教学课程资源库 更多>>

关键词： 形成性评价   细胞生物学   教学效果   留学生  

摘要： 目的:探讨形成性评价在医学留学生细胞生物学教学中的应用效果。方法:以潍坊医学院2014级留学生为研究对象,设形成性评价为改革组,传统的终结性评价为对照组,通过分析期末考试成绩及调查问卷问题,对比两组的教学效果。结果:改革组平均成绩较高。调查问卷结果发现,形成性评价能够调动学生的积极性、提高学生的学习效率、提高分析问题解决问题的能力。结论:形成性评价能够有效提高课程教学效果,更加适合留学生教学。

关键词： 鼻粘膜   间质干细胞移植   脊髓损伤   组织工程  

摘要： 背景:干细胞应用于脊髓损伤的报道很多,但是这些细胞存在免疫排斥、取材困难、纯化不易等各方面的缺陷,而鼻黏膜间充质干细胞无上述缺点,将其应用于临床脊髓损伤患者疗效分析目前尚无相关报道。目的:观察人鼻黏膜间充质干细胞的生物学特性,同时进行自体鼻黏膜间充质干细胞移植治疗晚期不完全性脊髓损伤的临床疗效观察与评价。方法:①取材、培养鼻中隔偏曲手术患者的鼻黏膜间充质干细胞,扫描及透射电子显微镜观察细胞的超微结构,并在体外对其进行多向诱导分化;②经医学伦理委员会同意后,取材培养脊髓损伤患者的鼻黏膜,通过腰椎穿刺术注射到8例晚期不完全性脊髓损伤患者椎管内,细胞移植1-3次,前后移植间隔时间为5-7 d,每次移植细胞总数约为5×107个。细胞移植治疗前及随访6个月时按照国际截瘫医学会ASIA评分标准进行评分。结果与结论:①鼻黏膜间充质干细胞在光镜下形态以梭形为主,并呈现出放射状排列,细胞免疫荧光表达STRO-1;②流式细胞学检测显示高表达间充质干细胞表面标记物CD73、CD90、CD105,不表达造血干细胞标记物CD34、CD45,且细胞纯度达97%以上;③鼻黏膜间充质干细胞在扫描及透射电子显微镜下可见短粗的微绒毛及不同的细胞生长形态;④鼻黏膜间充质干细胞还具有向骨组织、脂肪组织、干细胞球及神经元分化的潜能;⑤经自体血清培养的鼻黏膜间充质干细胞移植后,除1例患者住院期间无明显神经功能改善外,其余患者均有不同程度的神经功能恢复且无任何不良副反应;⑥结果表明,鼻黏膜间充质干细胞是组织工程细胞修复中一种新型的种子细胞来源;自体鼻黏膜间充质干细胞移植治疗脊髓损伤患者能达到一定的治疗效果,具有临床应用价值。

关键词： KLF4   CRISPR/Cas9   胃癌   GES-1  

摘要： 目的采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建靶向KLF4的基因编辑质粒,建立CRISPR/Cas9-sg KLF4人正常胃黏膜GES-1细胞株,观察KLF4基因敲除效果及其对细胞生物学行为的影响。方法设计靶向KLF4基因的sgRNA序列,将合成的片段插入到CRISPR/Cas9质粒骨架载体p X459中,再将重组后的质粒做转化,挑取克隆,扩增后提质粒进行测序验证正确性。将构建好的重组质粒体外转染入人胃黏膜细胞GES-1中,利用嘌呤霉素进行筛选获得KLF4敲除的克隆细胞,应用Western blot技术检测未转染细胞和克隆细胞中KLF4蛋白的表达情况,平板克隆实验检测KLF4敲低后克隆形成能力,MTT实验检测其增殖能力,Transwell实验检测其迁移能力。结果经测序验证,成功构建了靶向KLF4的重组质粒p X459-KLF4-sgRNA,经Western blot方法验证,转染该重组质粒后人胃黏膜上皮细胞株GES-1的KLF4蛋白表达量明显降低,行为学实验结果表明,GES-1细胞敲低KLF4基因后克隆形成能力、增殖能力以及迁移能力都明显增强。结论成功构建了靶向KLF4的CRISPR/Cas9基因编辑质粒载体及KLF4基因敲低的稳定细胞株GES-1,KLF4基因敲低后GES-1细胞生物学行为的改变证实其抑癌基因活性。

关键词： ZNF300基因   巨核细胞分化   细胞生物学  

摘要： 目的:研究ZNF300对巨核细胞分化和增殖的影响。方法:通过公共数据分析及定量RT-PCR方法检测ZNF300表达水平以研究ZNF300与白血病及巨核细胞分化的相关性;使用慢病毒和逆转录病毒感染介导过表达ZNF300,使用流式细胞术、MTT比色法、集落形成试验分析K562细胞和原代小鼠骨髓细胞向巨核细胞分化、增殖的情况;应用细胞浆和细胞质蛋白分离结合蛋白印迹实验方法检测ZNF300亚细胞定位;并应用双荧光素酶试验和用ChIP-qPCR技术探讨ZNF300调控的靶基因。结果:ZNF300表达水平伴随巨核细胞的分化而升高;TPA诱导后巨核细胞分化的表面标记CD41、CD61在过表达ZNF300的K562细胞明显比对照细胞增多。同时,ZNF300显著降低K562细胞增殖率、阻滞G1ME细胞周期并降低小鼠骨髓细胞集落形成单位。ZNF300蛋白主要位于细胞核内,能够结合在C-MYC基因的启动子区并增强启动子活性。结论:过表达ZNF300可促进巨核细胞分化。

