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关键词： 甲状腺乳头状癌细胞   基因转染   生物学性状   慢病毒介导   音猬因子   淋巴结转移   启动信号   慢病毒载体  

摘要： 音猬信号（Shh）通路涉及到肿瘤细胞的生长、转移等方面^[1]。启动信号Shh在人甲状腺乳头状癌（PTC）组织中表达增高，并与分期及淋巴结转移有关。我们用已构建的慢病毒载体pGC-FU-Shh-GFP转染PTC原代细胞，稳定过表达Shh^[2]，观察PTC细胞的增殖、侵袭及迁移能力的变化，探讨Shh通路在PTC的发生、发展中的作用。

关键词： 椎间盘退变   髓核间充质干细胞   营养   增殖   凋亡  

摘要： 目的研究大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)体外培养的最佳血清体积浓度并探讨椎间盘退变的机制。方法用胶原酶、胰酶序贯消化法从SD大鼠腰部和尾部的椎间盘组织中提取NPMSCs,并进行体外培养,将其传代。①利用流式细胞仪对第3代传代NPMSCs细胞表型CD29、CD34、CD24、CD90、CD105进行鉴定;②利用普通PCR鉴定体外培养的NPMSCs细胞基因Sox2、Nanog的表达;③在37℃、21%O2、5%CO2的细胞培养箱中用成骨、成软骨、成脂培养液诱导培养第3代传代NPMSCs,2周以后,用染色剂对其染色,观察其成脂、成骨、成软骨能力。④在37℃、21%O2、5%CO2的细胞培养箱中用不同血清体积浓度(0%、5%、10%、20%、30%)的DMEM-F12血清培养液培养第3代传代NPMSCs,72h后利用CCK-8法检测细胞的增殖,并采用RT-PCR检测细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9的mRNA表达,借助流式细胞仪对细胞进行细胞凋亡的检测。结果①大鼠NPMSCs的成骨、成软骨能力强,成脂能力较差,且其细胞表面高度表达CD29、CD90、CD105,低度表达CD24、CD34,细胞基因Sox2、Nanog高度表达。②随着培养液血清体积浓度增加,OD值增大,NPMSCs的凋亡率降低,细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9基因的mRNA表达增加。结论①大鼠NPMSCs具有间充质干细胞特性;②细胞外营养影响大鼠NPMSCs的增殖、分泌、凋亡。

关键词： 组织构建   成纤维细胞   小鼠胚胎   C57BL   6小鼠   细胞增殖   细胞活力   饲养层  

摘要： 背景:昆明小鼠胚胎成纤维细胞是目前最常用的饲养层细胞,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层的研究鲜有报道。目的:体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,制备饲养层,力求扩大小鼠胚胎成纤维细胞的来源。方法:用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性,研究其生长规律,并制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,检测干细胞在所制备饲养层上的生长状态。结果与结论:不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生长状态好,获得的成纤维细胞数量多,增殖活跃。在细胞冻存后1,2周、1,3,6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞在第2-5代增殖旺盛,第6代以后细胞增殖出现明显下降。种植到培养皿上的C57BL/6小鼠饲养层细胞在种植后3 d内活力高,种植4 d以后细胞活力急剧下降。所以C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞来源的饲养层的最佳使用时间为灭活后3 d内,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞饲养层和昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层一样,能很好地支持胚胎干细胞及诱导多能干细胞生长。

关键词： Cell   分子机制   节细胞   泛素化   自噬   信号   泛素连接酶   细胞生物学  

摘要： 2014年7月15日，Cancer Cell在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所胡荣贵研究组与多家单位合作的研究新成果：具有肿瘤抑制活性的泛素连接酶HACE1，

关键词： 细胞生物学   靶标   治疗   肥胖   自然   棕色脂肪   上海交大   能量消耗  

摘要： 记者从上海交大医学院附属瑞金医院获悉，该院内分泌科宁光研究团队日前发现了一个肥胖发生与治疗的新靶标--LGR4基因。研究显示。上述基因的缺失可促进白色脂肪转化为棕色脂肪，增加机体能量消耗，减轻体重。相关研究成果发表于《自然-细胞生物学》。

关键词： 蛋白运输   贮藏蛋白   水稻   科学家   科研团队   中国农科院   分子遗传学   细胞生物学  

摘要： 最近，中国农科院作物所研究员万建民率领的科研团队研究发现：一种植物特有的GPA3蛋白作为调控水稻贮藏蛋白运输的关键因子，参与稻米的蛋白品质形成。科研人员还从细胞生物学和分子遗传学的角度阐明了GPA3在水稻贮藏蛋白定向分选过程中的关键作用，为未来育种中改良稻米蛋白品质提供了重要的理论基础，彰显了科研团队在水稻贮藏研究领域的国际领先地位。

