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关键词： 中国科学院院士   美国加州大学   生命科学学院   细胞生物学   清华大学   硕士学位   博士学位   爱因斯坦  

摘要： 陈晔光,清华大学生命科学学院教授,中国科学院院士.1983年毕业于江西大学,获生物学学士学位,1986年和1990年分别获江西大学动物学硕士和美国纽约福特汉姆大学细胞生物学硕士学位,1996年获美国纽约爱因斯坦医学院细胞生物学博士学位.在斯隆-凯特琳癌症中心/霍华德·休斯医学研究所完成博士后研究,于2000年任美国加州大学河滨分校助理教授,2002年任清华大学生命科学学院教授.

关键词： ST   ST-S   细胞库  

摘要： 采用逐步降低培养基中血清含量的方法获得可以悬浮生长的ST-S细胞株,扩大培养后建立了种子细胞库和工作细胞库;对复苏后细胞的特征、生长曲线、纯净性、核型、致瘤性及病毒的适应性进行了研究。结果表明ST-S悬浮细胞呈圆球形,单细胞悬浮生长、生长状态良好;细菌、外源病毒、支原体检测均为阴性;染色体为19对。建立的细胞库,可为开展ST悬浮细胞及多种猪用疫苗的研究提供基础理论依据和细胞资源。

关键词： 临床医学   生物科学   科学发展   医学发展   现代医学   生物技术   细胞生物学   分子生物学  

摘要： 前言:生物科学作为一门新兴的科学,在诞生之初就展现了其无限的前景。已分化出细胞生物学、分子生物学、微生物学、动物及植物学等分支学科。而现代医学则起源于近一二百年,其范围十分广阔,包括临床医学、免疫学、护理学、神经学等,而在其中生物科学则是贯穿其诞生、发展和未来的成熟。毫不夸张地说,每一次现代医学的突破,其背后都是生物技术的一次重大飞跃。下面我以临床医学为例,给大家介绍一下生物技术是如何在临床医学之中发挥其举足轻重的作用。

关键词： 二次离子质谱成像   激光扫描共聚焦显微成像   联用成像   单细胞成像   细胞生物学   评述  

摘要： 二次离子质谱(SIMS)分析主要用于半导体、地质等领域材料表面分析,随着科学仪器技术的发展,近年来,SIMS在生命科学领域中得到了越来越广泛的应用。SIMS可以实现对样品表面的质谱分析、化学成像以及深度剖析。三维SIMS成像分析的横向分辨率可达80~100 nm,纵向分辨率1~5 nm。但是,由于缺少特异性指示亚细胞结构的碎片离子,单细胞SIMS成像分析仍然面临着诸多挑战。激光扫描共聚焦显微成像(LSCM)作为一种单细胞成像技术已日趋成熟,可以对单细胞中的荧光分子或者对荧光标记的目标分子、细胞器成像,获得高分辨率亚细胞结构成像图。因而,LSCM在单细胞形貌分析上的优势和SIMS在单细胞化学成像方面的优势可以有效互补,其联合应用能显著提升单细胞分析的应用范围、深度和结果的准确性。本文重点介绍SIMS成像以及SIMS-LSCM联用成像在单细胞成像研究中的应用进展,在总结、评述该领域代表性工作的同时,对SIMS-LSCM联用成像在化学和生命科学研究,特别是在细胞生物学和药物发现领域的应用前景进行了展望。

关键词： 人体免疫系统   分子生物学   降解机制   刹车   国家重点实验室   调控   研究成果   细胞生物学  

摘要： 2018年11月29日,国际顶尖学术期刊Nature在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室许琛琦研究团队的研究成果。该研究成果首次揭示了人体免疫系统“刹车”分子PD-1的降解机制,以及该机制在肿瘤免疫反应中的功能。

关键词： 单核细胞增生李斯特氏菌   基因敲除   生长能力   RT-PCR   细胞侵袭   生物被膜  

摘要： 单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种重要的食源性致病菌,其基因dat编码D-丙氨酸氨基转移酶,可将D-谷氨酸转变为D-丙氨酸,后者是细菌细胞壁肽聚糖的组成成分。在Lm野生株EGDe actA及inlB双基因缺失株(EGDeΔactAΔinlB)的基础上,利用同源重组的方法进一步构建了缺失基因dat的菌株(EGDeΔactAΔinlBΔdat),并对该缺失菌株生长状态、毒力基因表达水平、细胞侵袭及生物被膜的形成量等基本生物学特性进行研究,运用Real Time-PCR(RT-PCR)测定Lm毒力基因的相对表达量。结果表明,基因的缺失对突变菌株的生长能力以及生物被膜形成有重要的调控作用,并导致毒力基因srt A、plc A表达量下调,VIP、inlA表达量上调,对Coca-2细胞的侵袭无影响。此缺失株的构建为进一步研究基因dat的功能提供了材料。

