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关键词： 图书   现代生物学   流式细胞术   细胞生物学   发育生物学   分子生物学   基础研究   临床诊断  

摘要： 流式细胞术是现代生物学和医学的常用技术，一经发明就被逐渐应用到细胞生物学、免疫学、发育生物学、生理学、植物学、分子生物学等基础研究，医学的临床诊断和治疗，以及农林畜牧养殖、药品检验、食品检验、环境检测等领域。

关键词： 人胚胎干细胞   视黄酸   拟胚体   胚胎发育  

摘要： 目的 研究视黄酸对人胚胎干细胞（ESCs）的增殖、干性及其向拟胚体分化的能力的影响,探索应用人ESC为模型研究先天发育畸形机制的可行性.方法 用real-time PCR、MTS细胞增殖分析和免疫荧光染色,鉴定视黄酸处理前、后H9 ESC增殖和干性的变化;用real-time PCR比较H9 ESC向拟胚体分化后,视黄酸处理对三胚层标志基因及成骨和成脂相关基因表达的影响.结果 随着视黄酸处理时间和浓度的增加,H9 ESC的增殖速度在指数生长早期显著上调,干性标志基因OCT4,Nanog和Sox2及Oct4翻译调控因子Lin28的mRNA表达水平显著下降,且Oct4蛋白表达水平也明显降低.视黄酸处理后拟胚体出现空泡结构,外胚层标志基因NeuroD1、Noggin,中胚层标志基因Brachyury、Twist和内胚层标志基因AFP,GATA-4的表达显著上调（P＜0.05）,并以AFP的变化最为显著（P＜0.01）.此外,成脂相关基因C/EB Pα表达水平也显著提高,但成骨相关基因OPN的表达水平在视黄酸处理5d后显著下调（P＜0.05）.结论 高浓度的视黄酸可诱导H9 ESC丧失干性,并使其向拟胚体方向发生过度分化,同时破坏早期拟胚体形成过程中成骨成脂分化的平衡,这可能与其诱发先天性颅面发育畸形相关.

关键词： 非接触式共培养   同源间充质干细胞   退变髓核细胞   比较研究  

摘要： 目的:比较非接触式共培养条件下两种同源间充质干细胞对退变髓核细胞生物学功能的影响。方法:取同一腰椎间盘突出症患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)、脂肪间充质干细胞(ADSCs)和退变髓核细胞(NPCs),两种间充质干细胞分别与髓核细胞在Tanswell 6孔板中进行非接触式共培养,与ADSCs共培养的NPCs为A组,与BMSCs共培养的NPCs为B组,以单独培养的NPCs为对照组。共培养7d后,提取3组髓核细胞总RNA,进行反转录后,利用Real-Time PCR检测其Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因的相对表达量。结果:非接触式共培养7d后,Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因相对表达量对照组分别是1.03±0.28、1.21±0.40和0.94±0.34,A组分别是3.49±0.55、3.88±2.11和2.41±0.91,B组分别是7.60±1.89、6.26±2.96和4.55±1.88。与对照组相比,A、B组髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因相对表达显著增加(P<0.05);A、B两组间相比也有显著性差异(P<0.05)。结论:非接触式共培养条件下骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞对退变髓核细胞均有一定的激活效应;骨髓间充质干细胞对退变髓核细胞的激活效应更强,可能更加适合于椎间盘退行性疾病的生物学治疗。

关键词： 细胞生物学   生命活动   教学技巧  

摘要： 细胞生物学课程中“生命活动”相关章节是重要内容,通过多媒体手段来动态演示、幽默比方讲课、联系生活和临床知识增添趣味性、增加师生互动等教学技巧可以提高教学效果.

