关键词:
膀胱肿瘤
TRPV2
增殖
迁移浸润
摘要:
目的探讨TRPV2离子通道对膀胱肿瘤细胞株5637和EJ细胞增殖及迁移侵袭的影响。方法将人膀胱癌EJ细胞株分为空白组、对照组和sh-RNA干扰组;5637细胞株分为空白组,对照组和TRPV2转染组进行实验。经细胞筛选出单克隆阳性细胞后,采用Western blot检测TRPV2蛋白表达的变化,鉴定基因的转染效率。流式细胞仪检测细胞生长周期,MTT法检测细胞生长曲线,划痕法检测细胞迁移侵袭能力,Transwell法检测细胞的浸润能力。结果 Western blot结果显示EJ细胞干扰组的TRPV2蛋白表达量明显低于空白组与对照组;EJ细胞干扰组G1期细胞比例,显著高于空白组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MTT法检测绘制细胞周期结果,3组细胞数目在第3天开始出现差异,干扰组的细胞数目显著低于空白组和对照组的细胞数(P<0.05),空白组与对照组细胞相比细胞周期无显著差异;划痕实验检测发现,干扰EJ细胞中的TRPV2表达后可以抑制EJ细胞的迁移;Transwell细胞浸润实验,说明干扰EJ细胞中TRPV2的表达后可以抑制肿瘤细胞的局部浸润作用。Western blot结果显示,干扰组5637细胞的TRPV2蛋白表达水平明显高于空白组和对照组;但3组细胞G1期细胞比例的差异无统计学意义;MTT法检测绘制细胞周期结果,3组细胞的生长曲线无明显差异;划痕实验检测发现5637细胞中TRPV2的表达量上升后可以明显加强5637细胞的迁移作用;Transwell浸润实验说明经过导入外源性的TRPV2使5637细胞中TRPV2的表达量上升后可以明显加强5637细胞的对于局部组织的浸润作用。结论 TRPV2可能是治疗膀胱肿瘤的关键靶点。