关键词： 2D-PAGE   Limbal stem cells   Stem cell markers  

摘要： The cornea consists of three main layers: an outer surface epithelium, the stroma, and the endothelium. A clear cornea is necessary for optimal vision and is maintained and repaired from limbal epithelial stem cells located in the limbus between the cornea and the sclera. Diseases and injury may result in deficiency of the stem cells impairing their ability to renew the corneal epithelium. Patients with limbal stem cell deficiency experience chronic pain and ultimately blindness. Attempts to treat the disease are based on replacement of the stem cells by transplantation or by culturing the stem cells. We here review the proteomic techniques that so far have been used to approach characterization of limbal stem cells and markers to identify them. It is apparent that the field is in a rather inchoate state due to the scarcity and relative inaccessibility of the stem cells. However, the importance of revealing limbal stem cell biology and identifying stem cell biomarkers calls for greater use of emerging methodology. Strategies for future studies are discussed.

关键词： 细胞生物学   学术研讨会   海峡两岸   台湾地区   澎湖   中国科学院   学术会议   研究成果  

摘要： “海峡两岸细胞生物学学术研讨会”是由中国科学院已故姚鑫院士与台湾“中研院”吴成文院长于1996年组织发起的学术会议，旨在交流两岸细胞生物学最新研究成果，推进两岸生物学科技与教育的合作与发展。会议由台湾和大陆轮流举办，

关键词： 胎盘组织匀浆上清(PTHS)   树突状细胞   妊娠耐受  

摘要： 目的探讨胎盘组织匀浆上清对小鼠骨髓树突状细胞生物学特征的影响。方法分离BALB/c小鼠骨髓单个核细胞,诱导分化为树突状细胞,经胎盘组织匀浆上清作用后,流式细胞仪检测树突状细胞的表型和抗原摄取能力,MTT法检测树突状细胞刺激同种异基因淋巴细胞反应的能力,ELISA法检测其分泌的细胞因子水平。结果正常对照小鼠和妊娠小鼠的骨髓树突状细胞的生物学特征没有明显差异(P≥0.05),而经胎盘组织匀浆上清作用后的正常小鼠及妊娠小鼠的CD11b+树突状细胞(MDC)明显降低,CD8α+树突状细胞(LDC)明显增高(P≤0.01),胎盘组织匀浆上清作用后的树突状细胞的抗原摄取能力及其刺激同种异基因淋巴细胞反应的能力明显低于对照(P≤0.01),可以分泌较高水平的IL-10和较低水平的IL-12,与对照相比较,P≤0.01。结论胎盘组织匀浆上清作用后的骨髓树突状细胞的生物学特征的改变可能与妊娠免疫耐受有关。

关键词： 肉芽组织   成纤维细胞   间质干细胞  

摘要： 目的 探讨人创面肉芽组织成纤维细胞增殖活力、CD分子表型、部分因子及相关蛋白表达和体外诱导分化能力等生物学特性,为进一步研究成纤维细胞在创面愈合早期的作用奠定基础.方法 采用机械法和酶消化法相结合分离培养创面肉芽组织成纤维细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态及增殖情况;绘制原代及第3代细胞生长曲线.流式细胞仪检测原代及第3代细胞表面CD分子的表达.免疫细胞化学检测波形蛋白、角蛋白19、CD31和第Ⅷ因子相关抗原的表达.进行成脂、成骨及成软骨细胞诱导分化能力的鉴定.结果 原代细胞呈短梭形、多角形或不规则形;传代后细胞主要以长梭形为主,排列规则,呈平行状、放射状、漩涡状生长;细胞增殖能力良好,有明显的对数生长期.在体外培养第1～4天,原代及第3代细胞增殖能力差异无统计学意义（P＞0.05）,从第5天开始第3代比原代细胞增殖能力强（P＜0.01）.细胞高表达CD105、CD73、CD90及C D44间充质干细胞阳性表面标志,不表达CD34、CD45、CD19、CD11b及HLA-DR间充质干细胞阴性细胞表面标志.原代细胞表达间充质干细胞阳性表面标志物比例分别为：CD105 55.22％、CD7399.03％、CD90 54.75％、CD44 98.62％,表达间充质干细胞阴性表面标志物CD34、CD45、CD19、CD11b及HLA-DR为0.65％.第3代细胞分别是CD105 98.28％、CD73 99.83％、CD90 99.52％、CD44 99.56％,CD34、CD45、CD19、CD11b及HLA-DR为0.61％.第3代表达间究质干细胞阳性表面标志的细胞比例呈现增高趋势.波形蛋白、CD31阳性表达;不表达角蛋白19和第Ⅷ因子相关抗原.成脂、成骨及成软骨细胞诱导分化阳性.结论 体外培养的人创面肉芽组织成纤维细胞表现出间充质干细胞样细胞生物学特性;且表达内皮细胞部分生物学标志物,创面血管内皮细胞通过内皮向间质转化（EndMT）可能是人创面愈合早期肉芽组织成纤维细胞的来源之一.