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关键词： 药剂学   分子生物学   细胞生物学   材料学   分子影像学  

摘要： 随着国内外药学的发展,药剂学已经在理论和实践上有了不断的更新和扩展,所以在药剂学的教学中渗透相关学科的学习十分必要。本文主要阐述相关学科与药剂学科的内在联系,探讨多学科渗透式教学对宽口径、高素质、前沿性药剂学人才培养的必要性。作者结合自己的科研和教学经验探讨渗透分子生物学、细胞生物学、材料学和分子影像学等学科对药剂学发展和人才培养的意义。

关键词： RNA   小分子干扰   FHL2基因   K562细胞   细胞增殖   细胞凋亡  

摘要： 目的 探讨FHL2基因对人类急性红白血病细胞生物学功能的影响.方法 应用Western blot检测常见白血病细胞系（K562、HEK293T、U937、HL-60、Kasumi-1、SKNO-1、NB-4及Nalm-6）FHL2蛋白表达情况.采用RNA干扰技术设计并合成FHL2 mRNA特异性shRNA,构建pLKO.1-puro干扰载体,制备慢病毒并感染人类急性红白血病K562细胞;应用实时定量聚合酶链反应（PCR）方法检测干扰效率;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测干扰FHL2对细胞增殖能力的影响;用流式细胞术分析细胞凋亡的变化.结果 FHL2在K562、Kasumi-1和Nalm-6等白血病细胞系中表达,尤其在K562细胞中高表达.Western blot检测显示干扰FHL2的K562细胞FHL2蛋白相对表达水平较转染阴性对照序列的K562细胞明显下降（相对表达水平分别为1、0.284,t=8.872,P=0.0004）,干扰K562细胞中FHL2基因表达能够抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡.结论 FHL2基因在多种白血病细胞系中表达升高.shRNA靶向干扰FHL2基因的表达可有效抑制K562细胞的增殖,促进其凋亡.

关键词： 分子细胞生物学   细胞骨架   微结构   动态重组   力传导  

摘要： 细胞骨架是生物大分子在力学-化学-生物学耦合作用下形成的一个动态平衡系统,是具有多尺度特征的动态纤维网络结构。在细胞铺展、迁移及细胞力传导等生理过程中,细胞骨架均起着重要作用,其多态性微结构及其动态重组行为决定着细胞的力学行为。因此,探索细胞骨架在这些生理过程中的微观机制有重要意义。文章从实验及理论模型两个方面,对细胞骨架的动态重组及其复杂力学行为的研究进行梳理总结,并对未来可能的发展方向和应用前景进行展望。

关键词： 整合素链接激酶   细胞凋亡   细胞增殖   肿瘤   肺岩宁  

摘要： 目的在建立整合素连接激酶(ILK)基因RNAi慢病毒表达载体的基础上,研究ILK基因沉默后对人肺腺癌细胞A549细胞生物学活性的影响及中药肺岩宁方对细胞活性的影响。方法构建载体转染人肺腺癌细胞A549后,分为阴性对照病毒感染细胞组(NC组)、RNAi靶点病毒感染细胞组(KD组)、10%肺岩宁血清干预的NC组(NC+10%中药血清组)、10%肺岩宁血清干预的KD组(KD+10%中药血清组)、20%肺岩宁血清干预的NC组(NC+20%中药血清组)、20%肺岩宁血清干预的KD组(KD+20%中药血清组)及10%(10 mg/L)DDP干预的KD组(KD+10%DDP组)。MTT检测不同浓度的药物敏感性,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,Transwell实验和克隆形成检测细胞的迁移和成瘤能力。结果①KD组与NC组相比,KD组细胞凋亡率上升(P<0.05),G2/M期细胞总数的百分比明显降低(P<0.01),转移率明显降低(P<0.05),克隆数目明显减少(P<0.05)。②KD+10%中药含药血清组与NC+10%中药血清组相比,KD+10%中药血清组细胞凋亡率明显上升(P<0.05),G2/M期细胞总数的百分比明显降低(P<0.01),转移率无显著性差异(P>0.05),克隆数目明显减少(P<0.05)。③KD+20%中药血清组与NC+20%中药血清相比,KD+20%中药血清细胞凋亡率下降(P<0.01),G2/M期细胞总数的百分比降低(P<0.01),转移率无显著性差异(P>0.05),克隆数目明显减少(P<0.05)。④KD+10%DDP组与NC+20%中药血清组相比,KD+10%DDP组细胞凋亡率上升(P<0.01),G2/M期细胞总数的百分比明显降低(P<0.01),转移率明显降低(P<0.01),克隆数目明显减少(P<0.01)。结论 ILK基因沉默后可以明显促进人肺腺癌细胞A549的凋亡,降低细胞迁移和成瘤能力,对细胞周期无调控作用;10%中药肺岩宁方含药血清有促进细胞凋亡及抑制细胞克隆形成的能力;20%中药含药血清可以抑制细胞克隆形成能力;10%DDP有促进细胞凋亡、抑制细胞迁移和克隆形成的能力。

