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关键词： 激素自养型细胞系   楤木   抗氧化酶活性   内源植物激素  

摘要： 以前期研究获得的楤木激素自养型细胞系为研究材料,利用分光光度和高压液相色谱(HPLC)法分析了该细胞系,即生长量,3种抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD、过氧化氢酶CAT)活性,细胞壁(醇不容提取物)质量分数,细胞壁中纤维素、半纤维和总果胶的质量分数,以及3种植物内源激素(植物生长素IAA、赤霉素GA3、脱落酸ABA)的生物化特性。结果显示:激素自养型细胞系高速生长,在培养的第30天达到最大生长量,鲜质量和干质量分别是非激素自养型细胞系的2.64、2.22倍。在0~30 d,激素自养型细胞系中3种抗氧化酶活性都显著高于非激素自养型细胞系。激素自养型细胞系中的细胞壁质量分数(8.94 mg·g^(-1))明显低于培养苗中的(13.15 mg·g^(-1)),高于非激素自养型细胞系的;细胞壁中总果胶的质量分数显著低于非激素自养型细胞系和组培苗的;纤维素质量分数与非激素自养型细胞系的差异不显著;半纤维素质量分数显著高于非激素自养型细胞系的。非激素自养型细胞系中GA3质量分数是激素自养型细胞系的2.6倍,两种细胞系中ABA质量分数差异不显著,激素自养型细胞系中IAA质量分数与非激素自养型细胞系中的无显著差异。

关键词： 子宫内膜肿瘤   生长抑素   细胞增殖   肿瘤侵润  

摘要： 目的探讨生长抑素(SST)基因在子宫内膜样腺癌组织及子宫内膜癌细胞系中的表达水平,以及过表达该基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及侵袭能力的影响。方法选取正常子宫内膜、子宫内膜样腺癌及子宫内膜浆液性癌组织切片,采用免疫组织化学方法检测SST在各组织切片中的表达。收集手术新鲜标本,病理诊断均为子宫内膜样腺癌,按2009年FIGO标准病理分级,其中高分化(G1)7例、中分化(G2)6例、低分化(G3)5例,提取RNA,采用实时荧光定量PCR方法检测SST的表达情况。选取Ishikawa、HEC-1A及KLE细胞系,采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测SST表达水平。以SST过表达慢病毒pLVX-SST(Ish-SST组)及空载慢病毒pLVX(Ish-ctr组)转染Ishikawa细胞,荧光显微镜下观察转染效率。Western blot检测两组Ishikawa细胞中SST蛋白表达水平。采用CCK-8及Transwell实验检测两组Ishikawa细胞的增殖及侵袭能力。结果免疫组织化学结果显示,与正常子宫内膜相比,SST在子宫内膜样腺癌及子宫内膜浆液性癌中的表达显著增加。KLE组SST的mRNA及蛋白水平较Ishikawa组及HEC-1A组高(P<0.05),HEC-1A组SST的mRNA及蛋白水平高于Ishikawa组(P<0.05)。在子宫内膜样腺癌中,与G1和G2相比,SST的表达在G3中显著增加(P<0.05)。在Ishikawa细胞传代2代后,Ish-SST组SST蛋白表达水平显著高于Ish-ctr组。SST过表达Ishikawa细胞增殖及侵袭能力与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SST在低分化子宫内膜样腺癌中呈高表达;SST过表达不能增加Ishikawa细胞的增殖及侵袭能力。

