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关键词： 颊脂垫   脂肪干细胞   细胞增殖   细胞培养   成骨   干细胞  

摘要： 背景:在人脂肪干细胞的研究中,针对其内脏脂肪与皮下脂肪生物学特性的比较较多,对人颊脂垫部位脂肪干细胞的研究较少。目的:提取人颊脂垫脂肪干细胞进行体外增殖及成骨诱导培养,观察其细胞生物学特性,并与皮下脂肪来源脂肪干细胞进行对比。方法:分别提取面部轮廓整形手术获取的人颊脂垫与皮下吸脂术获取的皮下脂肪中的脂肪干细胞,进行体外传代培养与成骨诱导,对二者细胞浓度、增殖活性、成骨能力等指标进行对比观察。结果与结论:人颊脂垫为特化脂肪组织,血管成分明显多于皮下脂肪。颊脂垫提取脂肪干细胞浓度显著高于吸脂术来源者;CCK-8实验生长曲线显示颊脂垫来源脂肪干细胞增殖活性亦高于吸脂术来源脂肪干细胞(P<0.05);经成骨培养后第3,7,14天碱性磷酸酶染色,颊脂垫来源脂肪干细胞成骨活性优于吸脂来源脂肪干细胞(P<0.05)。表明颊脂垫作为特化的深部脂肪组织,其包含的脂肪干细胞生物学特性明显优于吸脂来源者,且由于其解剖毗邻关系,是口腔颌面部骨组织工程理想的种子细胞库。

ISBN: (纸本)9787509156742

关键词： 树突状细胞   SOCS1   RNA干扰  

摘要： 目的采用RNA干扰技术抑制脐血树突状细胞(DC)SOCS1基因表达,并检测其对树突状细胞生物学活性的影响,为树突状细胞的临床应用奠定基础。方法针对SOCS1基因,采用化学合成法合成SOCS1siRNA,并转染脐血DC。RT-PCR和Western blot检测转染前后DC的SOCS1基因表达;流式细胞术检测细胞表面CD80、CD86及HLA-DR分子表达情况;ELISA法检测细胞培养上清中IL-12水平。结果与对照组相比,siRNA组SOCS1蛋白质表达水平降低,差异有统计学意义;DC表面CD80、CD86及HLA-DR分子表达上调,DC培养上清中IL-12的浓度显著提高。结论 RNA干扰技术能显著下调脐血树突状细胞SOCS1的表达,为以DC SOCS1为靶向的抗肿瘤治疗提供了新思路和新手段。

关键词： NPRL2   SGC7901   转染   增殖   侵袭  

摘要： 目的:探讨pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体对SGC-7901胃癌细胞体外增殖﹑细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法:构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定。脂质体介导转染入SGC-7901胃癌细胞,应用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot法检测NPRL2的基因及蛋白水平情况,CCK8法检测细胞增殖的变化,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化,Transwell实验检测NPRL2对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:成功构建了pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体。重组质粒转染SGC-7901细胞后,通过荧光显微镜观察到绿色荧光的表达,RT-PCR和Westernblot法检测到NPRL2 mRNA及蛋白的表达,CCK8法检测发现NPRL2能够明显抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05),细胞周期分析显示NPRL2使细胞停在G0～G1期(P<0.05),细胞凋亡结果显示NPRL2能抑制细胞凋亡(P<0.05),Transwell侵袭和迁移实验显示NPRL2使细胞侵袭迁移能力均降低(P<0.05)。结论:NPRL2可抑制肿瘤细胞的增殖、周期、侵袭及迁移,并促进凋亡。

关键词： 肿瘤免疫抑制   科学家   上海生命科学研究院   中国科学院   细胞生物学   生物化学   分子机制   转录因子  

摘要： 近日，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所刘小龙研究组在最新的研究中，揭示了转录因子AP—1在肿瘤免疫抑制中的作用及分子机制。相关研究成果日前在线发表于国际学术期刊美国《国家科学院院刊》。

关键词： 间充质干细胞   分化   细胞表面标志   Ad-GFP   细胞转染   人淋巴细胞分离液(Ficoll)  

摘要： 目的建立人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分离、培养以及鉴定的方法,同时应用腺病毒介导的绿色荧光蛋白(Ad-GFP)检测细胞转染的效率。方法应用人淋巴细胞分离液(Ficoll)对hMSCs进行分离,经贴壁纯化后用MTT法检测增殖能力;并对其成骨、成脂、成平滑肌诱导分别进行碱性磷酸酶(ALP)、油红O染色及α-SMA免疫细胞化学检测;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞表面标志的表达。用Ad-GFP转染,并应用荧光显微镜与FCM检测转染效率。结果 hMSCs镜下为成纤维样形态,约在第4天进入对数增长期;分化诱导后ALP染色、Von kossa银染、油红O染色以及α-SMA均为阳性;FCM检测CD14、CD31、CD45表达阴性,CD44、CD73、CD106及PDGFRβ表达阳性;当感染复数MOI=200,细胞培养48h时感染效率较高,FCM检测显示为99.81%。结论经过对增殖、分化能力以及表面标志的分析,证明用Ficoll可以分离得到较纯的hMSCs,Ad-GFP可以很好地感染细胞,为组织工程种子细胞的体内示踪提供了途径。

关键词： 表面改性   生物技术   智能   物理化学性质   细胞生物学   生物物理   生物材料   材料科学  

摘要： 细胞生物学、生物物理、化学及材料科学的最新进展使得开发新一代的智能生物材料成为可能。本书向读者提供了表面改性及其应用的一个全面的综述，内容包括物理化学性质、特性鉴定方法、

关键词： 树突状细胞   小鼠甲胎蛋白   4-1BB配体   生物学特性  

摘要： 目的观察感染小鼠甲胎蛋白（mAFP）和4-1BB配体（m4—1BBL）融合基因对小鼠树突状细胞（DC）生物学特性的影响。方法构建含mAFP和m4—1BBL的融合基因腺病毒Ad-mAFP-内部核糖体起始位点（IRES）-m4-1BBL，感染H22肝癌细胞，Westernblot法检测mAFP和4—1BBL蛋白的表达；诱导培养DC，并将其分为实验组、载体对照组和阴性对照组，以上各组感染后观察DC形态学变化；流式细胞仪检测各组细胞表型；混合淋巴细胞反应（MLR）检测各组DC的刺激活性以及对T细胞分泌干扰素（IFN）-1的影响。结果成功构建融合基因重组腺病毒Ad—mAFP-IRES-m4-1BBL并表达于H22细胞；体外诱导培养获得典型的DC；流式细胞仪检测各组DC感染后的细胞表型，实验组DC细胞CD80[（60．7±8．7）％]、CD86[（67．0±4．6）％]表达率显著增高于其余两组（P〈0．05），刺激T细胞增殖能力（0．66±0．05）亦显著增强（P〈0．05），刺激T细胞分泌IFN-γ[（1280．7±68．2）ng／L]水平更高（P〈0．05）。结论成功构建含mAFP及4．1BBL融合基因腺病毒疫苗，其感染DC后刺激T细胞增殖和分泌IFN-γ的能力增强。

关键词： 肝前体细胞   细胞分化   标志物   肝细胞癌   信号通路  

摘要： 肝前体细胞(HPCs)是肝脏内具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的成体干细胞,不仅与肝脏再生修复密切相关,也与原发性肝癌发生、发展密切相关。本文简要总结了近几年有关肝前体细胞的生物学特性、来源、定位以及多种信号调控通路在其增殖、分化及形成肿瘤中的作用等研究进展。