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关键词： 翻转课堂   细胞生物学   实验   自主学习  

摘要： 翻转课堂教学模式具有提高学生自主学习能力,易化学生知识与能力提升的等优点。本文以《细胞生物学实验》"植物细胞DNA制备与显示技术"课例为研究对象,采用网络课程资源自主学习、热点问题专题讨论、实验方案设计等方式,植入了PBL法的"问题设置"、"问题解决"、"能力拓展"翻转课堂模式,形成学习资源搜集、课前自主学习与合作实验探究、课堂讨论与答疑、课后能力拓展、反馈与评价的"五段学习法"。在锻炼实操技能的同时,培养学生关注食品安全及环境问题的意识。

关键词： miR-146a   胃癌   增殖   凋亡  

摘要： 目的 探讨miR-146a在胃癌中的表达及其对胃癌细胞生物学特性的影响。方法 RT-q PCR检测胃癌组织及癌旁组织中miR-146a表达;培养人胃癌细胞株MKN-28、SGC-7901、MKN-45和胃永生化上皮细胞株GES-1,以胃永生化上皮细胞株GES-1作为参照,RT-q PCR检测各细胞株中miR-146a的表达;将miR-146a模拟物（mimics）和miR-146a control转染到胃癌细胞株MKN-45中,RT-q PCR检测转染后miR-146a的表达;CCK8检测转染后miR-146a对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染后miR-146a对细胞凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果 miR-146a在胃癌组织中的表达显著低于癌旁组织（P〈0.01）;与GES-1比较,miR-146a在胃癌细胞株MKN-45中的表达最低,因此选择胃癌细胞株MKN-45做后续研究;转染miR-146a模拟物的miR-146a的表达量显著高于对照组（P〈0.01）;CCK8检测增殖试验结果显示,miR-146a mimics组在24h细胞的增殖率显著低于miR-146a control（P〈0.05）,48h和72h细胞的增殖率显著低于miR-146a control（P〈0.01）;流式细胞仪检测结果显示,转染miR-146a mimics组细胞的凋亡率显著高于miR-146a control;Western blot检测结果显示,miR-146a mimics组Cleaved-caspase-3和Bax的蛋白表达量显著高于miR-146a control,miR-146a mimics组Bcl-2的蛋白表达量显著低于miR-146a control（P〈0.05）。结论 miR-146a在胃癌组织表达低于癌旁组织,转染miR-146a模拟物能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

关键词： 喉肿瘤   肿瘤细胞,培养的   癌,鳞状细胞   细胞系  

摘要： 目的原代培养喉鳞状细胞癌组织细胞，观察其生物学特性。 方法采用组织块法对喉鳞状细胞癌组织细胞进行原代培养，体外传代观察，传代25次以上对培养细胞进行形态学观察、角蛋白组织化学染色、细胞周期检测、培养法进行支原体检测、PCR法细胞种属鉴定、短串联重复序列（short tandem repeat, STR）分型。 结果新建立的喉鳞状细胞癌细胞系命名为TR-LCC-1，肿瘤细胞形态大部分呈多边形，似铺路石样排列，失去接触抑制而重叠生长，细胞体积大，异形性明显。细胞角蛋白染色阳性。体外连续培养6个月，传代30次以上，细胞倍增时间为201.2 h。细胞周期测定G1期为51.71%，S期为44.56%，G2期为2.28%。支原体检测无支原体污染。细胞种属鉴定TR-LCC-1为人来源细胞。STR检测分析P26与P6相同，且与已公开细胞的STR不同。 结论建立了来源于喉鳞状细胞癌的细胞系TR-LCC-1，可用于喉鳞状细胞癌的肿瘤实验研究。

