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关键词： 乳腺癌转移   癌浸润   肌上皮细胞   细胞生物学   癌细胞   小鼠实验   体内扩散   防御机制  

摘要： 最近，美国约翰斯·霍普金斯大学的小鼠实验显示，乳房乳管周围的细胞层能够伸出并捕获逃逸的癌细胞来防止其在体内扩散。这表明肌上皮细胞的细胞层是一种能抑制乳腺癌转移的积极防御机制。该实验结果于7月30日在线发表在《细胞生物学杂志》上。

关键词： 肺癌   M2型丙酮酸激酶   shRNA干扰   生物学功能  

摘要： 目的探讨M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)下调对人肺癌A549细胞生物学特性的影响。方法采用免疫荧光技术检测A549细胞中PKM2蛋白的表达;将构建有PKM2-shRNA的重组质粒转入A549细胞;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测PKM2 mRNA和蛋白表达水平; CCK-8法检测PKM2基因沉默对A549细胞增殖能力的影响;采用葡萄糖测定试剂盒测定细胞对葡萄糖的消耗量; Transwell实验检测细胞穿过人工基膜的能力。结果肺癌A549细胞的细胞质及细胞核中均有PKM2表达; PKM2-shRNA质粒转染A549细胞48h后,可明显下调A549细胞中PKM2 mRNA及蛋白的表达水平,并且明显抑制A549细胞增殖; PKM2 shRNA可减少A549细胞葡萄糖的消耗,还可抑制细胞侵袭能力。结论在肺癌细胞A549中,抑制PKM2表达可显著抑制细胞增殖、侵袭和糖代谢能力。

关键词： 甲状腺肿瘤   RNA干扰   细胞凋亡   细胞增殖   基因,CITED   1  

摘要： 目的:探讨沉默CITED1(Cbp/p300 interacting transactivator with Glu/Asp rich carboxy-terminal domain 1)基因表达对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、凋亡和迁移等生物学行为的影响。方法:将携带特异性靶向CITED1基因的shRNA(CITED1-shRNA)及其阴性对照shRNA(negative control-shRNA,NC-shRNA)的重组慢病毒分别感染甲状腺乳头状癌K1细胞株,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测CITED1基因沉默效率;然后采用CCK-8法检测细胞增殖,FCM法检测细胞周期和细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移能力。结果:经携带CITED1-shRNA的重组慢病毒感染后,甲状腺乳头状癌K1细胞中CITED1 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P值均<0.01),证明成功获得了CITED1基因沉默的K1细胞株。沉默CITED1基因表达后,K1细胞的增殖能力明显降低(P <0.01),细胞凋亡率明显升高(P=0.001),G0/G1期细胞所占比例明显增高(P=0.007),G2/M及S期细胞所占比例均明显降低(P值均<0.05),而且12 h和24 h时细胞迁移能力明显减弱(P值均<0.01)。结论:沉默CITED1基因表达可以抑制甲状腺乳头状癌K1细胞的增殖和迁移,促进肿瘤细胞凋亡。

关键词： SPAG9基因   非小细胞肺癌   细胞增殖   细胞周期   凋亡   迁移  

摘要： 目的:研究精原相关抗原9(spermatogenic antigen 9,SPAG9)对非小细胞肺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移等生物学功能的影响。方法:A549细胞转染SPAG9 siRNA后,qRT-PCR和Western blot检测转染前后SPAG9的表达变化;CCK-8检测SPAG9对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPAG9基因对A549细胞周期和凋亡的影响;Transwell实验检测SPAG9基因对A549细胞体外迁移能力的影响。结果:qRT-PCR检测结果表明:实验组的SPAG9的相对表达量为(0.28±0.12),明显低于对照组(1.04±0.06)(P<0.05);Western blot结果表明:对照组相对蛋白表达水平为(0.34±0.12),实验组为(0.11±0.08),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8实验表明:SPAG9沉默可抑制细胞增殖;流式细胞术检测结果表明:沉默SPAG9可使A549细胞发生G0/G1期阻滞,凋亡增加;Transwell迁移实验表明:实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论:SPAG9沉默可抑制非小细胞肺癌A549的增殖、迁移,促进凋亡发生,为探寻中药治疗非小细胞肺癌的靶点奠定了实验基础。

关键词： 骨髓瘤   SOX2蛋白   转录因子   趋化因子   趋化因子受体   生物学特性  

摘要： 目的揭示SOX2蛋白及趋化相关基因CCR1、CCR2和MCP-1影响骨髓瘤细胞生物学特性的机制。方法本研究以骨髓瘤细胞株H929为研究对象,采用随机数表法将细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。空白对照组为不进行任何处理的骨髓瘤细胞株H929,阴性对照组为转染慢病毒r LV-ZPP的稳转株H929-ZPP,实验组为转染慢病毒r LV-hsox2-Zs Green-Puro的稳转株H929-hsox2。采用Western blot检测各组细胞中SOX2蛋白表达,采用实时荧光定量PCR反应(RT-PCR)测定各组细胞中CCR1、CCR2和MCP-1基因表达,相应基因的相对表达水平用2-ΔΔCT代表。采用酶标仪测定细胞在450 nm处的吸光度值,计算细胞生存率。采用流式细胞仪计算各组细胞的凋亡率。结果实验组的SOX2蛋白表达为(1.38±0.07),高于空白对照组的(1.04±0.06)和阴性对照组的(0.72±0.07),差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的CCR1、CCR2和MCP-1基因表达水平分别为(4.37±0.33)、(4.45±0.38)、(10.72±1.14),高于空白对照组的(2.14±0.15)、(2.21±0.17)和(5.17±0.35)和阴性对照组的(1.22±0.10)、(1.16±0.09)和(1.59±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的细胞生存率为(40.53±2.21)%,低于空白对照组的(86.85±5.17)%和阴性对照组的(95.07±7.08)%,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的细胞凋亡率为(58.56±3.25)%,高于空白对照组的(12.15±1.14)%和阴性对照组的(4.93±2.12)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SOX2基因在细胞周期中特定时期的高表达会导致骨髓瘤细胞的凋亡。CCR1、CCR2和MCP-1基因参与了骨髓瘤细胞恶性增殖,其在细胞中的异常表达为骨髓瘤细胞提供合适的环境,导致疾病复发和抗凋亡的发生。

