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关键词： 结肠癌   钙离子通道   TRPV5   TRPV6   Ca^2+  

摘要： 目的:观察TRPV5和TRPV6蛋白表达水平对结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平及细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法:给予TRPV5、TRPV6通道激动剂1-25(OH)_2D_3及抑制剂CuCl_2作用结肠癌SW480细胞后,采用免疫组织化学法、Western blot及实时荧光定量PCR技术检测TRPV5、TRPV6蛋白及TRPV5、TRPV6 mRNA表达的变化。使用高速离子成像系统观察结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平的变化;通过MTT法、TUNEL法及划痕修复法观察结肠癌SW480细胞增殖、凋亡及迁移的变化。结果:1-25(OH)_2D_3明显上调结肠癌SW480细胞TRPV5、TRPV6 mRNA及蛋白表达水平,使结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平增加,促进结肠癌SW480细胞增殖、迁移及抑制其凋亡(P<0.05)。CuCl_2明显下调结肠癌SW480细胞中TRPV5、TRPV6蛋白及m RNA表达,使结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平降低(P<0.05),抑制结肠癌SW480细胞的增殖、迁移及促进细胞的凋亡(P<0.05)。结论:结肠癌SW480细胞中TRPV5和TRPV6蛋白表达水平的变化,能通过调控细胞内Ca^(2+)水平影响细胞的增殖、迁移和凋亡等生物学行为。

关键词： 学术不端行为   研究经费   论文   研究团队   领军人物   生命科学   日本   细胞生物学  

摘要： 2017年8月，日本细胞分裂研究领域“第一人”，东京大学分子细胞生物学研究所教授渡边嘉典被正式认定存在学术不端行为，其实验室5篇发表于Nature、Science等顶尖学术期刊的论文存在数据造假。渡边嘉典随之付出了沉重的代价：发表于Science的论文被撤稿、实验室成员大规模辞职、4亿日元的研究经费被叫停、国际学术圈的信任危机迎面而来……

关键词： 细胞生物学教学   原始文献   生物膜   促学   创新  

摘要： 为了培养创新科研人才,国内外都在进行教学改革,教学改革的重点是知识体系由简单记忆到融会贯通的转变。笔者在《细胞生物学》的课程教学中配套设计了相关原始文献的阅读,通过举一反三,帮助学生融会贯通。该文以课程教学中细胞内膜系统章节为例,介绍文献阅读时可能出现的问题以及针对这些问题设计的教学策略,并分享有关创新人才培养方面的教学体会。

关键词： 低氧   人牙囊细胞   增殖   迁移   分化  

摘要： 目的研究低氧对人牙囊细胞(h DFCs)生物学特性的影响。方法利用组织块酶消化法从年轻恒牙中分离培养h DFCs;采用免疫荧光技术检测细胞表面标志物,多向诱导实验检测细胞多向分化潜能;模拟体外低氧微环境,将细胞分为常氧组(20%O2)和低氧组(2%O2),分别对两组细胞行Transwell小室试验检测低氧对细胞迁移的影响,采用CCK-8法检测低氧对细胞增殖的影响。通过实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和Western blot分别从基因和蛋白水平检测h DFCs多能性相关标志物于不同氧体积分数下的表达;分别对两组细胞进行成骨诱导,q RT-PCR检测成骨相关基因,茜素红染色评估矿化结节的形成。结果 h DFCs具有较强的干细胞特征,具有成骨、成脂及成神经多向分化能力,符合间充质干细胞基本标准,能够满足牙组织工程构建对种子细胞的需求。低氧有利于h DFCs多能性的保持,同时促进了h DFCs的迁移和增殖。h DFCs于低氧中进行诱导时,其成骨分化能力得到增强。结论低氧微环境对维持h DFCs多能性,促进h DFCs增殖、迁移和分化有重要作用。

关键词： 细胞生物学   基底拓扑结构   细胞铺展   细胞迁移   细胞增殖   细胞分化  

摘要： 基底拓扑结构是调控细胞生物学行为的重要因素之一。越来越多的研究表明人工构建的基底拓扑结构对工程化控制体外细胞培养的微环境、探究细胞与基底相互作用机理及医学植入物表面处理具有重要意义,然而,尽管关于该主题已发表了大量论文,但是由于细胞类型、基底材料、几何形状和测量参数等的差异,很难建立基底拓扑结构对细胞行为影响的显著趋势。本文梳理了基底拓扑结构的常用制造工艺,分析了不同基底拓扑结构对不同细胞的形态、迁移、增殖和分化的影响,讨论了可能存在的分子响应机理,以期对细胞力学的学术研究提供新的视角和基础资料。

关键词： 生物物理学   生物化学   征稿简则   分子生物学   细胞生物学   蛋白质组学   系统生物学   栏目设置  

摘要： （2016年12月修订）1征稿范围与栏目设置 1.1征稿范围 本刊为国内外公开发行的全国性学术期刊,月刊,每月20日发行.征稿的学科范围是生物化学、分子生物学、生物物理学、细胞生物学、神经科学、免疫学,以及基因组学、蛋白质组学、系统生物学等相关学科领域.

