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关键词： 创新型研讨式教学,细胞生物学,生物物理  

摘要： 在新的形势下将创新型研讨式教学模式引入到交叉学科生物物理专业研究生的细胞生物学教学中,并将研讨式教学模式的内涵扩大。创新型研讨式教学过程包括教师讲授,学生个人自主实习,小组讨论切磋,然后由学生在全班轮流汇报讲评和教师进行总结,并形成最终的成绩评价模式,应用于实际教学中。旨在提高研究生的自主学习能力,培养适应新时代、新科技发展的创新型人才。

关键词： HL-7702细胞   HCCLM3细胞   侵袭性   肝癌干细胞   生物学特性  

摘要： 目的:采用人肝癌细胞HCCLM3建立高、低侵袭性肝癌干细胞(H/L-ILCSCs)模型,并与HCCLM3和正常肝细胞HL-7702相比较鉴定其生物学特性。方法:(1)利用Transwell小室迁移实验分离获得高、低迁移性HCCLM3细胞,再采用Transwell小室侵袭实验进一步分离获得高、低侵袭性HCCLM3细胞。(2)采用免疫磁珠分选法以CD133^+为分子标志分离高、低侵袭性HCCLM3细胞,获得H/L-ILCSCs。(3)检测H/L-ILCSCs、HCCLM3细胞和正常肝细胞HL-7702干细胞表面标志分子CD133^+、CD90^+、CD44^+的表达。(4)采用CCK-8法、Transwell侵袭、平板克隆形成及免疫缺陷动物成瘤实验,检测H-ILCSCs、L-ILCSCs、HCCLM3及HL-7702的生长增殖、体外侵袭、干细胞球形成及体内裸鼠成瘤能力。结果:表面标志分子CD133^+、CD90^+、CD44^+在H-ILCSCs中高表达,而L-ILCSCs中CD133^+高表达,CD90^+和CD44^+低表达。L-ILCSCs、HCCLM3和HL-7702细胞的生长增殖、体外侵袭、平板克隆形成及体内成瘤能力均低于H-ILCSCs。L-ILCSCs细胞的生长增殖和体外侵袭能力均低于HCCLM3细胞。此外,L-ILCSCs不能形成克隆球和移植瘤。结论:从正常人肝癌细胞HCCLM3中可以分离和富集H/L-ILCSCs,且二者生物学特性存在差别。

关键词： 麻醉药   神经干(祖)细胞   增殖   分化   凋亡  

摘要： 麻醉药对患者尤其是处在大脑快速发育期的青少年患者的影响是关注的焦点。目前,麻醉药对神经干细胞生物学行为影响的研究主要集中在神经干细胞的自我更新、增殖、分化、凋亡等方面。一些麻醉药对神经干细胞的影响具有浓度-时间效应,通过一些经典的途径如Wnt、Caspase、Sox2等来影响,调控这些通路的MicroRNA而发挥作用。未来的研究一方面是从体内和体外两方面深入探究造成这些影响的机制,另一方面是利用神经干细胞对麻醉药的特性进行高通量评价。

关键词： 三阴性乳腺癌   巨噬细胞   microRNA-382   生物学特性  

摘要： 目的探讨microRNA-382(miR-382)在肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)中的表达对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞(4T1)生物学特性的影响。方法以小鼠腹腔巨噬细胞(mouse peritoneal macrophages,PMs)作为研究对象,分为PMs组,TAMs组和L-TAMs组;Western blot与qRT-PCR检测极化指标(IL-10、TNF-α)、miR-382、PGC-1α和NF-κB的表达变化;流式细胞术检测TAMs的极化变化(CD86、CD206);激光共聚焦显微镜成像检测PGC-1α和NF-κB的表达变化;以4T1细胞作为研究对象,分为4T1组,4T1+PMs组和4T1+L-PMs组,流式细胞术检测细胞凋亡率与细胞周期;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与PMs组比较,TAMs组IL-10、CD206和PGC-1α表达明显增加(P<0.05),miR-382、TNF-α和CD86表达明显降低(P<0.05),NF-κB转录活性显著降低(P<0.05),而L-TAMs组TNF-α、CD86和miR-382表达明显增高(P<0.05),IL-10、CD206和PGC-1α表达明显降低(P<0.05),NF-κB转录活性显著增强(P<0.05);与4T1组比较,4T1+PMs组侵袭能力明显增强(P<0.05),凋亡率明显下降(P<0.05),而4T1+L-PMs组侵袭能力明显下降(P<0.05),凋亡率明显增高(P<0.05)。结论 TAMs通过调节miR-382的表达可抑制TNBC的侵袭和增殖,其机制可能与TAMs中miR-382抑制PGC-1α的表达、增强NF-κB的转录活性,进而抑制TAMs的M2分化有关。