关键词： 结直肠肿瘤   Tiam1   HT29  

摘要： 目的:应用已构建稳定过表达T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T lymphoma invasion and metastasis,Tiam1)的人结直肠癌细胞株,探讨Tiam1对人结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:考马斯亮蓝染色以及扫描电镜观察Tiam1基因转染前后细胞形态学改变;细胞周期、MTT法、平板克隆形成实验、Transwell小室检测细胞体外增殖、迁移及侵袭能力;裸鼠皮下成瘤实验检测细胞体内增殖能力。结果:相对于HT29/mock细胞,HT29/Tiam1细胞多呈梭形,伪足增多、纤长;HT29/Tiam1细胞处于S期的细胞比例更高(t=19.546,P=0.000),细胞增殖能力增强(F=177.125,P=0.000),克隆形成率增高(t=3.222,P=0.032),HT29/Tiam1细胞穿过微孔膜(t=4.832,P=0.001)和Matrigel(t=3.779,P=0.005)的细胞数均增加,差异具有显著性;HT29/Tiam1和HT29/mock两组细胞的裸鼠体内生长差异从第15天开始出现,到第30天时,HT29/Tiam1细胞组的肿瘤体积是HT29/mock细胞组的2.3倍,差异具有统计学意义(F=53.040,P=0.002)。结论:Tiam1稳定过表达能够促进结直肠癌细胞的增殖、运动及侵袭能力,提示Tiam1在结直肠癌的发生、发展中发挥着重要作用,有望为结直肠癌的临床治疗提供新的靶点。

关键词： 细胞生物学实验课   教学改革  

摘要： 本文结合细胞生物学实验课在教学中存在的问题,从授课时间、教学方式和考核评价制度等方面对细胞生物学实验课教学改革进行了探讨,旨在提高教学水平,增强学生的实践操作能力。

关键词： 脐带间充质干细胞   成骨   免疫学  

摘要： 目的:体外分离、纯化及培养人脐带间充质干细胞(WJ～MSCs),观察其生物学特性并研究其定向分化成成骨细胞的能力。方法:将剔除动静脉的新鲜人脐带组织切成小段,剥离血管后酶解,释放细胞贴壁生长,倒置显微镜观察细胞形态,绘制第3代生长曲线;流式细胞仪测定细胞表面标记(CD105、CD73、CD90、CD34、CD45、CD14和HLA～DR);化学染色检测其体外诱导成骨分化的能力。结果:原代人脐带间充质干细胞呈现典型的成纤维样形态;流式细胞仪检测培养细胞间充质干细胞的表面标志CD105、CD73和CD90阳性表达,但不表达造血细胞的表面标志CD34、CD45、CD14及HLA-DR阴性表达,HLA-ABC低表达。体外诱导实验证实,该细胞具有成骨分化能力。结论:WJ-MSCs体外诱导成骨能力确切,具有类似骨髓间充质干细胞的特异性表面标记,且具有同种异体移植的低免疫原性。

