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关键词： 幽门螺杆菌   cag7-n基因   克隆   增殖  

摘要： 目的研究克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)cag7-n基因对BGC-823细胞增殖和IL-8分泌的影响.方法采用PCR技术从***基因组DNA中扩增cag7-n基因片段,构建重组质粒pET-28a-cag7-n,转化大肠杆菌BL21,经Western blot鉴定,纯化的蛋白作用于BGC-823细胞,用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响.结果成功克隆cag7-n基因,经镍柱纯化后可获得纯度为98%的重组蛋白.纯化蛋白浓度在100,150,200μg/mL时,培养时间延长,细胞的增殖受到抑制;在相同的培养时间,细胞的增殖程度随蛋白浓度的增加而降低.结论成功克隆了cag7-n基因,并在大肠杆菌BL21中表达,经过镍柱纯化后得到纯度较高的蛋白,纯化透析后的蛋白与BGC-823细胞共培养,可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达及其对BGC-823细胞增殖的影响.

关键词： 细胞生物学实验   教学改革   开放性实验教学  

摘要： 细胞生物学实验课程是细胞生物学理论教学的重要组成部分,是培养学生实际操作和科技创新能力及提高学生综合素质的有效途径。该文结合细胞生物学实验教学改革的实践经验,从优化实验教学内容、改革实验教学模式和建立合适的考核体系等方面对进一步完善细胞生物学实验教学提出了几点体会。

关键词： 细胞学/教育   学生,医科   基于问题的学习   多媒体   教学方法  

摘要： 医学细胞生物学是现代医学与生命科学的重要交叉学科之一。该学科从微观水平来分析生物体宏观的基本生命活动规律,其内容非常庞杂。如何在有限的学时内,既让医学生能够充分学习医学细胞生物学的理论知识,又能及时了解细胞生物学发展的前沿动态及医学实践中的相关应用,是细胞生物学教学工作需不断探索的重要问题。

关键词： 细胞生物学   教学改革   案例教学  

摘要： 传统的细胞生物学教学往往以讲授为主,把知识全面地"灌输"给学生,不利于学生学习能力的培养。案例教学则以培养学生自己动手、动脑,发现、分析、解决问题的能力为主,逐步实现学生的自主学习。文章从围绕教学大纲,合理编写案例;从教学目标出发,体现以学生为主体的学习等具体案例初步探讨在高等医学院校细胞生物学课程中合理开展案例教学,提高教学质量。

关键词： 表皮   干细胞   受体,阿片样   细胞增殖  

摘要： 目的 探讨δ型阿片受体活化对离体人表皮干细胞（human epidermal stem cells,hESCs）增殖与迁移的影响,为临床皮肤损伤的诊治提供理论依据. 方法 取健康青年自愿捐赠的新鲜包皮组织,采用酶消化和差速贴壁法分离培养hESCs,行整合素β1、细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）染色,流式细胞仪检测hESCs纯度.取第2代hESCs分别用含1 nmol/L（D-Ala2、K-Leu5）-脑啡肽的角质形成细胞无血清培养基（keratinocyte serum-free medium,K-SFM）（A组）、含1 nmol/L纳曲吲哚和1 nmol/L（D-Ala2、K-Leu5）-脑啡肽的K-SFM培养基（B组）以及单纯K-SFM培养基（C组）连续培养5d.采用MTT法检测hESCs分裂增殖活性.于培养后24 h刮擦生长融合成片的hESCs,制备宽度为100 μm的体外单层hESCs缺损模型,于模型制备后24,48,72,96 h在倒置相差显微镜下观察各组表皮细胞划痕创伤模型愈合情况,计算模型制备后72 h各组创面愈合率. 结果 原代培养的hESCs贴壁后呈鹅卵石样生长.免疫荧光染色法检测第2代hESCs的整合素β1、CK19均呈阳性标记,流式细胞仪检测hESCs的纯度为95.6％.分组培养后,MTT结果显示,A组hESCs分裂增殖活性高于C组,B组低于C组,各组间差异均有统计学意义（P＜0.05）.单层细胞缺损模型制备后24 h,各组均可见hESCs迁移越过创缘,其中A组越过创缘的细胞数多于C组,B组少于C组.模型制备后72 h,细胞迁移A组为（89.5±0.7）％,B组为（76.1±0.3）％,C组为（81.1±0.6）％,组间差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 δ型阿片受体活化后促进hESCs的分裂增殖和迁移活动,并可能参与皮肤损伤与修复过程.

