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关键词： 生理性根吸收   牙周膜干细胞   生物学特性   破骨细胞  

摘要： 目的:比较生理性根吸收不同阶段的乳牙牙周膜干细胞(PDLSCs)的生物学特性,检测其对破骨细胞形成和凋亡相关分子的表达情况,为解释生理性根吸收的调控机制提供实验依据。方法:通过分离、培养处于不同生理性根吸收时期的乳牙PDLSCs(未吸收、中度吸收、重度吸收)与恒牙PDLSCs;采用流式细胞术、MTT实验比较各组PDLSCs的免疫表型、细胞增殖能力;采用成骨、成脂诱导与茜素红染色、油红O染色及Real-time PCR检测各期PDLSCs成骨成脂相关基因表达;采用Western blot检测各组PDLSCs的RANKL、OPG与FasL表达。结果:所分离获得各组乳牙PDLSCs表达间充质干细胞标志分子,与恒牙PDLSCs相比具有较强的增殖能力。其中,重度吸收组乳牙PDLSCs与其它组相比成骨能力最强、成脂能力最差。不同根吸收时期的PDLSCs差异表达RANKL、OPG与FasL蛋白。结论:不同根吸收时期乳牙PDLSCs生物学特性存在差异,RANKL、OPG与FasL的差异表达可能对生理性根吸收过程中破骨细胞的形成与凋亡起到调控作用。

关键词： DNA聚合酶β   基因敲除   食管癌   Eca9706细胞  

摘要： 目的：建立敲除DNA聚合酶β（ DNA polβ）基因的人食管癌Eca 9706细胞株，观察基因敲除细胞生物学行为的变化。方法：采用同源重组基因敲除方法，首先构建食管癌Eca9706细胞DNA polβ基因敲除载体，并将其导入Eca9706细胞，构建DNA polβ基因敲除细胞株。 PCR、RT-PCR、Western blot法检测DNA polβ基因敲除区段DNA存在及表达情况。流式细胞术和MTT法检测基因敲除细胞的细胞周期和生长速度。结果：筛选得到具有neo抗性的DNA polβ基因敲除Eca9706细胞，其基因组中DNA polβ基因区段已被敲除；RT-PCR和Western blot 检测不到DNA polβmRNA和蛋白表达。敲除DNA polβ基因的细胞生长速度缓慢，G2～M期细胞增多，S期细胞减少（ t＝3．882、3.869，P均＜0．05）。结论：成功构建了食管癌Eca9706 DNA polβ基因敲除细胞模型。

关键词： 细胞生物学   实验准备  

摘要： 细胞生物学是依赖于实验技术发展而不断进步的学科[1],它是高等医学院校生物学的主干课程之一,内容涵盖了细胞的结构、功能及生命规律。随着学科的发展和教育教学改革的要求,教学不在满足于传授知识,更重要的是培养学生综合素质和解决问题、分析问题的能力。实践证明,完善的实验准备是实验教学成功的一个关键因素[2]。

关键词： 学术活动   学术研讨会   细胞生物学   师范学院   工程材料   生物医学   海峡两岸   会议介绍  

摘要： 2014年春节前在玉林师范学院与该院学者、台湾学者联合召开“海峡两岸生物医学工程材料学术研讨会”，并在会议介绍了本实验室在肿瘤靶向多肽筛选、肿瘤细胞生物学方面的研究成果。