关键词： 科协组织   企业科协   科普部   科技馆   科协系统   科协主席   科协工作   创新簇   细胞生物学  

摘要： 北京市科协第九届常委会企业创新工作委员会召开工作会议8月7日,北京市科协第九届常委会企业创新工作委员会工作会议在顺义宾馆会议中心召开。会议主要研究科协系统服务首都创新驱动发展和企业创新工作。市科协副主席、企业创新工作委员会主任、北京双鹭药业股份有限公司董事长徐明波主持会议并讲话,企业创新工作委员会副主任、市科协副巡视员兼科普部部长陈维成.

关键词： 细胞外基质胶羊膜   生物力学特性   生物活性因子   角膜神经  

摘要： 目的研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等10种生物活性因子的表达含量加以测定,同时和新鲜泪道纤维蛋白胶羊膜(fresh lacrimal duct amniotic membrane,F-LDAM)、单层泪道纤维蛋白胶羊膜(monolayer lacrimal duct amniotic membrane,M-LDAM)进行对比。此外,利用负荷传感器对比细胞外基质胶泪道纤维蛋白胶羊膜(extracellular matrix lacrimal duct amniotic membrane,ECM-LDAM)与F-LDAM、M-LDAM的弹性模量、抗拉强度、断裂伸长率,并把ECMLDAM应用于兔干眼症的治疗,术后8周观察实验兔干眼治疗前后荧光染色(fluorescein stain,FL)评分、各时段泪液分泌、FL情况和角膜共焦显微镜下角膜上皮下神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分。结果 ECM-LDAM、M-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量均比F-LDAM低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而ECM-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量明显高于M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。ECM-LDAM的弹性模量明显低于F-LDAM及M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05);而ECM-LDAM的抗拉强度和断裂伸长率明显高于与M-LDAM和F-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。术后8周发现B组与A组相比FL评分降低,泪液分泌时间延长,角膜共焦显微镜下观察发现神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ECM-LDAM作为一种新型安全的泪道修复材料,其丰富的生物活性因子和优越的柔韧性,可以更有效地改善兔干眼,营养修复受损的角膜神经。

关键词： 急性髓系白血病   白血病干细胞   巨噬细胞   造血微环境   耐药  

摘要： 目的探讨急性髓系白血病干细胞(acute myeloid leukemia stem cells,AML LSCs)分化成AML LSCs源性巨噬样细胞的生物学现象、生物学特点及潜在的病理学意义。方法分选AML细胞系Kasumi-3中AML LSCs,在巨噬细胞条件培养基中培养14 d,从形态学、免疫表型、分泌细胞因子、吞噬功能等角度鉴定获得的贴壁细胞,明确AML LSCs源性巨噬样细胞的基本生物学特点。检测与AML LSCs源性巨噬样细胞共培养的Kasumi-3细胞表面耐药蛋白水平、胞内化疗药物浓度和对柔红霉素(DNR)的摄药量,初步评价AML LSCs源性巨噬样细胞促进白血病耐药的作用及可能机制。结果培养获得的AML LSCs源性巨噬样细胞呈多形性,以多角形和椭圆形贴壁细胞为主,透射电镜观察发现细胞呈椭圆形,胞浆丰富,有较多空泡;近胞核处高尔基体富集;包膜绒毛丰富且较长。AML LSCs源性巨噬样细胞特异性表达CD11b、CD163、CD206,分泌一定水平IL-10和IL-13。细菌吞噬实验证明其可吞噬大量呈绿色杆状荧光的***菌,随着孵育时间的延长,吞噬数量逐渐增多。激光共聚焦显微镜观察发现与AML LSCs源性巨噬样细胞共培养的Kasumi-3细胞表面ABC转运蛋白表达明显强于对照组,DNR摄药量低于悬浮培养Kasumi-3细胞(54.75±4.28 vs 93.84±3.93,P<0.01),对DNR、阿霉素(ADM)、阿糖胞苷(Ara-C)和足叶乙甙(VP-16)均有一定的耐药性。结论 AML LSCs在特定条件下可以分化成为AML LSCs源性巨噬样细胞,后者有类似巨噬细胞的生物学特性,参与白血病耐药的形成。

