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关键词： NPM3   肺腺癌   上皮间质转化   细胞增殖   细胞迁移  

摘要： 目的探究Nucleophosmin3(NPM3)在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌细胞系H292生物学功能的影响,为肺腺癌的诊疗提供新的思路。方法首先利用生物信息学数据库TCGA分析NPM3基因在肺腺癌和正常组织中的表达差异及其与肺腺癌患者临床病理特征和预后的相关性;通过基因干扰技术构建敲低NPM3的细胞模型(si-NPM3-H292),运用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Westernblot)检测干扰效率;通过CCK-8及平板克隆实验检测敲低NPM3对肺腺癌细胞增殖能力的改变;运用划痕实验和Transwell实验检测敲低NPM3对H292细胞迁移能力的影响;运用qRT-PCR法和Westernblot检测与上皮间质转化(EMT)相关指标的mRNA及蛋白表达情况;通过Westernblot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达水平。结果TCGA数据库分析结果显示,NPM3在肺腺癌中高表达且与肺腺癌患者临床病理分型密切相关,高表达NPM3的肺腺癌患者的生存预后显著差于低表达NPM3的患者(P<0.05)。成功构建敲低NPM3的细胞模型;敲低NPM3的表达降低了H292细胞的增殖和迁移能力(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平均上调,N-cadherin的mRNA及蛋白表达水平均下调(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中Akt及PI3K的蛋白表达水平无明显变化,但其磷酸化水平降低,而PTEN的蛋白表达水平有所上升(均P<0.05)。结论NPM3在肺腺癌中高表达且与患者不良预后相关,NPM3可能通过调控PI3K/Akt信号通路发挥对肺腺癌细胞增殖与迁移的促进作用。

关键词： 医学细胞生物学   课程思政   教学实践  

摘要： 医学细胞生物学是医学类专业重要的基础课程,知识点繁多、思政元素丰富,是课程思政融入的良好载体。文章从开展医学细胞生物学课程思政的必要性出发,阐述了其课程思政教学模式的优化实践,即在教学目标设计中凸显思政导向、在教学内容中深入挖掘思政元素、灵活运用教学方法有效融入思政元素并在课程考核中融入思政评价点。最后对该课程思政的实施效果进行总结和反思,以期实现价值引导与知识传授相统一的人才培养目标。

关键词： 生成式AI   医学细胞生物学   教学应用  

摘要： 随着人工智能技术的快速发展,生成式人工智能(Artificial Intelligence,AI)工具在教育领域的应用日益广泛。文章探讨了其在医学细胞生物学课程教学中的应用,分析了其潜力与挑战,并提出了有效介入方式及应对策略,旨在提高教学质量,促进学生学习。

关键词： 前列腺癌   SPOCK1   增殖   迁移   NF-κB信号通路  

摘要： 目的探讨沉默SPOCK1表达对前列腺癌(PCa)细胞增殖、迁移、侵袭和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法采用人PCa细胞DU145细胞系及人前列腺增生细胞BPH-1细胞系,通过RT-qPCR和Western Blot分别检测两种细胞中SPOCK1的mRNA和蛋白表达水平。DU145细胞分为Control组、si-NC组、si-SPOCK1组、si-SPOCK1+佛波酯(PMA)组。采用CCK-8法和克隆形成检测细胞增殖活力;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western Blot检测细胞中Ki67、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)/NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、p-IκBα、NF-кB p65和p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果两种细胞SPOCK1的mRNA和蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。si-NC组和siSPOCK1组DU145细胞增殖活力、克隆形成率、迁移率和侵袭数目、E-cadherin、Ki67、PCNA及N-cadherin蛋白表达水平、IκBα和NF-кB p65磷酸化水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。si-SPOCK1组和si-SPOCK1+PMA组DU145细胞增殖活力、克隆形成率、迁移率和侵袭数目、E-cadherin、Ki67、PCNA及N-cadherin蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默SPOCK1表达通过抑制NF-κB信号通路激活抑制PCa细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词： 赖氨酸残基   蛋白质翻译后修饰   细胞生物学   泛素连接酶   泛素化   靶蛋白   酶促反应   蛋白质调控  

摘要： 蛋白质的泛素化和去泛素化修饰构成了细胞生物学中的动态平衡,也是细胞内重要的蛋白质调控机制,对蛋白质的稳定性、活性、定位和功能起着至关重要的作用^([1])。泛素由76个氨基酸组成,具有高度的保守性,几乎存在于真核生物的所有组织中。泛素化是一种蛋白质翻译后修饰过程,是通过由泛素激活酶(ubiquitin-activating enzyme,E1)、泛素结合酶(ubiquitin conjugating enzyme,E2s)和泛素连接酶(E3s)催化的一系列酶促反应,将泛素分子与靶蛋白上的赖氨酸残基连接。