关键词： 骨髓间充质干细胞   C6脑胶质瘤细胞   恶性转化   生物学特性  

摘要： 该研究探讨了骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在C6脑胶质瘤细胞模拟的肿瘤微环境中恶性转化的规避方法,为BMSCs的安全应用提供参考依据。实验分为三组:BMSCs与C6脑胶质瘤细胞间接共培养未处理组、间接共培养+DMSO处理组和间接共培养+TPCA1(3-thiophenecarboxamide,2-[(aminocarbony 1)amino]-5-(4-fluoropheny 1)1)处理组。显微镜下观察各组细胞的形态变化;Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;Real-time PCR检测各组细胞STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)、NF-κB(nuclear factor-κB)/p56和C-myc m RNA水平;Western blot和免疫荧光检测各组细胞P-STAT3、NF-κB/p56和C-myc蛋白质水平。结果表明,实验组中间接共培养+TPCA1处理组细胞的规整性明显比间接共培养未处理组好;间接共培养+TPCA1处理组细胞迁移和侵袭能力明显低于未处理组;间接共培养+TPCA1处理组细胞STAT3、NF-κB/p56和C-myc m RNA和蛋白质水平明显低于未处理组(P<0.05)。该研究结果表明,TPCA1能改变处于C6脑胶质瘤细胞模拟的瘤肿瘤微环境中的BMSCs的生物学特性。

关键词： 肝癌   SK-Hep1   人肝脏DnaJ-like蛋白   生物学行为  

摘要： 目的:研究人肝脏DnaJ-like蛋白(human liver Dna J-like protein,HLJ1)在肝癌细胞中的表达,探讨HLJ1对肝癌细胞SK-Hep1生物学行为的影响。方法:首先,qRT-PCR和Western blot检测HLJ1在肝癌细胞中的表达情况。其次,过表达或干扰HLJ1后转染SK-Hep1细胞株,MTS和克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞早期凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力的变化。结果:qRT-PCR和Western blot结果显示HLJ1的mRNA水平和蛋白水平在3种肝癌细胞系中均呈低表达。MTS和克隆形成结果显示HLJ1能抑制肝癌细胞的增殖。流式细胞术结果显示HLJ1能促进细胞早期凋亡。划痕和Transwell实验显示,HLJ1能抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。结论:HLJ1在肝癌细胞系中低表达,且能抑制SK-Hep1细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

关键词： 深低温冷冻   肌腱干细胞   肌腱缺损   同种异体肌腱移植   成肌腱分化  

摘要： 目的探讨深低温冷冻处理对大鼠髌腱组织中肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的成活、细胞活力、早期凋亡、迁移能力及肌腱相关基因表达的影响。方法取12只4月龄雄性SD大鼠双侧髌腱组织,其中6只大鼠12条髌腱组织(实验组)进行深低温冷冻处理;剩余髌腱组织(对照组)不作处理,作为正常对照。取两组髌腱组织用0.3%Ⅰ型胶原酶消化获得有核细胞,分别用锥虫蓝染色检测有核细胞成活率、结晶紫染色检测有核细胞克隆形成能力;取两组髌腱组织分离培养TDSCs,并传至第3代,采用Alamar Blue法检测细胞体外增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡率;Transwell法检测细胞迁移能力;实时荧光定量PCR检测细胞肌腱相关基因Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col1α1)、scleraxis(Scx)和tenomodulin(Tnmd)m RNA表达。结果与对照组(91.00%±3.63%)比较,实验组原代有核细胞成活率为61.65%±4.76%,差异有统计学意义(t=12.010,P=0.000)。两组有核细胞接种后,均呈克隆样生长;培养12 d,实验组每1 000个有核细胞克隆集落形成数为(8.41±0.33)个,较对照组(15.19±0.47)个显著减少(t=28.910,P=0.000)。实验组TDSCs占活性有核细胞比例为1.37%±0.09%,较对照组1.67%±0.10%显著减少(t=5.508,P=0.003)。第3代TDSCs培养14 d内两组细胞生长趋势一致;两组各时间点吸光度(A)值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组及对照组TDSCs早期凋亡率分别为1.67%±0.06%、1.63%±0.06%,比较差异无统计学意义(t=0.707,P=0.519)。镜下见,两组均有TDSCs黏附于Transwell小室下室,实验组细胞数为(445.00±9.70)个,对照组为(451.50±12.66)个,比较差异无统计学意义(t=0.998,P=0.342)。实验组Col1α1、Scx、Tnmd的m RNA相对表达量分别为3.498±0.065、0.062±0.002、(4.211±0.211)×10–5,对照组分别为3.499±0.113、0.062±0.001、(4.341±0.274)×10–5,比较差异均无统计学意义(t=0.013,P=0.991;t=0.042,P=0.969;t=0.653,P=0.549)。结论大鼠肌腱组织经深低温冷冻后其有核细胞成活率降低,但肌腱组织仍保留大量有活性TDSCs,且细胞增殖能力、早期凋亡率、体外迁移能力及成肌腱分化能力未见明显异常。

