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关键词： 肿瘤干细胞   多发性骨髓瘤   多药耐药相关蛋白质类   组织工程  

摘要： 背景:研究表明,肿瘤干细胞是导致肿瘤难以根治,化疗失败和疾病复发的基础和主要原因。因此,针对肿瘤干细胞耐药性的研究成为干细胞领域的研究热点。目的:研究多发性骨髓瘤U266细胞株中侧群细胞的生物学特性及其与耐药性的关系。方法:利用流式细胞仪检测U266细胞株中侧群细胞比例,并采用流式细胞分选方法分离侧群细胞和非侧群细胞,进一步比较2个细胞亚群的细胞周期、耐药蛋白、甲基纤维素克隆生长情况;使用RT-PCR方法检测2个细胞亚群ABCG2、MDR1基因的表达。结果与结论:①U266细胞株中侧群细胞比例为(2.46±0.35)%,绝大多数细胞都处于G_0期,G_0/G_1比例分别达(81.50±5.42)%,高于非侧群细胞(39.85±3.21)%,差异有显著性意义(P<0.05);②侧群细胞中耐药蛋白P-gp,ABCG2阳性表达率高于非侧群细胞,差异有显著性意义(P<0.05);③侧群细胞的体外克隆形成能力较强,集落形成率高于非侧群细胞,差异有显著性意义(P<0.05);④侧群细胞中ABCG2、MDR1基因的表达明显高于非侧群细胞(P<0.05);⑤结果表明,U266细胞株中存在肿瘤干细胞样侧群细胞亚群,绝大多数侧群细胞处于G_0期,其ABCG2、MDR1基因表达明显增强,在骨髓瘤干细胞的耐药性机制形成中发挥重要作用。

关键词： 双氢青蒿素   犬   乳腺肿瘤   侵袭性  

摘要： 犬乳腺肿瘤是犬类的一种常见肿瘤性疾病,目前治疗多为手术结合放、化疗法,但结果多易转移复发。双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)是中药提取物,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。为探求双氢青蒿素是否影响犬乳腺肿瘤细胞的侵袭及其影响机制,本试验取对数增长期状态相同的犬乳腺肿瘤细胞CHMm,使用低(5μM)、中(10μM)、高(20μM)浓度DHA处理并分别培养24,48,72h。收集各组细胞,使用CCK-8法检测细胞活性;利用细胞划痕试验检测细胞迁移性;利用transwell检测细胞侵袭性;利用CCK-8检测细胞毒性。结果表明:DHA对CHMm细胞抑制率呈明显药物浓度依赖性。细胞划痕试验检测细胞迁移速率结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,低、中、高试验组对CHMm细胞迁移性抑制作用效果极显著(p<0.01)。各组组间比较,DHA对细胞迁移性抑制影响差异极显著(p<0.01)。DHA对CHMm细胞迁移性抑制呈明显的药物时间、浓度依赖性。细胞侵袭试验检测细胞侵袭性结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,低、中、高试验组穿透基底膜着色细胞个数显著增多,说明DHA对CHMm细胞侵袭性抑制效果极显著(p<0.01),组间比较,不同DHA作用浓度效果差异显著(p<0.05)。相同DHA作用浓度,随着培养时间的增加,细胞侵袭性降低,效果显著(p<0.05)。细胞毒性结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,低、中、高试验组对CHMm细胞抑制性影响效果极显著(p<0.01)。各组组间比较,DHA对细胞抑制性影响差异极显著(p<0.01)。综上所述,DHA对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭作用具有显著抑制作用,且随着DHA作用浓度增加和时间增长,抑制作用增强,呈浓度时间依赖性。

关键词： 宫颈癌   成纤维生长因子受体4   siRNA   Hela细胞   顺铂  

摘要： 目的:探讨沉默成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)对宫颈癌Hela细胞生长、转移以及顺铂(DDP)化疗敏感性产生的影响。方法:培养宫颈癌Hela细胞系并分为5组:空白对照组、阴性对照组、FGFR4-siRNA组、DDP组和FGFR4-siRNA+DDP组,设计合成靶向FGFR4的siRNA转染FGFR4-siRNA组和FGFR4-siRNA+DDP组细胞,而后对DDP组和FGFR4-siRNA+DDP组加入化疗药物DDP(10ug/mL)。分别于培养24h、48h和72h后MTT法检测各组细胞生长抑制率,流式细胞仪检测凋亡率;PCR检测FGFR4以及肿瘤细胞生长、转移相关基因VEGF和MMP2的mRNA水平,Western blot检测其蛋白表达水平。结果:沉默FGFR4基因后,与对照组相比,FGFR4-siRNA组细胞增殖活性下降,生长抑制率和细胞凋亡率上升,FGFR4几乎不表达,VEGF和MMP2表达水平下降;FGFR4-siRNA+DDP组细胞生长抑制率和凋亡率高于FGFR4-siRNA组和DDP组,FGFR4几乎不表达,VEGF和MMP2表达水平均低于FGFR4-siRNA组和DDP组。结论:沉默FGFR4基因的表达能够抑制宫颈癌细胞生长,促进细胞凋亡和提高对顺铂的化疗敏感性,下调VEGF和MMP2的表达抑制癌细胞的侵袭转移能力,可以作为宫颈癌新的靶向治疗目标之一。