关键词： 现代教育技术   细胞生物学和医学遗传学   实验教学   数码显微教学系统  

摘要： 细胞生物学和医学遗传学是医学院校的基础学科,实验教学是其不可缺少的教学环节。我们尝试将现代教育技术应用于细胞生物学和医学遗传学教学,以充分调动学生学习的积极性和主动性,有效实现了师生互动,教学效果显著。

关键词： 细胞生物学   研究型教学   教学效果  

摘要： 细胞生物学是生命科学中一门重要的专业基础课,也是近年来生命科学中发展最活跃的学科之一,在生命科学教育中占有核心地位。该文重点探讨了利用研究性教学方法改革传统课堂教学模式的新思路,并对细胞生物学的教学内容进行了调整和优化。旨在全面提高教学质量,提高学生的综合素质。这一教学改革对于实现高素质应用型人才的培养目标具有较大的现实意义。

关键词： 间充质干细胞   脐带   Wharton’sjelly   分离   培养  

摘要： 目的探讨人脐带Wharton’s jelly间充质干细胞的培养方法及生物学特性。方法将脐带Wharton’s jelly剪成约0.5 mm3种植到培养瓶,3 h后添加培养液。细胞达90%融合时用胰酶消化传代。用免疫组化检测波形蛋白的表达;用流式检测细胞膜表型;用诱导液检测其分化为脂肪样细胞和神经样细胞的潜能。结果培养6 d左右,细胞从组织块游出,为长梭形的成纤维样细胞,传代后细胞增殖加快,呈放射状分布。间充质干细胞标记物CD90等为阳性,而CD34等为阴性;波形蛋白呈强阳性。成脂诱导后,细胞质出现脂滴,油红O染色为阳性。经黄芪诱导24 h,细胞表达Nestin和NF,而NSE和GFAP为阴性。结论人脐带Wharton’s jelly中有间充质干细胞,且有多向分化潜能。

关键词： 间充质干细胞   生物学功能   Akt1   蛋白表达  

摘要： 目的探讨Akt1过表达对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）生物学功能的影响。方法雄性健康C57小鼠,鼠龄7~8周,体质量18~25 g。取该小鼠胫骨和股骨,利用BMSCs的贴壁生长能力进行分离,并对获取的细胞进行流式鉴定。构建Akt1-IRES-GFP逆转录病毒载体,感染BMSCs,并筛选、扩增Akt1过表达的BMSCs。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot测定转染Akt1表达情况。用不同浓度（0、10、50、100 ng/mL）的γ干扰素（IFN-γ）处理Akt1-BMSCs及BMSCs,采用四唑氮化合物（MTS）法绘制生长曲线,通过Ca2＋依赖性磷脂结合蛋白/碘化丙啶（AnnexinV/PI）复染,观察不同浓度IFN-γ对Akt1-BMSCs及GFP-BMSCs细胞凋亡的影响。结果成功培养出小鼠BMSCs,高表达CD29、CD44、Sca-1,而不表达CD45、CD34,CD11b、CD31、FLK-1、MHC-Ⅱ。成功筛选并扩增出Akt1-BMSCs;RT-PCR显示,Akt1-BMSCs的Akt1基因表达量明显高于BMSCs（P〈0.01）;Western blot显示,Akt1-BMSCs的总Akt1蛋白及磷酸化Akt蛋白均高于BMSCs。流式细胞仪检测Akt1-BMSCs及GFP-BMSCs的绿色荧光蛋白（GFP）的表达量均高于95%。细胞增殖及凋亡实验显示,在正常培养及高浓度IFN-γ（100 ng/mL）的刺激下,Akt1-BMSCs显示出了增殖及抗凋亡优势。结论 Akt1-BMSCs比相同代数的BMSCs在正常培养及高浓度IFN-γ（100 ng/mL）的刺激下增殖及抗凋亡能力增强,可用于进行下一步的研究。

关键词： X连锁的凋亡抑制蛋白相关因子1   肺癌   生存素   上皮细胞钙黏蛋白  

摘要： 目的探讨稳定高表达X连锁的凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因对肺癌细胞生物学特性的影响。方法使用慢病毒作为载体将XAF1基因转染到肺腺癌A549细胞,用灭瘟素试剂(blasticidin)进行筛选,建立稳定高表达XAF1基因细胞株A549,用Western blot法检测细胞生存素蛋白和上皮细胞钙黏蛋白表达的变化。结果成功构建稳定高表达XAF1基因肺癌细胞株A549。A549中XAF1及上皮细胞钙黏蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞生存素蛋白表达下降(P<0.05)。结论用慢病毒载体可成功构建稳定表达XAF1基因的肺腺癌细胞株A549。XAF1基因高表达可抑制肺癌细胞的生长和转移。