关键词： 干细胞   骨髓干细胞   髓核间质干细胞   增殖活性   凋亡   大鼠   山西省自然科学基金  

摘要： 背景:内源性干细胞并未在椎间盘退变的进程发挥修复作用,作者推测可能与相关致病因素的异常作用有关,导致对髓核间质干细胞功能产生一定的抑制效应。目的:观察炎症因子白细胞介素1β对大鼠髓核间质干细胞生物学特性的影响。方法:取3月龄雄性SD大鼠脊柱腰段椎间盘髓核组织,用胶原酶,胰酶序贯消化法分离并培养髓核间质干细胞。采用流式细胞术检测细胞免疫表型CD24,CD34,CD45,CD90,CD105表达;利用RT-PCR检测干细胞基因SOX2,Nanog的表达。观察髓核间质干细胞成脂、成骨、成软骨分化能力。利用流式细胞术检测白细胞介素1β作用于髓核间质干细胞后的凋亡率,荧光定量PCR检测白细胞介素1β作用于髓核间质干细胞后SOX9,蛋白多糖,Ⅱ型胶原酶,caspase-3基因的表达变化。结果与结论:体外分离培养出的细胞表现为纺锤样长梭形;CD90、CD105表达阳性,CD45、CD34、CD24表达阴性,表达干细胞基因SOX2,Nanog,具有成骨和成软骨分化能力,无成脂分化能力。CCK-8检测白细胞介素1β可以抑制髓核间质干细胞的增殖活性,与作用时间、作用浓度存在一定的依赖关系,最佳作用时间为48 h,最佳作用浓度为50μg/L。流式细胞仪检测白细胞介素1β可以使髓核间质干细胞轻度凋亡;荧光定量PCR结果显示:SOX9,蛋白多糖,Ⅱ型胶原的mRNA表达下调,caspase-3表达上调。结果可见白细胞介素1β具有抑制髓核间质干细胞增殖活性并诱导其凋亡的作用,是导致椎间盘自身干细胞无法发挥修复作用的原因之一。

关键词： 自组装膜   功能团   骨骼肌细胞   生物学特性  

摘要： 目的探讨自组装膜表面不同的功能团对骨骼肌细胞生物学特性影响。方法通过自组装技术在金片表面接枝不同的化学功能团(-CH3、-COOH、-NH2、-OH),测定接触角和原子力显微镜确定其表征,将材料与骨骼肌细胞进行共培养,分别通过SEM、DAPI染色、MTT法、钙黄绿素染色和流式检测法等方法观察不同功能团对骨骼肌细胞的形态、粘附、增殖、活力及凋亡的影响。结果含有-NH2和-COOH基团的材料表面能明显促进骨骼肌的粘附、增殖,具有良好的生物相容性;而含有-CH3基团的基片明显不利于骨骼肌细胞的粘附、增殖,并对骨骼肌细胞凋亡有一定的促进;不同的功能团材料对骨骼肌细胞粘附、增殖率影响的顺序从大到小依次为-NH2>-COOH>-OH>-CH3;不同的化学功能团对细胞凋亡率和毒性的顺序-NH2<-COOH<-OH<-CH3。结论不同的功能团对骨骼肌细胞的生物特性具有不同的影响,含有-NH2基团的基片能明显促进细胞的粘附和增殖,有利于构建具有促细胞粘附的生物材料界面;而含有-CH3基团的材料不利于细胞的粘附和增殖,有利于构建抗粘附的生物材料表面界面。