关键词： PD-L1   口腔鳞癌   增殖   迁移  

摘要： 目的研究PD-L1基因对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响,初步探讨PD-L1在口腔鳞癌进展过程中发挥的作用。方法采用脂质体2000(lipofectamine 2000)转染小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)的方法,对口腔鳞癌细胞系细胞中PD-L1基因进行敲减,real-time PCR检测敲减效果。利用MTT法比较PD-L1敲减组与对照细胞增殖能力的差异。克隆形成实验评价PD-L1对肿瘤细胞克隆形成能力的影响。划痕实验研究PD-L1对细胞迁移能力的影响。Transwell实验验证PD-L1对细胞侵袭能力的影响。提取口腔鳞癌病人组织标本RNA并通过real-time PCR的方法比较PD-L1的表达差异。结果转染siRNA后,细胞PD-L1表达明显下降,PD-L1敲减细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力都较对照组细胞减弱。在临床标本的检测中,证实了PD-L1在口腔鳞癌组织中高表达。结论 PD-L1能对口腔鳞癌细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力都具有明显影响,可能在口腔鳞癌的进展过程中发挥一定作用。

关键词： 人主动脉内皮细胞   免疫组织化学   细胞分离   细胞培养   流式细胞术  

摘要： 目的:建立体外人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)提取和培养的方法。方法:从术中取下的人主动脉组织上剥离内皮层,Ⅰ型胶原酶消化分离HAECs,利用显微镜观察其生长状况,免疫组织化学方法及流式细胞法鉴定及检测细胞纯度,以氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)检测细胞吞噬功能并检测细胞在体外的血管生成能力。结果:0.1%及0.2%的Ⅰ型胶原酶,最佳消化时间均为50 min,2 h贴壁细胞数分别(25.2±2.1)×103,(40.5±3.8)×103)个。细胞融合后在倒置显微镜下呈"鹅卵石"样排列生长。血小板-内皮黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)及Ⅷ因子鉴定为阳性,细胞纯度达(96.43±4.12)%。细胞内吞ox-LDL及血管生成能力较好。结论:钝性分离主动脉内皮层,辅以Ⅰ型胶原酶消化是一种较好的HAECs获取方法,酶浓度及消化时间是其重要的影响因素。

关键词： PCSK9   细胞生物学功能   抗血小板药物  

摘要： PCSK9是近年来最新发现的常染色体显性高胆固醇血症相关基因,其编码蛋白可以与肝细胞表面低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein receptor,LDLR）结合,构成复合物并靶向转运到溶酶体内进行降解,从而阻断LDLR在细胞膜表面的循环途径,抑制低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）通过LDLR转运从体内清除代谢，使得血浆中LDL-C升高，最终导致动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的形成。

关键词： 羊膜间充质干细胞   羊膜上皮细胞   CXCR4   归巢   迁移  

摘要： 目的:研究与羊膜上皮细胞(amniotic epithelial cells,AEC)共培养对羊膜间充质干细胞(amniotic mesenchymal stem cells,AMSC)生物学特性的影响,并探讨基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)/CXCR4轴在AMSC归巢、迁移过程中的作用。方法:从人羊膜中分别分离、培养AMSC和AEC,进行扩增及鉴定。实验设AMSC与AEC共培养组、无血清AMSC培养组以及血清AMSC培养组,培养24、48、72 h后,通过CCK-8及锥虫蓝实验检测AMSC细胞增殖活性,免疫荧光流式细胞术和Real-time PCR检测CXCR4 m RNA的表达水平,细胞迁移实验检测AMSC细胞体外迁移能力。结果:48、72 h共培养组及血清培养组细胞增殖活性及增殖率均高于无血清培养组(P<0.05);共培养组与无血清培养组AMSC细胞的CXCR4 m RNA和蛋白表达明显高于血清培养组(P<0.05),两组AMSC细胞依赖迁移能力明显高于血清培养组(P<0.05)。结论:与AEC共培养的AMSC细胞仍具备间充质干细胞的基本生物学特性,且能保持良好的增殖活性,共培养能上调AMSC表面CXCR4,并在体外增强其迁移能力。