关键词： 细胞生物学   研究型课堂教学模式   教学效果   调查分析  

摘要： 采用问卷调查法,对采用研究型课堂教学模式的细胞生物学教学效果进行调查。结果显示,学生对研究型教学模式系统掌握课程内容和提高课堂积极性的满意度较高。

关键词： 胃癌细胞生长   西红柿   防治   细胞生物学   维生素C   胡萝卜素   抗氧化剂   自由基  

摘要： 西红柿中含有大量的维生素C、B族和胡萝卜素，还含有丰富的抗氧化剂，可以防止自由基对皮肤的破坏，具有非常好的美容抗皱效果。美国和意大利的科学家近期联合发表在《细胞生物学杂志》上的研究发现，西红柿的提取物还能阻止胃癌细胞生长并抑制其恶性特征，帮助预防、治疗胃癌。

关键词： Toll样受体5   间充质干细胞   白细胞介素   生物学特性  

摘要： 目的探讨Toll样受体5(TLR5)对间充质干细胞(MSC)生物学特性的影响,以期探究TLR5在MSC与肿瘤关系中的作用。方法构建过表达TLR5的慢病毒载体并用相关病毒感染MSC,通过荧光表达量、RT-q PCR和Western印迹验证TLR5在MSC中的过表达情况,通过MSC-TLR5增殖、表面抗原和细胞分化来验证TLR5过表达对MSC生物学性状影响,通过检测CBLB502激活TLR5后白细胞介素6(IL-6)和IL-8的表达水平验证TLR5生物学功能。结果 TLR5慢病毒感染MSC后,mRNA水平和蛋白水平检测TLR5表达量均显著升高,MSC-TLR5增殖、免疫表型和分化能力未发生改变,同时,CBLB502激活TLR5后,IL-6和IL-8表达量显著升高(P<0.001)。结论携带TLR5的慢病毒感染MSC后不影响MSC生物学功能,TLR5具有功能活性且可激活下游信号通路发挥免疫调节作用。

关键词： 厦门国际会展中心   细胞生物学   消息   科学技术协会   承办单位   发育生物学   会议名称   厦门大学  

摘要： 会议名称（中文）：中国细胞生物学学会2017全国学术大会所属学科：细胞生物学，遗传与发育生物学开始日期：2017—09—26结束日期：2017—09—29所在城市：福建省厦门市具体地点：厦门国际会展中心主办单位：中国细胞生物学学会协办单位：福建省科学技术协会承办单位：厦门大学、上海博生会展有限公司会议主席：陈晔光.

关键词： 脂肪组织   间充质干细胞   分离   生物学特性  

摘要： 目的从人眼袋脂肪组织中分离获取脂肪来源间充质干细胞(MSCs),观察比较其生物学特性。方法以眼睑美容术中废弃的眼袋脂肪组织为材料,皮下脂肪组织为对照,胶原酶消化法分离脂肪组织来源的MSCs,常规方法加以培养。倒置显微镜观察MSCs的形态特征,采用MTT法绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪分析细胞表面分子标志物,同时进行成骨、成脂诱导和细胞衰老特性的观察。结果从人眼袋脂肪中分离获取了与皮下脂肪来源相同形态和生长特征的MSCs,人眼袋脂肪来源的MSCs表达CD105、CD166,不表达CD34、CD54,油红O染色和茜素红染色证实其可进行成骨、成脂诱导,第5代开始出现细胞衰老的表现。结论可从眼睑美容术中废弃的眼袋脂肪中有效分离获取脂肪来源MSCs,具有较好的生物学特性。