关键词： 骨髓间充质干细胞   促炎因子   抑炎因子   肿瘤坏死因子α  

摘要： 目的:探讨不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,倒置显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测BMSCs表面标记物;分别以10、100、1000 ng/mL的TNF-α完全培养液预处理P3代BMSCs,并设置仅含培养基的空白对照组,24 h后采用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中IL-6、IL-10的表达水平;胰酶消化细胞,用Presto Blue法检测10、100、1000 ng/mL TNF-α完全培养液预处理BMSCs后细胞增殖活性。结果:ELISA检测结果显示,与对照组相比,各浓度TNF-α干预组IL-6、IL-10均有不同程度升高,差异有统计学意义(P<0.05),且1000 ng/mL TNF-α干预组IL-10表达水平最高,其浓度为170.2±11.9 pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);100 ng/mL TNF-α干预组IL-6表达水平最高,其浓度为144.0±18.6 pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Presto Blue检测结果显示,与对照组相比,10、100、1000 ng/mL TNF-α干预组荧光值均增高,差异有统计学意义(P<0.05),但组间荧光值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:10~1000 ng/mL TNF-α可促进BMSCs的增殖,且随着TNF-α浓度的升高,BMSCs分泌促炎因子IL-6的能力降低,分泌抑炎因子IL-10的能力升高。

关键词： 细胞生物学   多模块化   医学研究生   教学改革  

摘要： 《细胞生物学》作为一门专业基础课,是生命科学领域发展迅速的前沿学科,与各基础和临床学科的教育教学环节密切相关,在医学研究及临床应用方面发挥了重要作用。以解决本校医学研究生教学过程中"多专业、多类型、多层次、少课时"的问题为出发点,建立了包含基础知识、研究热点、临床案例和实验技能的多模块化《细胞生物学》教学内容和综合性成绩评价体系。通过问卷调查的方式,对此次教学改革在满意度、授课内容、考核方式等方面进行评价,以期进一步完善教学体系、提高教学效果。

关键词： 案例导向学习   细胞生物学   教学  

摘要： 为了更好地实现教学效果最大化,激发医学生对细胞生物学的兴趣与热情,培养既有专业扎实的知识基础,又有科研兴趣的研究实干型人才,在教学中必须进行教学模式的创新,发现以案例为基础的CBL教学模式更能适应临床医学教学,弥补了传统医学教学方法在现代医学高速发展情况下的不足,但是由于属于比较浅层次的实践和应用,CBL模式在医学细胞生物学教学中的应用还存在一些值得讨论的问题。

关键词： 华蟾素   子宫内膜癌   PTEN基因  

摘要： 目的研究华蟾素对体外培养的两株子宫内膜癌细胞(PTEN表达完整的HEC-1A细胞和PTEN缺失的Ishikawa细胞)生物学行为影响并探讨分子机制。方法以不同浓度华蟾素作用两株子宫内膜癌细胞,MTT和克隆形成法检测细胞增殖;流式细胞法检测细胞周期及凋亡率;Transwell法检测侵袭;RT-PCR和Western blot法检测胰岛素生长因子-1受体(IGF-1R)基因和蛋白表达。结果 PTEN基因缺失的Ishikawa细胞随华蟾素浓度升高,增殖和侵袭能力明显降低,凋亡率显著升高,G1期细胞比例明显增多,IGF-1R基因和蛋白表达显著下降,HEC-1A细胞对华蟾素作用不敏感。结论PTEN基因缺失可增强子宫内膜癌细胞对华蟾素的敏感性。

关键词： 片仔癀   舌鳞状细胞癌细胞   细胞增殖  

摘要： 目的探讨中药片仔癀对舌鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响及分子机制。方法将不同浓度的片仔癀作用于Tca8113细胞,应用MTT法检测Tca8113细胞的增殖情况,应用碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期的变化,应用Western blotting检测细胞中信号转导子与转录激活子3磷酸化蛋白(p-STAT3)、Bcl-2蛋白表达的变化。结果 MTT实验结果显示,片仔癀呈剂量依赖性抑制Tca8113细胞的增殖。PI染色结果显示,片仔癀使细胞周期在G0/G1期发生阻滞。Western blotting结果提示,片仔癀抑制STAT3蛋白的磷酸化,抑制Bcl-2蛋白表达。结论片仔癀对舌鳞状细胞癌细胞的增殖具有抑制作用。

关键词： 预实验   细胞生物学实验   教学改革   作用  

摘要： 预实验是正式实验开始之前的一次预演,是对正式实验可行性的一次检阅。它具有小规模和探索性的特点,对正式实验条件的建立和优化、仪器设备的合理配置、实验影响因素的排查、教学内容的完善都起着重要的作用。作者结合自己多年从事《细胞生物学》实验课的教学经历,对预实验在实验教学中的作用进行总结,诣在充分重视预实验对提高实验教学质量的重大意义。