关键词： 细胞生物学   成骨细胞   纳米羟基磷灰石/聚酰胺66/玻璃纤维  

摘要： 目的,研究用于制备新型生物活性接骨螺钉的纳米羟基磷灰石／聚酰胺66／玻璃纤维（nano—hydroxyapatite／polyamide66／glassfiber，n-HA／PA66／GF）对成骨细胞生物学行为的影响，为生物螺钉后期临床应用提供实验依据。方法,制备圆片状n-HA／PA66／GF及其浸提液；取小鼠成骨细胞与n-HA／PA66／GF浸提液共培养，采用直接接触实验观察细胞生长变化情况；MTT实验检测细胞增殖情况；流式细胞仪检测细胞凋亡率；ELISA法测定细胞骨钙素含量；Tran-swell小室实验观察细胞迁移能力；扫描电镜观察细胞黏附和生长情况；细胞免疫荧光检查细胞骨架及肌动蛋白纤维表达。结果,直接接触实验表明，n-HA／PA66／GF对成骨细胞无明显细胞毒性。MTT检测n-HA／PA66／GF浸提液与成骨细胞共培养2，4，6d后，吸光度（A）值分别为0.96±0.14，1.54±0.15，2.39±0.27。结果显示，成骨细胞数量随着培养时间延长而增多（P〈0.05）。流式细胞检测结果证实，n-HA／PA66／GF能使更多成骨细胞进入S期而对细胞凋亡率无明显影响，成骨细胞骨钙素分泌随着共培养时间延长而增多。Transwell实验显示，含浸提液和FBS的α-MEM培养基小室穿过半透膜的细胞数分别为（8.73±3.26）个／视野、（9.47±3.29）个／视野，差异无统计学意义（P〉0.05）。扫描电镜观察n-HA／PA66／GF表面的成骨细胞形态规整，紧紧黏附在材料表面，逐渐呈现复层生长。免疫荧光结果表明，材料浸提液对细胞骨架及肌动蛋白纤维的分布无明显影响。结论,新型生物螺钉n-HA／PA66／GF具有良好的成骨细胞相容性，对细胞生长、增殖、分泌、黏附、周期和骨钙素分泌等均有一定调节作用。

关键词： 干细胞   培养   牙周膜干细胞   牙周膜细胞   成骨   增殖   生物学特性   表面标志物   新疆维吾尔自治区自然科学基金  

摘要： 背景:牙周膜干细胞生物作用是目前牙周病治疗研究的热点,牙周膜成纤维细胞是其分化的终末功能细胞之一,也是其主要的支持细胞,两者生物学特性的差异研究鲜有报道。目的:比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞生物学特性的差异。方法:用组织块法体外对牙周膜细胞以及单细胞克隆分离纯化后的人牙周膜干细胞两种细胞分别进行显微镜下形态观察,CCK8法检测并绘制2种细胞的生长曲线。流式细胞分析比较2种细胞的细胞周期以及细胞表面标记物的表达、实时PCR对2种细胞碱性磷酸酶、增殖细胞核抗原和Scleraxis基因进行检测。结果与结论:牙周膜干细胞与牙周膜成纤维细胞外观差别明显,人牙周膜干细胞的生长曲线培养前5 d要低于牙周膜细胞,但在5 d后明显高于牙周膜细胞。人牙周膜干细胞与牙周膜细胞的细胞周期分别为41.1%和23.9%。表面标记物检测结果显示2种细胞虽有相似的表达,但在表达率差异有有显著性意义。实时荧光定量PCR结果显示,人牙周膜干细胞在碱性磷酸酶、增殖细胞核抗原以及Scleraxis基因的表达检测均高于牙周膜细胞。表明牙周膜干细胞在成骨增殖等生物学功能上比牙周膜细胞具有更强的潜能。

关键词： 细胞生物学   教学改革   策略   实践研究  

摘要： 细胞生物学是生命科学的四大基础学科之一,教学内容及研究内容广泛,属于仍在不断发展中的学科,在医学院校开设的细胞生物学,教学内容多侧重在医学领域的应用,被称为医学细胞生物学,是医学院校重要的基础学科。二者仅就知识体系的构建而言是相同的。基于细胞生物学具有微观、抽象、高兴尖的特点,教学教革具有反复推敲性、探索性、长效性的特点。本文在积累多年教学改革与实践经验的基础上,制定能提高教学效果的一系列教学改革策略,与广大细胞生物学教学工作者予以交流与探讨。

关键词： 医学细胞生物学   发现教学法   应用  

摘要： 面对新时期的医学教育改革,医学细胞生物学的教学也应与时俱进,不断融入新的教学模式,跟上时代发展的步伐。生物学是当今自然科学的带头学科,进展迅速,在教学中注重培养学生自主学习、终生学习和创新能力势在必行。医学院校的教育对象是医学生,将来必将面对复杂的医患关系,强化医学生认识认问题、解决问题和创新能力,是医学教育的重要目标。因此,在医学细胞生物学教学中引入发现教学法是一种有益的积极探索。