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关键词： 细胞生物学   分层次教学   教学模式  

摘要： 根据学生对细胞生物学基础掌握情况和基础教育教学内容情况、学生求学就业目标情况及研究生层次对细胞生物学知识的需求,划分3个教学层次,建立相应的"分级教学班",采用分层次教材进行分类教学和考核,获得了行之有效的教学模式和良好的教学效果.

关键词： 细胞生物学   耐药   紫杉醇   Lin28B   let-7   Hep3B细胞株  

摘要： 为证明Lin28B/let-7通路与肝癌紫杉醇耐药密切相关和采用浓度梯度间歇刺激法建立Hep3B/PTX耐药细胞系。通过四甲基偶氮唑盐比色(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)分析Guava微流式分析对Hep3B/PTX耐药细胞系进行鉴定,realtime PCR检测耐药细胞中Lin28B及let-7表达水平。经过6个月的诱导,Hep3B/PTX耐药细胞系对紫杉醇的耐药指数为13.55;与亲本细胞相比,Hep3B/PTX处于G0/G1期的细胞比例较高,S期的细胞比例较低;0.2μmol/L紫杉醇处理亲本细胞24h后,有(41.73±1.80)%细胞发生凋亡,而Hep3B/PTX细胞凋亡率只有(17.21±3.60)%;real-time PCR发现,Hep3B/PTX与亲本细胞相比,Lin28B基因表达水平升高了49倍,而Lin28B调控的let-7家族成员表达水平均有不同程度的降低。Hep3B/PTX细胞中Lin28B基因和let-7家族成员表达量的变化揭示了肝癌细胞对紫杉醇的耐药与Lin28B/let-7通路相关,Lin28B基因可能通过影响let-7家族miRNA生物发生过程而改变肝癌细胞对紫杉醇的敏感性。

关键词： 干细胞   腹部   细胞,培养的   细胞结构   生物学标记   细胞因子类  

摘要： 目的体外分离、培养成人腹部来源脂肪干细胞(ASC),观察和分析其形态学特征、细胞表面标志物及细胞因子分泌情况。方法应用胶原酶消化法从接受整形植皮手术的成人患者腹部脂肪组织中分离获取ASC,进行原代及传代培养,观察细胞形态,绘制生长曲线,评估细胞增殖能力。扫描电子显微镜观察ASC超微结构形态。流式细胞仪检测第4代ASC表面标志物CD29、CD34、CD49d、CD105、CD106表达情况。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养1、3、6、24、72 h ASC培养上清液中转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)、基质细胞衍生因子1(SDF1)、白细胞介素8(IL-8)浓度。数据行单因素方差分析检验。结果成功体外分离、培养ASC,呈扁平的梭形成纤维样细胞生长,且细胞形态均一,生长曲线呈S型,传代稳定。扫描电子显微镜下可见ASC呈长梭型,细胞表面可见丰富微绒毛。ASC表面CD29、CD49d、CD105呈阳性表达,表达率分别为99.6%、44.5%和99.5%,CD34和CD106呈阴性表达,表达率分别为0.6%和0.7%。ASC可分泌TGF-β1、VEGF、bFGF、HGF、SDF1、IL-8,传代培养1 h上清液中对应的细胞因子浓度分别为(56.51±3.61)、(129.54±4.08)、(39.02±2.64)、(73.46±11.75)、(396.03±21.31)、(149.37±5.48)pg/mL;且对应细胞因子浓度均随培养时间延长逐渐增多,差异均有统计学意义(F=47.32、805.55、254.89、69.84、197.73、347.52,P值均小于0.05)。结论 ASC取材方便,培养相对容易,增殖迅速,生长稳定,表达干细胞表面标志物,具有一定的旁分泌功能。

关键词： 类肌钙蛋白   亚型   蛋白质结构   细胞生物学功能   癌症  

摘要： Calponin(类肌钙蛋白)是一个肌动蛋白细肌丝相关的调节蛋白,表达在平滑肌细胞和许多类型的非肌细胞中。哺乳动物有Calponin 1、Calponin 2和Calponin 3三个亚型,分别由三个同源基因CNN1、CNN2和CNN3编码,表达于不同的细胞类型,并执行细胞类型特异性的生理功能。除了调节平滑肌收缩功能,Calponin还调节非肌细胞肌动蛋白骨架的功能并参与多种细胞生命活动,如增殖、粘附、迁移、分化、吞噬和细胞融合等。本综述重点讨论Calponin亚型的基因进化、组织和细胞类型特异性表达、结构和功能的关系以及相关的调节机制。

关键词： 肝巨噬细胞   肝纤维化   肝星状细胞   炎症因子   双向调节  

摘要： 肝纤维化是由不同病因持续慢性肝损害所导致的肝脏损伤-愈合的过程,主要表现为大量细胞外基质沉积或瘢痕形成。肝星状细胞是调控细胞外基质沉积的主要的效应细胞。肝巨噬细胞通过释放各种促或抗炎症因子作用于肝星状细胞,调节肝纤维化。肝巨噬细胞具有异质性和极化的特性。局部微环境不同,肝巨噬细胞激活或极化的类型也不同,表型各异的巨噬细胞具有促进或逆转肝纤维化的作用。