关键词： 尿液来源干细胞   间充质干细胞   种子细胞  

摘要： 目的从人类尿液中直接分离能够体外大量扩增且具有多向分化潜能的干细胞,并研究其生物学特性。方法收集志愿者尿液100~200ml,经离心后使用完全培养基重悬,接种于培养板中;克隆贴壁生长后换液。大量扩增后通过流式细胞术检测其表面标志物,使用成骨、成软骨诱导培养基对其进行诱导分化,通过茜素红染色、阿利新蓝染色检测诱导分化结果。结果每100ml尿液经14d培养能够直接分离得到3~10个克隆,传代培养至第5代时可扩增至2~10×10~7个尿液来源干细胞,能够满足细胞治疗需要。尿液来源干细胞表面标志物CD29,CD44,CD73,CD90为阳性,CD34,CD45,HLA-DR为阴性,与间充质干细胞一致。经诱导培养后,尿液干细胞能够能够成骨、成软骨分化。结论尿液来源干细胞具有间充质干细胞特性,可以作为细胞治疗、组织工程中的种子细胞。

关键词： 胃癌   基因转染   流式细胞术   癌胚抗原黏附分子1  

摘要： 目的:探讨癌胚抗原黏附分子1对胃癌细胞株AGS生物学特性的影响。方法:将CEACAM1 si RNA转染人胃癌细胞株AGS,再用western-blot检测CEACAM1的表达;流式细胞术、Transwell实验和裸鼠负荷瘤实验分析转染后的AGS细胞的生物学特性变化。结果:转染CEACAM1 si RNA后的AGS细胞几乎不表达CEACAM1。CEACAM1沉默基因对AGS细胞增殖、凋亡和细胞周期无影响。转染CEACAM1 si RNA后的AGS细胞侵袭能力明显降低,荷瘤裸小鼠肿瘤的生长受到抑制。结论:沉默CEACAM1基因的表达能够明显抑制AGS细胞的转移以及活体成瘤性,为胃癌的基因治疗提供理论依据。

关键词： 绵羊   肌源性干细胞   分离培养   诱导分化   细胞周期  

摘要： 为研究绵羊胚胎肌源性干细胞的生物学特性,取30日龄的绵羊胚胎,采用联合酶消化法及差速贴壁法分离培养获得均质的肌源性干细胞,并对其进行一系列生物学特性检测。结果显示,绵羊肌源性干细胞能传代培养至35代以上;免疫荧光染色和RT-PCR鉴定肌源性干细胞表面标记物Sca-1、CD34、CD144和Desmin呈阳性表达;生长曲线和细胞周期结果显示绵羊肌源性干细胞具有较强自我更新能力;通过不同的诱导方法可以将肌源性干细胞成功地诱导为肝样细胞和胰岛样细胞,Schiff染色和双硫腙染色均呈阳性,RT-PCR检测肝样细胞特异性标记物AFP和ALB以及胰岛样细胞特异性标记物Insulin均呈阳性表达,进一步证明了其诱导分化潜能。结果表明,本试验成功地分离培养获得了均质并具有较强自我更新潜能的绵羊肌源性干细胞,这种干细胞具有向肝样细胞和胰岛样细胞分化的潜能,这为临床治疗提供了潜在的理论基础和大量的种子细胞。

关键词： 细胞生物学   中国   学会   学术   国际会展中心   国家重点实验室   厦门大学   生命科学学院  

摘要： 为促进我国细胞生物学领域研究人员的交流与合作,推动中国细胞生物学学科的发展,由中国细胞生物学学会主办,厦门大学生命科学学院、厦门市科学技术协会、上海博生会展有限公司共同承办、厦门市海沧区人民政府、细胞应激生物学国家重点实验室（厦门大学）、细胞信号网络协同创新中心共同协办的盛会-“中国细胞生物学学会2017年全国学术大会·厦门”于2017年9月26-29日在厦门国际会展中心举行,会议主题为：探索细胞,创新未来.

关键词： 直肠癌   细胞增殖   凋亡   侵袭   塞来昔布  

摘要： 目的探讨塞来昔布对人直肠癌LoVo细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响。方法通过CCK-8法检测细胞的增殖情况,利用流式细胞术检测细胞周期的变化,利用TUNEL染色法检测各组细胞的凋亡情况,通过划痕愈合实验法检测细胞的迁移能力。结果 CCK-8法检测结果显示,干预组直肠癌LoVo细胞增殖被抑制,细胞凋亡率增加（P〈0.05）;流式细胞术检测结果显示干预组细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;划痕愈合实验法检测结果显示,与对照组相比较,干预组直肠癌LoVo细胞的迁徙力降低。结论塞来昔布在直肠癌中起着抑制肿瘤增殖、促进凋亡等的重要作用,可能成为预防和治疗直肠癌的新方法。

关键词： 启发式教学   主动学习   实验教学   细胞转染  

摘要： 在细胞生物学课程的教学中,实验教学是极其重要的组成部分。该文主要阐述了将传统实验教学模式改为启发式的、学生拥有自主权的教学模式的优点和方法,以及笔者教学尝试的结果,目标是通过启发式实验教学培养和提高学生发现并解决问题的能力。该文以细胞转染实验为例,具体说明了如何将被动教学模式转变为促进学生主动学习模式的设计过程。在讨论传统实验教学模式弊端的基础上,该文作者探索并实践了适应创新人才培养需求的新型实验教学模式。