教学课程资源库 更多>>

关键词： 中国生物化学与分子生物学会   蛋白质   学术讨论会   跨学科   生物医学工程学   生物物理学   细胞生物学   中国科学院  

摘要： 所属学科：生物物理学、生物化学及分子生物学,细胞生物学。

关键词： 细胞生物学   传统教学模式   研究性教学  

摘要： 细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,它是当前生命科学领域中最活跃、最富有发展前景的学科之一。本研究中,笔者通过实施研究性教学,激发了学生学习细胞生物学的好奇心和浓厚兴趣,培养了学生的独立思考能力和实践能力,加深了学生对细胞生物学知识的深入理解和学以致用,同时引导学生了解了细胞生物学发展的前沿和热点,拓宽了学生的学术视野。

关键词： 多发性骨髓瘤   细胞增殖   细胞运动   抗药性,肿瘤  

摘要： 目的 探讨miRNA-181a（miR-181a）在多发性骨髓瘤（MM）患者中的表达情况及其对MM细胞生物学特性的影响.方法 应用免疫磁珠筛选的方法分离并纯化25例初治、复发难治MM患者及10例非恶性血液病患者骨髓CD138＋细胞,应用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-181a表达情况.同时检测RPMI 8226、H929及U266三种MM细胞株中miR-181a的表达.应用miR-181a抑制剂及激动剂观察下调和上调miR-181a表达对MM细胞生物学特性的影响,并对miR-181a进行靶基因预测.结果 与非恶性血液病患者相比,MM患者CD138＋细胞中miR-181a表达上调.对MM细胞株的观察发现,与非恶性血液病患者骨髓CD138＋细胞相比,RPMI 8226及U266细胞株miR-181a高表达,而H929细胞株则低表达.相比对照组,应用100 nmol/L miR-181a抑制剂下调miR-181a后,U266细胞的增殖活力在24、48及72 h分别为（50.5±4.1）%、（52.3±2.2）%和（69.5±4.3）%,低于对照组的（67.1±3.3）%、（71.5±3.6）%和（78.1±5.4）%（均P〈0.05）,提示细胞增殖受抑.而应用100 nmol/L miR-181a激动剂上调miR-181a后,H929细胞在24、48 h时的增殖活力分别为（38.5±3.6）%和（82.2±6.9）%,高于对照组的（21.2±2.4）%和（61.3±5.4）%（均P〈0.01）,提示细胞增殖增强.细胞周期分析提示,miR-181a抑制剂使U266细胞周期阻滞在G0/G1期.细胞药敏实验结果显示,多柔比星、紫杉醇及5-氟尿嘧啶作用后,与药物单独处理的细胞相比,miR-181a抑制剂下调U266细胞miR-181a表达的细胞增殖活力下降.在48 h和72 h的吸光度（A）值显著低于对照组.细胞迁移实验显示,miR-181a抑制剂下调miR-181a能抑制U266细胞的迁移能力,实验组细胞的迁移比例为（62±10）%,低于对照组的（89±12）%（P〈0.05）,而miR-181a激动剂则能提高H929细胞的迁移能力,实验组细胞的迁移比例[（242±9）%]高于对照组的（98±8）%（P〈0.01）.结论 MM细胞高表达***-181a的高表达可能会促进MM细胞的增殖、转移及耐药,可能与MM患者预后有关,是MM预后评估一个重要的候选生物标志物.对miR-181a靶基因进行进一步预测,同时应用基因缄默的策略可能会改善MM患者的预后.

关键词： 卵巢癌   小干扰RNA(siRNA)   代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)   PTEN/Akt信号通路  

摘要： 目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及可能的机制。方法采用靶向mGluR5表达的特异siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞(转染组),同时设置转染无义序列的阴性对照组。转染48 h,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测siRNA对mGluR5的沉默效果;采用CCK-8法、Ed U细胞荧光染色实验、Hoechst 33342细胞染色实验、划痕实验检测沉默mGluR5表达后SKOV3细胞的活性、增殖、凋亡和迁移情况;采用Western blotting检测PTEN/Akt信号通路相关蛋白的表达情况。结果 QPCR检测显示,转染组中mGluR5 mRNA的表达水平降至(18.3±2.3)%,显著低于阴性对照组(P<0.05)。CCK-8法检测显示,转染72 h阴性对照组的吸光值为4.1±0.2,高于转染组的2.4±0.3(P<0.05)。Ed U免疫荧光染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞增殖率为(22.4±2.3)%,高于转染组的(9.2±1.2)%(P<0.05)。Hoechst 33342细胞染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞凋亡率为(6.2±1.3)%,低于转染组的(28.2±2.2)%(P<0.05)。划痕实验显示,阴性对照组的相对划痕愈合比例为(100.0±2.1)%,显著高于转染组的(48.6±4.3)%(P<0.05)。Western blotting检测显示,转染组PTEN蛋白的表达增加,p-Akt蛋白的表达降低(P<0.05);而Akt蛋白无明显变化(P>0.05)。结论沉默mGluR5表达能显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进凋亡,降低细胞迁移能力,该过程可能与激活PTEN/Akt信号通路有关。