关键词： 医学细胞生物学   图像信息   生物图   教育教学  

摘要： 图像信息资源的综合整合和利用对于提高细胞生物学的教学质量是非常有效的,在教学实践中师生共同参与,贯彻利用图像信息启发教学的理念,将图像教学模块整合与点·面式教学法有机结合,开展图像资源库的建立,并伴随教学环节的改革,采用一系列教学手段,加大"生物图"在教学中的应用。在理论教学中增加图像类资源的利用,实践教学中指导鼓励学生制作个性化图像资源,从制图、识图、绘图全方面培养学生,实现三方面有机统一,从而使学生潜移默化的构建起图像资源综合利用的全方位完整体系,有效提高教学质量与效果。

关键词： 鼻咽肿瘤   免疫球蛋白M   抗体   HNE-1   生物学特性  

摘要： 目的研究抗人免疫球蛋白M(IgM)抗体对鼻咽癌HNE-1细胞增殖、凋亡、细胞周期和成瘤的影响。方法经抗人IgM抗体处理后,采用细胞增殖抑制实验观察HNE-1细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡;构建裸鼠动物模型,腹腔注射抗人IgM抗体,观察移植瘤的生长,免疫组织化学SP法检测移植瘤中IgM和糖蛋白96(gp96)的蛋白表达。结果抗人IgM抗体可呈浓度和时间依赖性抑制HNE-1细胞的增殖(P<0.05);流式细胞术检测表明抗人IgM抗体可促进HNE-1细胞G1期细胞百分比明显降低,S期细胞百分比明显增加,细胞凋亡率明显增高(P<0.05);TUNEL检测提示抗人IgM抗体可促进HNE-1细胞凋亡(P<0.01);移植瘤实验显示抗人IgM抗体可明显抑制移植瘤的体积和质量(P<0.05);移植瘤免疫组织化学显示裸鼠腹腔注射抗人IgM抗体后,移植瘤内IgM和gp96蛋白的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论抗人IgM抗体可有效抑制HNE-1细胞的增殖、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期,并且能抑制裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制IgM和gp96蛋白表达有关。

关键词： 食管癌   PDCD4基因   RNA干扰   增殖   迁移  

摘要： 目的探讨沉默PDCD4基因对食管癌细胞生物学特性的影响。方法选取27例食管癌患者的癌组织和对应的癌旁组织,采用荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测PDCD4表达水平,对患者5年生存率进行调查分析,并分析PDCD4表达与食管癌临床病理学特征的相关性。采用Western blot法检测食管癌细胞的PDCD4蛋白表达。利用siRNA特异沉默PDCD4基因表达。将si-PDCD4或si-NC转染到食管癌细胞TE-1中,转染稳定后,在0、24、48和72 h利用MTT法检测细胞增殖能力。用结晶紫染色法检测转染细胞克隆形成能力,用细胞划痕实验(Wounding heal)检测转染细胞迁移能力。结果 PDCD4在癌组织及癌细胞中显著低表达,PDCD4相对高表达的患者生存率高于低表达PDCD4的患者。沉默PDCD4基因能够增强食管癌细胞的增殖、克隆形成和迁移能力。结论沉默PDCD4基因促进了食管癌细胞的增殖与迁移。