挥学生的主体作用，有利于加强教师和学生之间的沟通交流。

关键词： 肝细胞核因子   分化调节   肝富集转录因子   增强子结合蛋白   细胞生物学功能   基因特异性表达   受体超家族   调控作用  

摘要： 肝脏基因表达受肝富集转录因子（LETFs）的调控,这类肝脏内优势表达的转录因子在调控肝细胞分化和维护肝细胞生物学功能发挥重要作用[1].肝细胞核因子（HNF）是LETFS的重要组成,HNF家族包括HNF1、HNF3、HNF4、HNF6、CCAAT/增强子结合蛋白（C/EBP）、D结合蛋白（DBP）,对肝脏基因特异性表达起着关键的调控作用.HNF4是一种细胞核激素受体超家族的转录因子[2],包括3个亚型：HNF4α,-4β,-4γ,其组织表达谱差异较大.HNF4α和HNF4γ具有70％同源性,DNA结合区的氨基酸序列非常类似.

关键词： 胰腺癌   淋巴转移   细胞系  

摘要： 背景与目的:胰腺癌淋巴道转移特性研究越来越受到重视,构建胰腺癌淋巴道转移动物模型能够为相关研究提供理想的实验平台。建立一种具有淋巴道高转移活性的人胰腺癌细胞系,可为深入研究胰腺癌淋巴转移的机理,预防和治疗胰腺癌淋巴转移提供合适的实验平台。方法:通过将人胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠爪垫皮下连续接种法建立淋巴道转移模型,筛选、建立高淋巴转移胰腺癌细胞系,采用流式细胞术检测细胞系中CD133的表达。结果:成功构建了裸鼠人胰腺癌细胞株BxPC-3淋巴道转移模型,获得了具有高侵袭性、高淋巴转移能力的胰腺癌BxPC-3-LN细胞系。该细胞系具有侵袭力强、转移效率高和转移集中的特点,在胰腺原位和爪垫的成瘤能力明显强于母系BxPC-3细胞,其淋巴结转移的发生率明显高于母代细胞。BxPC-3-LN细胞系CD133阳性细胞比例(3%)明显高于母代细胞(0.5%)。结论:该细胞系为胰腺癌转移机理的研究和抗肿瘤药物的筛选提供了合适的实验平台,具有非常重要的科学意义和应用前景。

关键词： 人X射线修复交叉互补组基因1   RNA干扰   人支气管上皮细胞   生物学性状  

摘要： 目的探讨RNA干扰(RNAi)技术使人X射线修复交叉互补组基因1(XRCC1)沉默后人支气管上皮细胞(HBE)的生物学性状变化。方法研究设实验组(转染重组质粒的HBE)、空载体组(转染空载体的HBE)、正常对照组(正常HBE)。XRCC1干扰后的HBE的生物学性状分析运用载体介导的RNAi技术抑制XRCC1在HBE中的表达;在光学显微镜下观察实验组和正常对照组细胞的形态学特征;对实验组、空载体组及正常对照组绘制细胞生长曲线,分析细胞倍增时间,运用流式细胞技术分析细胞周期;以汉丽埃塔(HeLa)细胞作阳性对照,采用软琼脂糖恶性程度鉴定实验分析实验组细胞的恶性程度。结果实验组细胞体积稍有增大,细胞内颗粒物明显增多;实验组、空载体组及正常对照组细胞的生长曲线均呈现相似的"S"型;实验组、空载体组及正常对照组细胞的倍增时间相近,分别为0.70、0.83、0.74 d;3组细胞的G1期、G2期和S期分布相近;实验组细胞未见在双层软琼脂糖中生长出细胞集落,而阳性对照细胞集落明显。结论 XRCC1基因缺陷对HBE生物学性状的短期影响不明显。

关键词： MAP4K4   肝癌细胞   siRNA   基因芯片  

摘要： 目的检测MAP4K4对肝癌细胞生物学活性的影响并初步探讨其作用机制。方法选取四种肝癌细胞(Hep3B,HepG2,SMMC7721,Huh-7)采用实时定量PCR和Western blot方法分别检测MAP4K4 mRNA和蛋白水平的表达。设计靶向MAP4K4的特异性siRNA核苷酸序列质粒转染组及空载体质粒转染组,用Lipofectamine 2000法分别转染到MAP4K4蛋白表达活性最强的肝癌细胞,QRT-PCR和Western blot方法检测干扰效率,并对转染后肝癌细胞进行WST-8细胞增殖实验,平板克隆形成实验,PI染色法细胞周期检测,Annexin V法细胞凋亡检测;对干扰组及对照组细胞进行基因芯片检测,以进一步探究MAP4K4基因在肝癌细胞中可能的作用机制。结果 MAP4K4在各细胞株的表达依次为:HepG2>Hep3B>Huh-7>SMMC7721;MAP4K4的干扰效率达50%以上;MAP4K4基因敲减后细胞生长减慢;平板克隆形成能力减弱;细胞周期阻滞于S、G2期;细胞凋亡明显增加;MAP4K4基因敲减后,其上游的基因:TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、MyD88、IRAK、TRAF6、TIRAP的表达明显下调,下游基因TAK1(MAP3K7)和MKK3的表达也明显下调。结论 MAP4K4基因敲减可以阻滞细胞周期的进程,抑制肝癌细胞的恶性增殖,其机制可能是通过NF-κB信号转导途径、JNK信号转导途径发挥作用。

关键词： 知识性网站   细胞生物学   课程网站   互动教学平台  

摘要： 当代生命科学知识的快速积累和更新,对高校生物学科的教学和课程网站的建设提出了更高的要求。本文基于知识性网站构建思想和高校生物学科的教学特点,设计并实现了服务于细胞生物学系列课程的教学网站,强调完善和提高教学网站中的内容管理功能和在线互动交流功能,以期为高校生物学科以及理学学科的课程网站建设提供指导和借鉴。