关键词： 荧光显微镜   激光共聚焦显微镜   细胞增殖   细胞骨架   细胞凋亡  

摘要： 医学细胞生物学是医学院校本科生的重要基础学科之一,其实验课程教学工作的改革与创新具有重要意义。本文深入分析了医学细胞生物学实验课程现状,认为课程普遍存在目的不明确、内容不新颖、缺乏整体性、临床联系少等问题。荧光显微成像技术是细胞生物学研究中的关键技术,利用这一技术设计具有整体性的科研实验对于培养医学生操作能力和科研素养具有重要意义。顺铂(cisplatin)为当前肿瘤联合化疗中最常用的药物之一,由于其抗癌机制涉及细胞增殖、细胞凋亡、细胞骨架等一系列细胞生物学知识,且与临床联系紧密,非常适合用于综合性实验设计。实验方案拟使用BrdU染色、Hoechst33258染色及鬼笔环肽染色法,分别检测人肺癌细胞系A549顺铂处理后细胞增殖、细胞凋亡及细胞骨架重排情况。实验完成后,鼓励学生通过查阅文献得出综合的实验结论。希望能够通过科研与教学相融合的方式,更好的激发医学生的学习热情,提高医学生的科研素质,培养全方位的医学人才。

关键词： 酵母   模式生物   无细胞体系   遗传学   细胞生物学   诺贝尔奖  

摘要： 酵母是一种单细胞真核生物,基于自身诸多优势而成为生物化学、遗传学和细胞生物学的重要研究模型。借助酵母无细胞体系阐明了酶的功能、酶的构成、辅酶特性、tRNA结构和真核转录机制等。酵母作为模式生物在细胞周期、囊泡运输、细胞自噬、端粒保护、蛋白质折叠、未折叠蛋白应答、DNA损伤应答、雷帕霉素靶点和组蛋白调节等重大发现中做出了根本性贡献。许多科学家也因此荣获诺贝尔奖。本文全面介绍酵母在科研中的应用价值。

关键词： 人骨髓间充质干细胞   达沙替尼   细胞增殖   细胞迁移   细胞凋亡   细胞周期   蛋白激酶B  

摘要： 目的:在体外探索达沙替尼对人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)的活力、迁移、细胞周期和凋亡的影响以及潜在的信号通路,以评估达沙替尼在临床应用中对骨髓造血微环境的影响。方法:CCK-8法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;同时采用吖啶橙/溴化乙啶法检测细胞凋亡;酶联免疫吸附实验检测细胞转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌情况;Western blot检测蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达和磷酸化以及cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:与对照组相比,达沙替尼(1~10nmol/L)抑制hBMSCs的活力和迁移;在随后的实验中使用的浓度为7 nmol/L。达沙替尼促进细胞凋亡,并使更多细胞的周期阻滞在G_1期。此外,hBMSCs TGF-β1和TNF-α的分泌量显著增加。7 nmol/L达沙替尼组cleaved caspase-3的蛋白水平增加,胞内Akt的蛋白量下调且其磷酸化受到抑制。结论:达沙替尼以浓度依赖性的方式抑制hBMSCs的活力和迁移,并促进TGF-β1和TNF-α的分泌,诱导细胞G_1期阻滞和凋亡;达沙替尼可能通过影响胞内Akt蛋白的表达和磷酸化调控上述细胞学行为。

关键词： 新城疫病毒   天然免疫   La   Sota  

摘要： 为探讨两株不同生物学特性的新城疫病毒La Sota毒株(La Sota参考毒株AV1615;La Sota突变株P2M1)引起的宿主天然免疫反应的差异,将两个毒株分别感染鸡胚成纤维细胞(DF-1),Real-time PCR及Western blot检测TLR3、TLR7、MDA5等受体的mRNA及蛋白表达;ELISA及免疫荧光检测细胞核转录因子IRF3的含量及其磷酸化水平;蛋白芯片检测40种细胞因子的分泌水平,并用ELISA验证部分与炎症、抗病毒等相关的细胞因子在细胞上清中的含量差异。结果显示,La Sota参考毒株AV1615感染细胞后,诱导产生的TLR3、TLR7、MDA5的mRNA及蛋白含量显著高于La Sota突变株P2M1(P<0.05)。La Sota感染细胞后12 h,IRF3及其磷酸化水平、细胞上清中大部分细胞因子(31/40)的表达高于P2M1感染组。结果说明,两株La Sota毒株在诱导DF-1细胞的天然免疫反应方面存在差异,这可能是La Sota P2M1在鸡胚中更容易增殖的原因。