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关键词： 分子细胞生物学   培训班   生物化学与分子生物学   国际   暑期   生化   国家自然科学基金   国家会计学院  

摘要： 第三届“走向前沿一国际高级生化和分子细胞生物学暑期培训班（the 3rd Toward Cutting Edge：Intemational Advanced Summer School for Biochemistryand Molecular Cell Biology）”于2012年7月2-7日在上海国家会计学院举行。本期培训班的主题是：代谢与代谢相关疾病（Metabolism and Metabolic Diseases），内容涉及到肥胖、糖尿病、脂肪和脂肪因子、慢性炎症、心血管和动脉硬化等6个领域。本次活动得到了中国科学院、国家自然科学基金委、国际生物化学与分子生物学联盟（IUBMB）、欧洲生物化学与分子生物学联盟（FEBS）等组织和单位的资助。围绕这6个相关领域，分别邀请6位来自国外知名学者担任主讲人（speaker），6名来自国内知名学者担任辅讲人（tutor）（表1）。共有57名学员参加，其中8名学员来自欧洲，其余学员来自大陆和香港科研院所和高校。

关键词： c—kit   羊水   间充质干细胞   心肌   细胞分化  

摘要： 目的比较人羊水来源c-kit＋与c-kit-间充质干细胞的生物学特征及体外心肌分化能力。方法通过常规产前诊断或自愿引产，以羊膜腔穿刺术获取14份孕中期羊水（15～31周），通过流式细胞仪分选c-kit＋间充质干细胞，比较c—kit＋干细胞与c-kit-干细胞的细胞形态及生长曲线。流式细胞仪及免疫细胞化学分析对两种细胞进行表型鉴定，比较其体外向成骨、成脂及心肌样细胞诱导分化能力。RT-PCR和Westonblot检测相关基因及蛋白的表达。结果14份羊水标本中，有5份标本可以分选到c—kit＋羊水干细胞，分布在孕16-22周，分选的细胞数量占贴壁细胞的（3．30±1．24）％。羊水干细胞以成纤维状为主，可以稳定传代，体外培养可增殖到50代以上。经过c—kit分选后，细胞呈均匀一致的长纤维状，排列规律。C-kit＋及c-kit-羊水干细胞具有相似的生长曲线。两种细胞均具有间充质干细胞特征，表达间充质干细胞标记（CD29，CD44，CD73，CD90，CDl05），不表达造血细胞系标记（CD34，CD45），表达I类人类组织相容性抗原（HLA—ABC），不表达II类人类组织相容性抗原（HLA—DR）。Oct-4及SSEA-4胚胎干细胞标记在c-kit＋干细胞的表达比率明显高于***-干细胞。两种细胞在体外均可以向成脂细胞、成骨细胞分化。成脂细胞诱导后，可以看到细胞内脂滴聚集，油红0染色阳性。成骨细胞诱导后，可以看到钙盐沉积，VonKossa染色阳性。两种细胞分别与新生乳鼠心肌共培养，体外向心肌细胞诱导，c—kit＋羊水干细胞可以检测到GATA-4，α-actin，Cx43和cTnT基因及蛋白的表达。而c-kit-干细胞在诱导后只表达GATA-4的基因及蛋白。结论羊水来源c—kit＋及c—kit-干细胞均表达间充质干细胞表型特征，体外可以向成脂、成骨细胞分化。然而，c—kit＋干细胞的心肌样细胞分化能力明显强于c—kit-干细胞，可能与c—kit＋干细胞具有某些胚胎干细胞特征有关。

关键词： 细胞生物学特性   胰腺癌细胞   异常表达   miRNA   非编码RNA   多细胞生物体   肿瘤特异性   调控基因  

摘要： MicroRNAs（miRNAs）是由一类内源性的非编码RNA组成，长度大约20—24nt，来源于长的前体pri-miRNA和pre—miRNA。在多细胞生物体中，它通过不完全碱基互补配对的方式识别靶位点，转录后调控基因的表达。尽管过去的几年中通过基因芯片筛查肿瘤特异性miRNA有很大的进展，但miRNA影响肿瘤形成和发展的机制仍不清楚。本研究检测6株胰腺癌细胞miR-146b-5p的表达，观察其对胰腺癌细胞生物学特性的影响。

关键词： 纳米载体   RNA干扰   Survivin   细胞增殖   细胞凋亡   胰腺肿瘤  

摘要： 目的:利用纳米技术和基因干扰技术设计并合成携载survivin siRNA的纳米载体,探讨survivins iRNA纳米微粒对人胰腺癌细胞BXPC-3增殖和凋亡的影响。方法:体外培养人胰腺癌BXPC-3细胞,将BXPC-3细胞随机分为4组:生理盐水组、不含基因的纳米微粒组、survivin siRNA组和s urvivins iRNA纳米微粒组。RT-PCR检测survivin mRNA的表达;Wes tern blot法检测s urvivin蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;MTT法检测细胞增殖情况。结果:细胞培养72 h后,survivin siRNA纳米微粒组细胞的survivin mRNA和蛋白表达均低于其他3组(P<0.05)。survivin siRNA纳米微粒组细胞增殖明显受抑制,生长缓慢,而细胞凋亡率高于其他3组(P<0.05)。结论:survivin siRNA纳米微粒能够有效减少胰腺癌BXPC-3细胞survivin mRNA和蛋白的表达,提高肿瘤细胞的凋亡,显著抑制BX-PC-3细胞的增殖。

