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关键词： 血小板凝血酶蛋白1   肺腺癌   细胞增殖   脱噬作用   细胞周期  

摘要： 目的观察血小板凝血酶蛋白1（THBS1）表达下调对肺腺癌A549细胞的细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响。 方法采用Western blot法检测肺腺癌细胞株A549、H1299、H358、H1975、PC9、PG49及Calu3中THBS1蛋白的表达水平，脂质体将THBS1小干扰RNA（siRNA）和对照siRNA分别转染至THBS1蛋白表达水平最高的A549细胞，Western blot检验转染THBS1 siRNA组、对照组和未转染组细胞中THBS1蛋白的表达，然后采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组细胞的增殖，采用流式细胞术分析各组细胞的细胞凋亡及细胞周期分布。 结果不同肺腺癌细胞株中THBS1蛋白的表达水平不同，其中A549细胞（1.120±0.087）表达最高（F＝358.087，P＝0.000）。与未转染组A549细胞和对照组比较：转染THBS1 siRNA组中A549细胞中THBS1蛋白表达量（0.053±0.023）显著降低（P＝0.000），细胞增殖能力减弱（P＝0.000），细胞的凋亡率[转染THBS1 siRNA组早期、中晚期及总凋亡率分别为（17.00±1.33）%、（3.70±0.56）%和（20.71±0.78）%升高（F值分别为115.899、14.418和167.329，P值分别为0.000、0.005和0.000]，G0/G1期细胞百分比（68.43±2.26）%显著升高（F＝46.521，P＝0.000），S期细胞百分比（22.33±2.15）%降低（F＝16.621，P＝0.004），G2/M期细胞百分比（9.23±2.35）%降低（F＝9.282，P＝0.015），以上差异均有统计学意义。 结论沉默THBS1基因，降低肺腺癌A549细胞中THBS1蛋白表达可以减弱细胞的增殖能力，促进细胞凋亡并抑制细胞周期进程。

关键词： 细胞生物学与医学   信号转导   干细胞   基因  

摘要： 细胞生物学是当代发展迅速且活跃的学科,其研究的新知识、新技术不断向医学领域渗透,已成为认识疾病发病机制,获取疾病防治措施的基础和推动力。文章从五个方面介绍细胞生物学与医学之间的紧密联系。

关键词： 动物生物学   竞赛试题   奥林匹克   国际   生物系统学   细胞生物学   动物行为学   进化生物学  

摘要： 理论考试B共3h。 1～11题：动物生物学；12-14题：生物系统学；15～23题：细胞生物学；24-29题：生态学；30-31题：动物行为学；32-41题：遗传与进化生物学；42-49题：植物生物学。

关键词： 细胞生物学   网络课程建设   地方本科院校  

摘要： 细胞生物学是生命科学中最重要的基础学科之一。本文介绍了笔者以创新人才培养为导向的细胞生物学网络课程建设的内容及其实践应用。实践证明,其对学生的学习有很好的辅助作用,发展了学生学习的主体性,培养了学生良好的创新意识和科研思维。

关键词： 长链非编码RNA   胰腺癌   增殖   侵袭   迁移  

摘要： 目的探讨长链非编码RNATCONS_00023867（long non-coding RNA TCONS_00023867，lncRNA TCONS_00023867）在胰腺癌组织中的表达及对胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）技术检测人胰腺癌组织和癌旁组织及5种胰腺癌细胞系（Capan-2、△sPC-1、BxPC．3、MIAPaCa-2、PANC-1）和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6c-7中TCONS_00023867的表达水平；分别在Capan-2和PANC-1细胞中转染TCONS_00023867过表达质粒及对照质粒PEX-3。利用CCK-8和平板克隆实验检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力；Western blot检测p53的蛋白表达。结果LncRNATCONS_00023867在胰腺癌组织中表达水平远低于癌旁组织（△Ct值13．64±0．55vs8．64±0．38，P〈0．001）。过表达TCONS_00023867后，胰腺癌细胞系Capan．2、PANC．1实验组（Over TCONS_00023867）平板克隆球数分别低于空质粒PEX-3组（181．3±4．667vs227．3±9．207，P=0．0112）、（86．O±4．933vs167．2±2．603，P=0．0001）；Capan-2、PANC-1细胞增殖能力弱于空质粒PEX-3组；Capan-2、PANC-1的迁移能力分别低于空质粒PEX．3组（57．6±6．809vs124．6±8．548，P=0．003）、（47．40±7．061 vs 105．20±10．28。P=0．0017）；Capan-2、PANC-1侵袭能力分别低于空质粒PEX．3组（46．0±5．033vs120．7±7．055，P=0．001）、（64．0±8．327 vs118．0±11．53，P=0．0192）；Western blot实验表明实验组（OverTCONS_00023867）Capan-2、PANC-1中p53的表达量分别高于空质粒PEX-3组（2.192±0773 vs 1.007：t=0．0188，P=0．0001）、（1.816±163vs0988±0．01216，P=0．0072）。结论lncRNA TCONS_00023867在胰腺癌中低表达；过表达TCONS_00023867可能通过增加p53蛋白水平进而抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

