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关键词： 骨髓间充质干细胞   慢病毒   细胞增殖   细胞分化  

摘要： 目的探讨慢病毒介导胶质源性神经营养因子(GDNF)对食蟹猴骨髓间充质干细胞(cMSCs)生物学特性的影响。方法无菌条件下取食蟹猴骨髓,梯度密度离心法分离培养cMSCs,以含有GDNF基因的慢病毒感染cMSCs。利用ELISA、Real-time PCR、流式细胞术(FCM)、BrdU掺入法等实验方法,观察慢病毒感染后GDNF基因的表达,以及慢病毒感染前后的cMSCs的表面抗原表达、体外增殖和分化能力。结果感染慢病毒后,体外培养的cMSCs高表达GDNF。慢病毒感染后cMSCs的细胞形态无明显改变,细胞表面标志CD34、CD90和Stro-1阳性细胞比例增高。BrdU掺入结果显示,与对照组(0.61±0.11)比较,GDNF慢病毒感染组(0.50±0.13)明显降低(P<0.05)。但GDNF慢病毒感染并没有影响cMSCs体外脂肪诱导分化能力。结论慢病毒感染影响cMSCs的表面抗原表达和体外增殖能力,但对cMSCs体外脂肪分化能力无影响。

关键词： 生物医药产业   厦门大学   细胞生物学   生物医学   博士论文   博士后   生物系  

摘要： 郑立谋博士1982年毕业于厦门大学生物系，师从我国细胞生物学的奠基人之一汪德耀教授，同年赴法国深造，1987年完成博士论文后前往世界著名的生物医学研究中心——美国纽约洛克菲勒大学进行博士后研究。

关键词： 新疆医科大学   科普活动   哈萨克族   诊断治疗   早期   肿瘤   消化   细胞生物学  

摘要： 4月18～23日，中国细胞生物学学会开展了新疆哈萨克族消化道肿瘤早期诊断治疗科普活动第二轮巡回科普活动。此次活动是继2011年9月17～21日举办“新疆哈萨克族消化道肿瘤早期诊治科普活动”第一轮巡回活动后，再次赴新疆进行科普活动。本次活动由中国细胞生物学学会与新疆医科大学主办，新疆医科大学承办。

关键词： 三阴性乳腺癌   Notch-1   核因子-KB   RNA干扰  

摘要： 目的观察Notch-1信号通路在三阴性乳腺癌（TNBC）细胞MDA—MB-231增殖中的作用，并探讨其分子机制。方法运用小干扰RNA（siRNA）转染技术，下调MDA-MB-231细胞中Notch-1mRNA表达，应用噻唑蓝（MTr）比色法检测干扰后5d的细胞增殖，并用流式细胞术检测干扰48h后细胞增殖、凋亡及细胞周期的变化。另外应用实时定量聚合酶链反应（PCR）和Westernblot法检测siRNA转染前后Notch-1、细胞周期素D1（CyclinD1）、B细胞淋巴瘤／白血病-2基因（bcl-2）、bcl-XLmRNA变化及细胞核中核因子（NF）-KB蛋白的变化。结果Notch-1siRNA可有效降低细胞中Notch-1mRNA表达；转染后细胞增殖能力明显受到抑制，第5天的抑制率达到44．7％，细胞凋亡率由3．67％增加到13．25％，细胞周期G’期由6．27％增加到14．28％。进一步研究结果显示siRNA介导的Notch-1下调，可使细胞核内NF—KB蛋白表达降低，细胞中CyclinD1、bcl-2、bcl—XLmRNA表达下调。结论Notch-1信号通路在TNBC中发挥重要作用，siRNA下调Notch-1可有效抑制MDA-MB-231细胞增殖，Notch-1是TNBC潜在的新治疗靶点。