关键词： 乳腺癌   癌间质成纤维细胞   基质细胞衍生因子-1  

摘要： 目的:通过乳腺癌间质成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)与乳腺癌细胞系MDAMB-231共培养的体外细胞实验及裸鼠接种的在体动物实验,观察CAFs对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移活性的影响,并探讨其作用机制。方法:体外实验:分离培养浸润性导管癌组织中CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),然后分别与乳腺癌细胞MDA-MB-231体外共培养,采用MTT法、流式细胞仪、Matrigel人工模拟基底膜法分别检测乳腺癌细胞的增殖、凋亡、细胞黏附和侵袭能力。动物在体实验:选择乳腺癌细胞系MDA-MB-231、CAFs和NFs,结合生理盐水(NS)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其配体拮抗剂AMD3100,组成不同的组别并接种于裸鼠(共6组)。观察肿瘤的大小,有无淋巴结、肺、肝脏转移。留取血标本及肿瘤组织行SDF-1表达水平的检测。结果:MDA-MB-231与CAFs和NFs共培养后乳腺癌细胞的增殖活性显著增强,其中CAFs的作用较NFs更强(P=0.011);CAFs组的黏附能力(34.70±4.84个/视野)明显强于NFs组(20.16±3.09个/视野),P=0.000;而CAFs组的侵袭性(89.0±4.62个/视野)也明显强于NFs组(81.6±6.08个/视野,P=0.045)。CAFs组中的MDA-MB-231的早期凋亡率(2.9±2.4)较NFs组(5.0±4.2)明显降低(P=0.026);MDA231+CAFs+NS组的种植肿瘤平均体积最大(9.092±2.662cm3,P=0.000);此外,该组共有4只(66.6%),MDA231+NS组有2只(33.3%)存在腋窝淋巴结转移,未见肝肺转移灶。在MDA231+CAFs+NS组中,血标本SDF-1值(75.25±16.23pg/ml)、肿瘤组织标本中SDF-1mRNA值(11.686±8.926)、组织中SDF-1蛋白表达水平(1.006±0.327)均为最高,与其他各组相比均有统计学差异(P=0.000)。结论:CAFs可影响乳腺癌肿瘤细胞的生物学特性,具有促进肿瘤细胞增殖,增强其黏附、侵袭及转移能力。其机制可能是通过乳腺癌间质成纤维细胞分泌SDF-1与其特定的受体CXCR4结合这一信号通路来实现的。

关键词： 细胞生物学   高等学校   教学参考资料  

ISBN: (纸本)9787564329662

摘要： 本书共十七章，每章均由以下五部分组成:考点综述本书依据相关高等院校和科研所的细胞生物学教学大纲及细胞生物学研究生入学考试大纲，参考其细胞生物学期末考试与研究生入学考试试题，分析并总结相应章节在考试中所占比例以及常考体型，引导广大学子正确把握学习重点。名师精讲结合蓝本教材的内容和相关考试的侧重点，对相应章节的重要内容及相互联系进行梳理与总结，并标明了重难点，帮助学生更有效地掌握教材内容。名词术语依据本科教学与相关考试侧重点筛选出各章节重点名词，并进行解释，且每个名词均附有对应英文名称，满足学生备考的需要。考研精粹从知名院校和科研院所的本科、研究生入学考试试题中精选了一些具有一定代表性的试题进行详解，按照填空题、选择题、判断题、简答题、问答题、实验题的顺序排列，便于学生适应不同考题类型。课后习题详解对第4版的《细胞生物学》教材中的习题进行了详细解答，学生通过习题解答，可以加强对新版教材内容的理解。附录为了检测学生对知识掌握的程度，特挑选出10套名校2010-2013年考研真题，并附有详细解答，供学生们作最后冲刺练习或模拟考试之用。

关键词： VSELs   Igf2-H19   Oct-4   Sall-4   primordial germ cells   epiblast stem cells  

摘要： The concept that adult tissue, including bone marrow (BM), contains early-development cells with broader differentiation potential has again been recently challenged. In response, we would like to review the accumulated evidence from several independent laboratories that adult tissues, including BM, harbor a population of very rare stem cells that may cross germ layers in their differentiation potential. Thus, the BM stem cell compartment hierarchy needs to be revisited. These dormant, early-development cells that our group described as very small embryonic-like stem cells (VSELs) most likely overlap with similar populations of stem cells that have been identified in adult tissues by other investigators as the result of various experimental strategies and have been given various names. As reported, murine VSELs have some pluripotent stem cell characteristics. Moreover, they display several epiblast/germline markers that suggest their embryonic origin and developmental deposition in adult BM. Moreover, at the molecular level, changes in expression of parentally imprinted genes (for example, Igf2-H19) and resistance to insulin/insulin-like growth factor signaling (IIS) regulates their quiescent state in adult tissues. In several emergency situations related to organ damage, VSELs can be activated and mobilized into peripheral blood, and in appropriate animal models they contribute to tissue organ/regeneration. Interestingly, their number correlates with lifespan in mice, and they may also be involved in some malignancies. VSELs have been successfully isolated in several laboratories;however, some investigators experience problems with their isolation.