关键词： 中国科学院大连化学物理研究所   巨噬细胞   肿瘤   机制   恶性   细胞生物学   研究成果   生物化学  

摘要： 2018年7月19日,Molecular Cell在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所杨巍维研究组与中国科学院大连化学物理研究所李国辉研究员的最新研究成果：＂Macrophage-associated PGK1 phosphorylation promotes aerobic glycolysis and tum-origenesis＂。

关键词： 重组新城疫病毒   白细胞介素-29   肺腺癌   迁移   侵袭  

摘要： 目的:探讨表达IL-29的重组新城疫病毒LoSota株(recombinant Newcastle disease virus LoSota line expressing IL-29,rL-IL29)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549细胞为rL-IL29组,LoSota株新城疫病毒(NDVL)感染的A549细胞为NDVL组及PBS处理的A549细胞为对照组。蛋白质印迹法检测各组A549细胞中NDV HN、IL-29蛋白的表达;CCK8法、划痕试验及Transwell侵袭实验检测rL-IL29对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞E-钙黏蛋白、MMP2、波形蛋白及AKT/NF-κB通路相关蛋白的表达水平。结果:A549细胞感染rL-IL29后,NDV HN及IL-29蛋白均稳定表达,且明显高于NDVL组及对照组;rL-IL29及NDVL感染A549细胞后能够抑制细胞的增殖、迁移及侵袭,且rL-IL29作用更强;与对照组及NDVL组比较,rL-IL29感染后A549细胞中E-钙黏蛋白表达量明显增加,波形蛋白、MMP2(66 kDa/72 kDa)、p-AKT及P65蛋白表达明显减弱(均P<0.05)。结论:rL-IL29可能通过阻碍AKT/NF-κB信号通路上调E-钙黏蛋白表达和下调波形蛋白、MMP2蛋白表达,从而抑制肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移。

关键词： 白血病   原始巨核细胞   急性   细胞生物学   免疫学   细胞遗传学   MLL-AF4  

摘要： 目的探讨急性巨核细胞白血病（AMKL）患者的实验室综合诊断特点及方法。方法报道1例3岁10月AMKL患儿，利用细胞形态学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学（MICM）方法综合诊断AMKL。结果形态学发现异常细胞胞体大，胞核椭圆形或不规则，核染色质浓厚，隐约可见1～3个核仁，胞质嗜碱，量中等，边缘不完整，多数细胞可见伪足，双核及多核细胞易见；该类细胞表达CD41a、CD61、CD71和CD42b，白血病43种融合基因筛查MLL-AF4阳性，染色体为复杂核型。结论儿童AMKL较为少见，而MLL-AF4阳性AMKL更为罕见，完善相关检查明确MICM分型诊断，有利于治疗及改善预后。

关键词： 树突细胞   体外优化   生物学特性  

摘要： 目的对小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)的体外培养方法进行优化。方法从小鼠获取骨髓细胞,用含因子的完全培养基于37℃5%CO2培养箱中培养,3 h后弃去上清,加入相同因子浓度的完全培养基继续培养,48 h收集上清细胞离心后种于6孔板中以上培养基继续培养,96 h后换液处理,第8天时添加LPS刺激作为LPS刺激组,未添加LPS作为对照组,结合流式细胞仪(FCM)、酶联免疫吸附技术(ELISA)等从细胞形态、表面分子[B7-2分子(CD86)]及主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的特异性表达、相关因子[白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-10(IL-10)]分泌及诱导T淋巴细胞的增殖能力等进行鉴定。结果镜下观察细胞有明显的不规则枝状突起,有典型DCs形态特征。流式结果显示细胞纯度为77.4%左右;经LPS刺激后树突细胞CD86、MHCⅡ的比例均明显增加(P<0.001);ELISA结果显示与对照组相比,LPS刺激组IL-12、IL-10的含量明显增加(P<0.01),IL-12的表达量增加约18倍,IL-10的表达量增加约2倍。MLR混合淋巴细胞反应结果显示经LPS刺激后LPS刺激组细胞诱导T淋巴增殖能力显著增强(P<0.05)。结论树突细胞体外原代培养48 h后,选用上清细胞继续培养可以获得纯度较高性能较好的DCs。

关键词： S100P   膀胱癌5637细胞   RNA干扰  

摘要： 目的:探讨S100P基因对膀胱癌细胞生物学特性的影响。方法:将膀胱癌5637细胞分为空白对照组、阴性对照组和S100P siRNA组。空白对照组常规培养,S100P siRNA组细胞感染含S100P siRNA的慢病毒,阴性对照组感染空病毒。感染48 h后,采用实时荧光定量PCR检测3组细胞中S100P mRNA的表达水平,采用Western blot法检测S100P、Cyclin D1、CDK2、P53、NF-κB、Ezrin、P-gp蛋白的表达水平,MTT法检测细胞增殖抑制率及吡柔比星对细胞的IC50,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,S100P siRNA组细胞S100P mRNA和蛋白表达水平,Cyclin D1、CDK2、P53、NF-k B、Ezrin、P-gp蛋白表达水平均降低(P<0.05)。S100P siRNA组细胞增殖抑制率和凋亡率均高于阴性对照组(P<0.05),吡柔比星的IC50低于空白对照组(P<0.05)。结论:S100P与膀胱癌细胞的增殖、凋亡及化疗敏感性关系密切。