关键词： 乳腺肿瘤   成纤维细胞   细胞培养技术   肿瘤侵润   细胞运动  

摘要： 目的 探索乳腺癌中肿瘤相关成纤维细胞（CAF）稳定可行的原代分离、培养方法,探讨CAF的生物学特性.方法 取10例未进行任何放疗、化疗及内分泌治疗的手术切除乳腺癌组织及其癌灶外缘2 cm处的配对癌旁组织,采用组织块酶消化法分离培养CAF.流式细胞术检测细胞周期,细胞免疫化学法检测CAF生物学标志波形蛋白（Vimentin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以及细胞增殖指标Ki-67表达情况,Transwell小室侵袭、迁移实验检测CAF侵袭、迁移能力.结果 通过条件优化,成功分离培养CAF.细胞免疫化学结果提示,CAF高表达Vimentin、α-SMA以及Ki-67.流式细胞术结果显示,CAF较乳腺癌旁成纤维细胞S期细胞比例增加,提示CAF增殖能力强,分裂增殖活跃.CAF具有很强的侵袭、迁移能力[CAF组和乳腺癌旁成纤维细胞组侵袭细胞数分别为（79.7±3.5）、（66.3±1.5）个,迁移细胞数分别为（242.3±3.1）、（218.3±2.1）个,均P〈0.05].结论 优化组织块酶消化法并成功分离、培养***具有较强的分裂增殖能力和侵袭迁移能力.

关键词： 转录因子21   喉癌   增殖   凋亡  

摘要： 目的:探讨转录因子21(transcription factor 21,TCF21)对喉癌细胞株Hep-2生物学特性的影响及其相关的作用机制。方法:利用慢病毒转染技术外源性过表达喉癌Hep-2细胞中的TCF21,然后分别采用细胞增殖检测(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡能力的变化;Western印迹检测周期及凋亡相关蛋白的表达。结果:在Hep-2细胞中过表达TCF21后,细胞的增殖能力显著降低,周期进程缓慢,而细胞凋亡显著增加;Transwell细胞迁移实验显示过表达TCF21可抑制Hep-2细胞迁移。Western印迹实验结果显示过表达TCF21后,cyclin D1,CDK4,CDK6,p-R b及b c l-2的蛋白表达水平显著下降;P 2 1和Ba x及c l eaved-c a s pa s e-3的蛋白表达水平显著升高。结论:人喉癌细胞株Hep-2中,过表达TCF21可通过调控周期及凋亡相关因子的表达,发挥增殖抑制及凋亡促进作用,提示TCF21可作为诊断和靶向治疗喉癌的潜在作用位点。

关键词： 骨髓间充质干细胞   脊髓损伤   生理盐水   磷酸盐缓冲液   C57BL/6小鼠  

摘要： 目的探讨0.9%生理盐水(Saline)、0.01M磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)存活、增殖等生物学特性以及对修复脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型大鼠损伤效能的影响。方法体外,分离培养C57BL/6小鼠BMSCs,进行生理盐水、PBS及增殖培养基(PCM)处理不同时间,通过台盼蓝染色法检测各组细胞的活力,通过Brd U法检查各组细胞增殖情况。体内,通过LFB染色法检测各移植组SCI大鼠脊髓组织髓鞘再生情况;通过BBB运动功能评分检测大鼠运动功能恢复情况。结果存储液处理的BMSCs呈现出时间依赖的存活与增殖能力下降,PBS-BMSCs组存活率下降程度小于Saline-BMSCs组。移植组大鼠运动功能和损伤脊髓横断面髓鞘化程度显著恢复,并且PBS-BMSCs治疗组优于Saline-BMSCs治疗组。结论存储液处理BMSCs对SCI有治疗作用。

关键词： 细胞生物学   教学经验   准备工作  

摘要： 实验前的准备工作是保证各项实验有条不紊进行,保质保量完成的基础。本文着重从仪器设备检查、实验器械准备、试剂配制、预实验的开展等方面阐述了教学实验准备工作,期望提高《细胞生物学》实验课教学质量,保证《细胞生物学》实验教学的顺利开展。

关键词： 高校   细胞生物学   第二课堂   实施   体会  

摘要： 第二课堂是与第一课堂相关的学生自主、自愿参加的活动,有组织的第二课堂活动是对学生进行素质教育和能力培养的一种重要方式,随着高校教学改革的深入,人们逐渐认识到第二课堂对人才培养具有不可替代的作用。该文以细胞生物学为例,介绍了第二课堂的实施过程和体会及第二课堂实施过程中应该注意的问题。

关键词： mtDNA缺失   肿瘤   凋亡   多药耐药   ρ0细胞  

摘要： 多种肿瘤细胞的线粒体DNA缺失细胞（ρ0细胞）被培养出来且被发现具有与亲代肿瘤细胞不同的生物学表现,提示线粒体DNA（Mitochondrial DNA,mtDNA）缺失可对肿瘤产生影响。然而mtDNA缺失对肿瘤发生发展的具体影响方面及其作用机制还需要进一步深入探讨。ρ0细胞是一类线粒体内DNA缺失,无线粒体功能的细胞系;