关键词： 干细胞生物学   血液学   征文通知   博士生   北京协和医学院   论坛   博士研究生   学术交流  

摘要： 为推动我国血液学和干细胞生物学的发展，为优秀博士研究生提供一个高起点、跨领域的学术交流平台，促进优秀知识成果的展示和传播，由北京协和医学院主办，

关键词： 髓核细胞   人端粒酶逆转录酶   基因转染  

摘要： 目的观察2型重组腺相关病毒-人端粒酶逆转录酶(recombinant adeno-associated virus type-2human telomerase reverse transcriptase,rAAV2-hTERT)病毒载体转染对犬髓核细胞生物学活性的影响。方法实验组常规分离犬髓核细胞,rAAV2-hTERT病毒载体以1×105v.g/cell的复合感染转染犬髓核细胞。在转染后5、10、15、30 d及60 d分别以反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western-blot方法检测髓核细胞中hTERT mRNA及蛋白的表达;利用实时定量PCR、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法分别检测髓核细胞蛋白多糖(proteoglycan,PG)、Ⅰ型和Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,COL2)mRNA及蛋白表达量。所有检测均与2型重组腺相关病毒-增强绿色荧光蛋白(recombinant adeno-associated virus type-2 enhanced green fluorescent protein,rAAV2-EGFP)转染的髓核细胞(对照组)进行对比。结果 rAAV2可成功转染犬髓核细胞,在转染后5、10、15、30 d以及60 d,均可于基因和蛋白水平检测到hTERT基因在髓核细胞内的表达;而在所有观察时间点内,对照组未能检测到hTERT基因表达。RT-PCR显示在转染后的10～60 d,实验组PG、COL2 mRNA的表达量明显高于对照组细胞的mRNA表达,实验组与对照组在COL1 mRNA表达上无明显差别。ELISA测定蛋白多糖及COL2表达量提示:在转染后10 d,实验组髓核细胞PG、COL2的表达量显著增加;在转染后的10～60 d,实验组髓核细胞PG、COL2的表达量均明显高于对照组。结论使用rAAV2-hTERT病毒转染可成功实现体外培养条件下髓核细胞增殖能力及细胞外基质表达的上调,这将有可能为椎间盘退行性疾病的生物治疗提供更为理想的种子细胞选择。

关键词： 索拉非尼   肝肿瘤   细胞生物学  

摘要： 目的观察索拉非尼对人肝癌细胞株HepG2细胞生物学行为的影响。方法体外构建转染人肝癌HepG2,设索拉非尼干预组与非干预组,用MTT法和流式细胞术观察2组细胞生物学功能行为变化。结果干预组细胞Raf激酶的表达明显抑制,且随着用药时间不断延长(1、3、5、7d)Raf激酶的表达逐步下降。干预组细胞Raf激酶表达呈逐步下降趋势。药物干预前表达率为100%、干预后1d为78%、3d为49%、5d为38%、7d为20%逐步表达下调。与非干预组比较,干预组S期细胞明显减少(P<0.05)。结论索拉非尼对可以有效地抑制人肝癌HepG2细胞Raf激酶的表达,使S期细胞明显减少,从而抑制HepG2细胞的生长。

关键词： 转录调控   分子医学   细胞生物学   蛋白   上海交通大学   Element   科学研究院   Rich  

摘要： 来自中科院上海生命科学研究院／上海交通大学医学院健康所核酸与分子医学研究组，格鲁吉亚医学院的研究人员发表了题为”AU—Rich Element—Dependent Translation Repression Requires the Cooperation of Tristetraprolin and RCK／P54”的文章，利用多个不同的报告子系统，发现了转录调控关键蛋白：

关键词： HMBOX1   肝癌细胞系   转染   肝癌发生   基因芯片  

摘要： 目的:比较肝癌细胞系与肝细胞系中HMBOX1的表达水平,探讨其在肝癌发生、发展中的作用。方法:RT-PCR检测HMBOX1在多种肝癌细胞系和正常肝细胞系中的表达。利用分子生物学方法构建pEGFP:HMBOX1融合表达载体,采用脂质体方法转染HepG2肝癌细胞系,MTT方法及流式细胞技术评价转染后细胞增殖和细胞周期的变化。基因芯片技术分析表达载体转染HepG2后肿瘤相关信号通路的变化。结果:PCR结果显示肝癌细胞系HMBOX1 mRNA表达水平明显低于正常肝细胞系;pEGFP:HMBOX1融合表达载体转染HepG2后,细胞的增殖能力和周期未出现显著变化;基因芯片的结果提示转染表达载体的HepG2细胞,肿瘤和免疫信号通路相关基因的表达发生显著变化。结论:HMBOX1在多种肝癌细胞系表达下调,可能参与了多条与肿瘤和免疫相关信号通路的调节,为进一步阐明肝癌的发生机制提供了新的实验依据。

关键词： 氢醌   骨髓间充质干细胞   聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1   细胞凋亡   细胞增殖   大鼠  

摘要： 目的:探讨低剂量氢醌(HQ)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学性状及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)基因表达的影响,阐明低剂量HQ对骨髓的毒效应。方法:磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol·L-1HQ染毒大鼠BMSCs为处理组。应用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活力和细胞增殖能力,通过磷脂结合蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞凋亡,用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PARP-1基因表达的改变。结果:与PBS对照组比较,各剂量组细胞增殖能力明显提高(P<0.05);染毒48 h后,5.0和10.0μmol·L-1HQ组细胞的凋亡率均明显降低(P<0.05);染毒48 h后,2.5、5.0和10.0μmol·L-1HQ组细胞PARP-1表达量分别为对照组0.92、0.56(P<0.05)和0.45倍(P<0.05)。结论:低剂量HQ能抑制大鼠BMSCs凋亡和PARP-1基因表达,促进细胞增殖。