关键词： 细胞生物学   产出导向   课程思政   生物科学  

摘要： 细胞生物学作为揭示生命奥秘的关键学科,是生命科学领域的一门专业核心课程。该文以陇东学院生物科学专业(师范类)的细胞生物学为例,针对该课程教学模式传统、课程思政缺乏、产出效率低等问题,进行了基于OBE(outcome-based education)教学理念的教学创新与实践,具体措施包括实施线上线下混合式教学、深度融合课程思政、科研反哺教学、特色作业设计、过程性考核以及多元化评价方法等。这些创新和实践有效地提升了课程目标的达成度,进而提高了课程产出和教育质量。

关键词： 肝细胞癌   射频消融   MAPK信号通路   U0126  

摘要： 目的探讨阻断MAPK信号通路对肝细胞癌(HCC)射频消融术后残留癌细胞生物学特性的影响。方法选择HepG2细胞株并体外模拟射频消融制备射频消融术后残留肝癌细胞(HepG2-H细胞),观察两种细胞培养48 h后的细胞形态。采用RNA测序检测HepG2和HepG2-H细胞基因表达的差异,并对差异基因进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用不同浓度(10、20、30μmol/L)MAPK信号通路特异性阻滞剂U0126作用于HepG2-H细胞,以不加入U0126的细胞为对照组;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞的增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果HepG2-H细胞与HepG2细胞培养48 h后,可见在培养皿底部呈上皮样生长的贴壁细胞紧密排列;HepG2-H细胞汇合度约80%,HepG2细胞汇合度约70%。RNA测序共测定16255个基因,与HepG2细胞相比,HepG2-H细胞中上调基因85个,下调基因312个;KEGG通路富集分析结果显示MAPK信号通路受差异基因影响最显著。对照组及10、20、30μmol/L U0126作用72 h的HepG2-H细胞的吸光度值分别为1.12±0.08、0.69±0.08、0.51±0.06、0.45±0.08,差异有统计学意义(F=5.12,P=0.013);作用24 h的HepG2-H细胞迁移面积分别为(6054±269)μm2、(5640±285)μm2、(5082±238)μm2、(4822±246)μm2,差异有统计学意义(F=3.37,P=0.043);作用24 h的侵袭细胞数分别为(227±17)个、(164±19)个、(138±18)个、(129±19)个,差异有统计学意义(F=4.04,P=0.032)。结论阻断MAPK信号通路可抑制HCC射频消融后残留癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。

关键词： 磷酸赖氨酸磷酸组氨酸无机焦磷酸盐磷酸酶   胃腺癌   增殖   迁移   预后  

摘要： 目的探讨胃腺癌患者磷酸赖氨酸磷酸组氨酸无机焦磷酸盐磷酸酶(LHPP)表达的变化,及其对癌细胞生物学功能的影响。方法选取2020年10月—2021年6月江苏大学附属医院胃腺癌患者21例,收集其癌组织和癌旁组织。通过生物数据库分析LHPP在胃癌中的表达及其与患者预后的关系。检测胃腺癌患者癌组织和正常胃组织,以及不同细胞株(人胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株HGC-27、AGS、MKN-45、SGC-7901、MGC-803)中LHPP蛋白和mRNA的表达情况。构建胃癌细胞干扰模型,并采用细胞生物学实验评估LHPP对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。采用基因本体(GO)富集和京都基因与基因组数据库(KEGG)信号通路分析评估LHPP相关基因的作用。结果癌症基因组图谱计划(TCGA)数据库、综合基因表达(GEO)数据库和人类蛋白质图谱(HPA)数据库的分析结果显示,胃癌组织LHPPmRNA和蛋白表达均低于癌旁组织(P<0.05);Kaplan-Meier Plotter数据库的分析结果显示,LHPP高表达的胃癌患者总生存期、首次进展生存期和再次进展生存期均长于LHPP低表达的胃癌患者[风险比(HR)分别为0.66、0.57、0.64,95%可信区间(CI)分别为0.54~0.81、0.45~0.73、0.48~0.85]。各胃癌细胞LHPP蛋白和mRNA相对表达量与GES-1细胞比较,差异均有统计学意义(P<0.05),选择AGS细胞进行后续实验。胃腺癌患者癌组织中LHPP蛋白和mRNA相对表达量均低于癌旁组织(P<0.05)。LHPP可抑制AGS细胞的增殖和迁移。LHPP在胃癌中的主要功能为有丝分裂中的细胞周期调控、正向调控DNA代谢过程、蛋白折叠、调控核质转运等,主要涉及细胞周期、TPX2调控AURKA激活和表观遗传学调控基因表达等信号通路。结论胃腺癌患者LHPP呈低表达,且与患者预后密切相关。LHPP对胃腺癌细胞的增殖和迁移有抑制作用。