关键词： 生物制剂   包涵体蛋白   细胞增殖   生化药理  

摘要： 目的：利用大肠杆菌系统表达重组人成纤维细胞生长因子-16(rhFGF16)，通过优化表达以及纯化条件，获得可溶和包涵体两种表达形式的高纯度及高活性的重组hFGF16蛋白，并建立hFGF16蛋白的生物学活性检测方法。此外，在细胞分子层面研究hFGF16蛋白促进H460 cells的增殖作用及其增殖的发生机制。\n 方法：从Gene Bank中筛选目的基因人FGF16，进行大肠杆菌偏好性优化后并合成基因FGF16，经质粒扩增后与表达载体pET-3d进行双酶切连接，构建新的重组子 pET-3d-hFGF16。重组子经双酶切和基因测序鉴定后，转化至 *** BL21(DE3) pLysS感受态细胞中制备表达工程菌株，通过筛选以获得稳定性高的表达量较高的工程菌。通过优化发酵工艺参数，调节目的蛋白的可溶性表达以及包涵体表达，其中包涵体部分经6M盐酸胍变性后经一步逐滴稀释至0M盐酸胍缓冲液中，离心并收集沉淀，沉淀部分再次经8M脲进行变性，然后透析至4M脲缓冲液中，再依次稀释至2M脲缓冲液-0M脲缓冲液中，离心收集上清即为可溶蛋白。基于hFGF16蛋白等电点以及肝素亲和性，建立了可溶性与包涵体两种表达形式蛋白的纯化方法。重组蛋白hFGF16经SDS-PAGE联合Western blot鉴定后，利用MTT法检测重组蛋白hFGF16对NIH3T3细胞的促增殖活性。基于亚家族成员FGF9能促进胚胎时期肺的发育以及肺支气管的分化和肺相关癌症的进程，建立了利用MTT法检测hFGF16促进H460 cells增殖的作用，同时通过Western blot筛选相关增殖信号通路，其中对经典的促细胞增殖的信号通路Akt以及 MAPK信号通路进行了验证，并进一步引入了该信号通路中关键蛋白的抑制剂组分，通过MTT结合Western blot的检测方法确定了hFGF16的促增殖作用机制。\n 结果：经大肠杆菌表达偏好性优化的目的基因成功地导入至表达载体pET-3d中并构建重组表达质粒pET-3d-hFGF16，重组质粒转化至*** BL21(DE3) pLysS表达菌株中。通过优化表达条件成功获得可溶性和包涵体两种表达形式的蛋白，包涵体部分经过两次变性和复性处理获得可溶蛋白，两种存在于上清中的hFGF16蛋白，经阳离子交换层析柱和肝素亲和层析柱纯化得到的蛋白纯度＞95%，其中可溶性形式蛋白收率约为130 mg/g，包涵体形式蛋白收率约为240 mg/g。细胞活性检测证实，纯化的重组蛋白能显著地促进NIH3T3细胞的增殖，在3 ng/mL～100 ng/mL之间呈现剂量依赖性，且两种形式表达蛋白无明显的统计学差异性。细胞实验结果表明，hFGF16能促进NCl-H460 Cells的增殖并通过激活关键蛋白Akt和Erk1/2以及p38 MAPK的磷酸化来促进NCl-H460 cells的增殖作用。\n 结论：成功构建表达质粒pET-3d-hFGF16以及在***21(DE3) pLysS中成功表达了具有高生物学活性和高纯度的rhFGF16蛋白，并建立了可溶及包涵体两种表达形式蛋白的纯化方法及利用NIH3T3细胞株测定hFGF16蛋白的生物学活性的方法。另外，细胞实验证明rhFGF16通过激活Akt和Erk1/2以及p38 Mapk信号通路来促进H460 cells的增殖作用。

关键词： 科学研究人员   不老泉   生命科学   细胞研究   细胞生物学   终身职业   基础科学领域   研究成果   国际期刊   基础研究领域  

摘要： 作为一名科学研究人员,“有趣”是他最常挂在嘴边的一个词。因为有趣,他选择了生命科学作为自己的终身职业;因为有趣,他花费8年时间“打磨”一篇论文;因为有趣,他把看似废物的尿液变成了传说中的“不老泉”……裴端卿,中国科学院广州生物医药与健康研究院院长、中国细胞生物学学会再生细胞生物学分会会长。

关键词： 会议网站   开始日期   结束日期   生物合成   生物物理学   细胞生物学   Royal   biosynthesis   http   生物技术  

摘要： 所属学科：生物物理学、生物化学及分子生物学,细胞生物学,生物技术与生物工程开始日期：2017-03-22结束日期：2017-03-24所在国家：英国所在城市：英国具体地点：Warwick,U.K.主办单位：Royal Society of Chemistry联系电话：＋44（0）1223 434048会议网站：http：//***.

关键词： 医学细胞生物学   主观能动性   调查问卷  

摘要： 医学细胞生物学实验课程是医学生细胞生物学理论与实践相结合的重要一环,对于培养学生的学习兴趣、主动性、创造性、创新性都有着积极重要的作用。如何有效的提高学生的主观能动性,提高医学细胞生物学实验课程的有效性,是我们需要不断积极探索的问题。通过对学生问卷调查,了解怎样提高学生主观能动性的方法,并且在实验课程中实施,收到了良好的效果。

关键词： 翻转课堂   教学设计   医学细胞生物学实验  

摘要： 随着教育信息技术的快速发展,翻转课堂作为一种新型教学模式,受到国内外越来越多的一线教师和教育研究者的关注。翻转课堂教学模式通过课前知识传授和课堂知识内化时间的颠倒安排,实现了在线学习与传统课堂的有机融合,在一定程度上弥补了传统教学模式的不足。本文以医学细胞生物学实验课程为例,提出了较为完善的翻转课堂教学模式的教学设计方案,以期提高医学细胞生物学实验的教育教学质量,并为其他课程的翻转课堂教学设计提供借鉴。

关键词： 生物医药领域   细胞生物学   人工材料   人体系统   人体功能   自由驰骋   工程科学   生命科学   卫生保健   表皮细胞  

摘要： 目前,不同行业、不同组织对生物医药领域的定义和圈定的范围并不统一,甚至不同人的观点也常常大相径庭。综合应用生命科学与工程科学的原理和方法,从工程学角度在分子、细胞、组织、器官乃至整个人体系统多层次认识人体的结构、功能和其他生命现象,从而研究用于防病、治病、人体功能辅助及卫生保健的人工材料、装置和系统技术,是生物医学最为广泛也是最重要的应用。

关键词： 间充质干细胞   生物学特性   应用   免疫调节能力   cells   多能干细胞   胚胎发育   多向分化  

摘要： 间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是起源于胚胎发育早期中胚层和外胚层的一类具有自我增殖更新、多向分化以及免疫调节能力的多能干细胞。