关键词： IFN-λ2   生物学活性   细胞系  

摘要： 探讨鼠IFN-λ2CHO细胞系建立及生物学活性分析。方法:借助水疱口炎病毒对小鼠脾脏细胞刺激,并将mIFN全长基因进行克隆,建构PCAGG-EGFP-mIFN-λ2 真核载体,于CHO细胞稳定表达,并将小鼠黑色素瘤B16细胞作为其抗病毒活性检测的载体。建构MDBK-Mxp-Luc细胞系诱导Mxl抗病毒蛋白产生。结果:双酶切鉴定pMDl8-T-mlFN-λ2,可见大小582bp条状,表明真核载体成功建构;mIFN-λ2CHO表达稳定后,其细胞株上锁分泌出的上清mIFN-λ2于B16中的抗病毒活性为104AU/ml;蛋白诱导鼠mIFN-λ2抗病毒Mxl的蛋白表达,其达到高峰的时间为9-12h,其消失的时间为24h。(P<0.05)。结论:mIFN-λ2的CHO细胞株稳定表达构建后,mIFN-λ2分泌的蛋白在抗病毒的活性上,相对良好,同时,其与Mx1抗病毒蛋白之间关系密切。

关键词： 唑来膦酸   牙龈成纤维细胞   增殖   凋亡   分化   NF-κB信号通路  

摘要： 目的:探讨唑来膦酸对牙龈成纤维细胞增殖、凋亡、分化的影响及机制。方法:从牙龈组织分离原代人牙龈成纤维细胞(HGFs),0.5、1、5、10μmol/L的唑来膦酸处理HGFs 24、48、72h后,CCK8实验检测细胞的增殖;流式细胞仪检测10μmol/L的唑来膦酸处理HGFs 72h后的细胞凋亡情况;加入10μmol/L的唑来膦酸的成骨诱导分化液培养HGFs 7d后,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,Western blot检测Runx2和OPN的蛋白表达;10μmol/L的唑来膦酸处理HGFs 72h后,Western blot检测NF-κB信号通路p65、IκBα蛋白表达。结果:唑来膦酸可呈剂量依赖抑制HGFs细胞增殖(P<0.01);唑来膦酸组细胞的凋亡率显著高于对照组,ALP活性及Runx2、OPN蛋白表达显著高于对照组,p65、IκBα的蛋白表达显著低于对照组(P<0.01)。结论:唑来膦酸可抑制HGFs增殖,促进细胞的凋亡和分化,其机制与下调NF-κB信号通路有关。

关键词： 生物物理学   生物化学   征稿简则   分子生物学   细胞生物学   蛋白质组学   系统生物学   学术期刊  

摘要： （2016年12月修订）1征稿范围与栏目设置1.1征稿范围本刊为国内外公开发行的全国性学术期刊,月刊,每月20日发行.征稿的学科范围是生物化学、分子生物学、生物物理学、细胞生物学、神经科学、免疫学,以及基因组学、蛋白质组学、系统生物学等相关学科领域.

关键词： BMSCs   体外培养   细胞生物学特征   诱导分化   成骨细胞   组织工程  

摘要： [目的]体外分离培养猕猴骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),研究其生长增殖特性及其向成骨细胞的诱导分化能力。[方法]采用全骨髓贴壁法纯化猕猴骨髓源BMSCs,观察猕猴BMSCs的生长情况并运用MTT法绘制其生长曲线;对其进行流式细胞技术分析,鉴定BMSCs的生物学特性;在体外应用成骨诱导培养液(含0.1umol·L-1地塞米松、10mmol·L-1β-甘油磷酸钠、10%FBS、50umol·L-1抗坏血酸钠、维生素C 50mg·L-1)定向诱导分化,对分化后的细胞进行ALP、Von Kossa染色以鉴定其向成骨诱导的潜能。[结果]猕猴BMSCs的生长曲线如下:细胞在开始培养时有2d左右的相对静止期,3~6d增殖迅速,呈对数生长,7d后进入平台期,细胞增殖明显减缓。流式细胞仪检测结果显示:CD44和CD105的表达率分别为98.20%和95.01%,均呈强阳性,而CD34和CD45的表达率分别为1.38%和3.30%,呈阴性。未进行成骨诱导的第3代猕猴BMSCs,ALP染色呈阴性,未出现红色颗粒,且不随时间而改变;进行成骨诱导的第3代猕猴BMSCs,ALP染色呈阳性,第7d细胞中央出现散在分布的红色颗粒,并且随着诱导时间延长而增多颜色也逐渐加深,第14d镜下红色颗粒较前增多,且颜色也较前加深,其结果表明BMSCs在定向诱导分化为成骨细胞及骨细胞。未进行成骨诱导的第3代猕猴BMSCs,Von Kossa染色呈阴性,且不随时间而改变;进行成骨诱导的第3代猕猴BMSCs在第7d Von Kossa染色后镜下出现黑色沉积样结节,呈散在分布、大小不一,提示有钙样基质产生,第14d Von Kossa染色后镜下出现明显增大的黑色结节样物质,且数量增多、颜色加深。[结论]通过全骨髓贴壁分离法可以获得纯度较高的猕猴骨髓源BMSCs,体外培养具有较强的增殖能力,在成骨细胞诱导剂培养基里可以诱导其向成骨细胞方向分化,具有良好的成骨分化潜能,是组织工程骨中理想的种子细胞。