关键词： 肾细胞癌   去甲基化   Hippo—YAP   大肿瘤抑制基因1   Yes-相关蛋白  

摘要： 目的探讨LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响。方法利用RT-PCR检测人肾透明细胞癌细胞系786-O和人胚肾细胞系HEK-293中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(yes-associated protein,YAP)mRNA的表达水平,用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequence-PCR,BSP)对LATS1低表达细胞786-O进行甲基化分析,5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,DAC)处理786-O和HEK-293后,用RT-PCR、Western blot检测各组细胞LATS1和YAP的mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期,CCK-8检测各组细胞增殖抑制情况。结果 786-O较HEK-293 LATS1mRNA表达水平显著降低(P<0.05),YAP mRNA表达水平显著升高(P<0.05),BSP显示LATS1在人肾癌细胞系786-O中高度甲基化;DAC处理786-O后,LATS1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),YAP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),周期停滞在G0/G1期(P<0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)、细胞凋亡显著增加(P<0.05),而HEK-293组均无明显变化(P>0.05)。结论 LATS1基因去甲基化后下调YAP基因表达,抑制786-O细胞增殖并诱导其凋亡。LATS1基因甲基化在肾癌发生中起重要作用。

关键词： 人脂肪间充质干细胞   冻存   生物学特性   干细胞库  

摘要： 目的:比较人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)冻存前和复苏后的生物学特性,为今后建立低温干细胞库提供实验支持。方法:采用0.1%Ⅰ型胶原酶消化法从腹部大网膜脂肪组织中分离hADSCs,体外培养扩增,将处于均一稳定生长状态的第3代hADSCs置于液氮中分别冻存1、3和6个月,复苏后台盼蓝染色检测细胞存活率,采用MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面抗原,成脂成骨诱导后鉴定多向分化能力,RT-PCR检测成脂特异性基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(peroxisome proliferator-activated receptorγ-2,PPARγ-2)和成骨特异性基因骨钙素(osteocalcin,OC)的表达情况。结果:随冻存时间的延长细胞存活率略有下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示冻存前后细胞增殖能力均很强。流式细胞检测结果显示冻存前后细胞均高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD166,低表达CD45和HLA-DR。冻存前后hADSCs均具有向脂肪细胞和骨细胞分化潜能,且RT-PCR结果显示,PPARγ-2和骨钙素mRNA的表达冻存前后差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:经液氮冻存后的hADSCs具有高存活率,生物学特性保持稳定且仍具有多向分化潜能。

关键词： 模糊层次分析法   多媒体   细胞生物学   教学质量评价  

摘要： 科学有效的教学质量评价是加强本科院校教学管理和提高教学质量的重要手段.为找出影响课堂教学效果的主要因素,利于教师教学水平的提高,采用模糊层次分析法(FAHP)对细胞生物学课堂教学效果进行综合评价.

关键词： 细胞生物学   中国科学院   学术研讨会   海峡两岸   台湾省   澎湖   学术会议   研究成果  

摘要： “海峡两岸细胞生物学学术研讨会”是由中国科学院已故姚鑫院士与中国台湾“中研院”吴成文院长于1996年组织发起的学术会议，旨在交流两岸细胞生物学最新研究成果，推进两岸生物学科技与教育的合作与发展。会议由海峡两岸轮流举办，目前每三年举办两次，已经成功举办了九届。

关键词： 树突细胞   他克莫司   免疫耐受  

摘要： 目的 探讨他克莫司诱导的人源耐受性树突细胞（tDC）的生物学特性及免疫抑制功能.方法 分离人外周血单核细胞,在含GM-CSF和IL-4的药品生产质量管理规范级树突细胞（DC）培养液中诱导培养DC,于第3、第5天加入0.1μmol/L他克莫司进一步培养诱导tDC,流式细胞术检测细胞分子标志及存活率.用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）活细胞染色检测诱导的tDC与效应T细胞共培养后的异源CD4＋效应T细胞增殖情况及tDC对成熟DC引起的混合淋巴细胞反应的抑制能力.检测他克莫司诱导的tDC经冻存复苏后的分子标志及免疫抑制功能.结果 他克莫司诱导的tDC显示出典型的耐受性细胞表型：共刺激分子CD80、CD83、CD86及HLA-DR表达水平分别为（2.95±1.32）％、（2.33±1.60）％、（90.02±7.42）％、（91.80±6.18）％,其存活率为（85.24±4.72）％.他克莫司诱导的tDC与效应T细胞共孵育5d,效应T细胞的增殖率为0.42％,且它能有效抑制成熟DC引起的混合淋巴细胞反应,抑制率达（67.01±19.73）％.其在冻存复苏后仍具有表型和功能的稳定性.结论 他克莫司诱导培养的tDC具有典型的免疫耐受细胞表型,不能诱导异源CD4＋T细胞增殖,并可有效抑制成熟DC引起的混合淋巴细胞反应.

关键词： 细胞生物学   实验   高等学校   教材  

ISBN: (纸本)9787560996967

摘要： 本教材针对细胞生物学的学科趋势、实验技术发展和使用的普遍性、实践教学的可操作性等特点，本实验教材共设置8个部分(54个实验项目)，在各部分同时注重实验项目设置的系统性。