关键词： 细胞生物学   信号传递   离子通道   机制   transport   科学研究院   中国科学院   感觉神经元  

摘要： 来自中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所的研究人员发表了题为”Endosome—mediated retrograde axonal transport of P2X（3）receptor signals in primary sensory neurons”的文章。发现感觉神经元中P2X3受体能够逆向运输并以内吞体的形式传递信号，这提供了一种门控离子通道新的信号传递机制。相关成果公布在《细胞研究》（Cell Research）期刊上。

关键词： 骨组织工程   组织工程学   生物材料学   细胞生物学   分子生物学   新兴学科   临床医学   生物工程  

摘要： 组织工程学是八十年代末开始发展起来的一门新兴学科,它涉及到临床医学、生物材料学、细胞生物学、分子生物学和生物工程等为基础的一系列学科,其目的是生成可替代性的组织和器官,以修复受损害的组织与器官的功能。

关键词： 鸡   胚胎原始生殖细胞   体外培养   生物学特性   鉴定  

摘要： 采用酶消化法分离鸡胚原始生殖细胞(PGCs),纯化后进行体外培养,传至5～6代时,通过对阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)免疫荧光标记、碱性磷酸酶检测等方法联合鉴定其基本生物学特性,同时以RT-PCR方法检测其特异基因的表达。结果表明:体外培养的PGCs维持未分化状态,碱性磷酸酶阳性、免疫荧光检测其特异标志物SSEA-1阳性。鸡胚PGCs表达减数分裂前标志基因Dazl、Nanog和GDF3,生殖细胞分化后期基因CVH,原始生殖细胞标志基因Blimp-1以及干细胞多能性相关基因Oct-4,不表达减数分裂启动基因Stra8。提示所获得的鸡胚PGCs,其生物学特性稳定,表达相关特异基因,为鸡胚PGCs的体外培养及鉴定提供理论依据。

关键词： 周期性张应力   人牙周膜细胞   生物学活性  

摘要： 目的:探讨周期性张应力对体外培养的人牙周膜细胞生物活性的影响。方法:对体外培养的人牙周膜细胞施加不同大小的周期性牵张力(6%、12%、20%细胞表面拉伸率),24h后检测其对细胞的总蛋白合成、ALP活性、Col-Ⅰ和OCN分泌的影响。实验结果用SPSS 13.0进行统计分析。结果:较小的牵张力对人牙周膜细胞生物活性无显著影响,随力值的增大,牵张力能够呈强度依赖性抑制人牙周膜细胞的活性,减少总蛋白合成及ALP活性,抑制Col-Ⅰ及OCN的分泌。结论:周期性张应力可以抑制人牙周膜细胞的生物学活性,并呈强度依赖性。

关键词： 加拿大   蛋白   合作   英国科学家   细胞生物学   细胞内   教科书  

摘要： 以前研究证明，4个衔接蛋白参与了细胞内外以及周围信息的整合与传递。加拿大与英国科学家合作发现了第5个衔接蛋白。该发现将修改教科书并改变细胞生物学研究的面貌。

关键词： 重组人白细胞介素-21   NK-92MI细胞   干扰素-γ   NKG2D   颗粒酶   穿孔素  

摘要： 目的探讨rhIL-21对NK-92MI细胞免疫功能的影响。方法以不同浓度(25～100ng/ml)的rhIL-21培养NK-92MI细胞24～72h,观察NK-92MI细胞的增殖。以50ng/ml的rhIL-21处理NK-92MI不同时间后,FACS检测NK-92MI细胞的凋亡,NK-92MI细胞表面NKG2D受体及胞内颗粒酶-B蛋白的表达;细胞杀伤试剂盒检测NK-92MI细胞对靶细胞K-562的细胞毒效应;RT-PCR检测NK-92MI受体NKG2D,效应分子颗粒酶-B、穿孔素及细胞因子IFN-γ基因mRNA的表达;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平。结果 RhIL-21虽能抑制NK-92 MI细胞的增殖(P<0.05),但不会促进细胞的凋亡(P<0.05)。RhIL-21能促进NK-92MI细胞穿孔素、IFN-γ、颗粒酶-B、NKG2D受体基因及相应蛋白质的表达上调(P<0.05)。rhIL-21预处理组NK-92MI对K-562细胞的细胞毒效应也明显增强(P<0.05)。结论 RhIL-21能增强NK-92 MI细胞的细胞毒效应,IL-21在肿瘤的免疫治疗中有潜在临床应用价值。