关键词： 细胞生物学   无纸化考试   实践与体会  

摘要： 目的探究在生物科学专业本科生中推行《细胞生物学》课程无纸化考试模式的效果。方法以某高校2015级生物科学专业本科生传统纸质试卷考试与该校2016级生物科学专业本科生无纸化考试为研究对象,对卷面平均成绩、各分数段考生占比、主观题与客观题得分率≥90%的试题占比等指标进行比较。结果与传统纸质试卷考试形式相比较,无纸化考试未显著影响考生卷面成绩和各分数段考生占比,显著降低主观题与客观题得分率≥90%的试题占比。结论无纸化考试模式的改革对培养人才素质的提高、构建节约型社会均具有重要意义。无纸化考试模式值得在其它专业和课程中进行推广。

关键词： 原代软骨细胞   细胞培养   Ⅱ型胶原蛋白酶   胰蛋白酶   半定量免疫荧光   细胞增殖   生长曲线   Ⅱ型胶原蛋白   干细胞   广东省自然科学基金   软骨细胞   细胞,培养的   胰蛋白酶   胶原酶类   胶原Ⅱ型   组织工程  

摘要： 背景:原代软骨细胞体外培养是研究骨骼生长的重要方法之一。目前原代软骨细胞的分离方法主要有单独消化法和分步消化法,但两种方法对软骨细胞生物学性能的影响尚不清楚。目的:比较两种方法对新生大鼠软骨细胞生物学性能的影响,为软骨发育的程序化研究提供实验基础。方法:无菌条件下取出新生SD大鼠关节软骨,分别采用Ⅱ型胶原蛋白酶单独消化法、胰蛋白酶和Ⅱ型胶原蛋白酶分步消化法分离软骨细胞,并进行体外培养。光学显微镜下观察软骨细的形态,CCK-8法检测软骨细胞的增殖活性,半定量免疫荧光分析软骨细胞的Ⅱ型胶原蛋白表达。结果与结论:(1)单独消化法和分步消化法都可以得到大量软骨细胞,但分步消化法较单独消化法所得软骨细胞的纯度更高;(2)光学显微镜下观察,两种方法消化所得细胞在形态学上无明显差异;(3)单独消化法所得细胞生长速度更快;(4)免疫荧光半定量分析显示两种方法所得软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白表达一致;(5)以上结果表明,分步消化法更适于新生大鼠原代软骨细胞的分离培养。

关键词： 喉癌   GAS5   转录因子E2F1   通用转录因子3   增殖   凋亡  

摘要： 目的探讨长链非编码RNA GAS5(lnc RNA GAS5)对喉癌Hep2细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测喉癌和癌旁正常组织中GAS5的表达,分析其表达与喉癌临床病理特征的关系。Hep2细胞中分别转染pc DNA3. 1-GAS5或si GAS5,另分别转染pc DNA3. 1-NC或si NC作对照。MTT法检测转染后Hep2细胞增殖活性,流式细胞术检测Hep2细胞周期和凋亡,QPCR法和Western blotting法检测E2F1、BTF3 m RNA和蛋白的表达。结果喉癌组织和癌旁正常组织中GAS5表达水平分别为0. 56±0. 10和0. 98±0. 11,差异有统计学意义(P<0. 05)。GAS5表达与分化程度、TNM分期有关。pc DNA3. 1-GAS5组24、48、72、96 h Hep2细胞存活率明显低于pc DNA3. 1-NC组,差异有统计学意义(P<0. 05); si GAS5组细胞存活率明显高于si NC组,差异有统计学意义(P <0. 05)。pc DNA3. 1-GAS5组细胞G1期细胞比例为(68. 14±4. 33)%,高于pc DNA3. 1-NC组,差异有统计学意义(P<0. 05)。pc DNA3. 1-GAS组凋亡率高于pc DNA3. 1-NC组,差异有统计学意义(P<0. 05)。pc DNA3. 1-GAS5组细胞E2F1、BTF3 m RNA和蛋白的水平均低于pc DNA3. 1-NC组,差异具有统计学意义(P<0. 05); si GAS5组细胞E2F1、BTF3 m RNA和蛋白的水平均高于si NC组,差异具有统计学意义(P<0. 05)。结论GAS5可负性调控E2F1和BTF3表达,从而参与调控喉癌细胞的增殖和凋亡。

关键词： 医学细胞生物学   对分课堂   过程性评价   自主学习   教学  

摘要： 目的探讨对分课堂教学模式在医学细胞生物学教学中的应用效果。方法选择西安医学院2016级检验本科专业的114名学生为对照组,2017级检验本科专业的120名学生为教改组。对照组采用传统教学模式授课,教改组采用对分课堂教学模式授课。对照组通过期末考试、绘制知识点框架图、调查问卷3种方式进行教学效果评价。教改组在对照组评价内容的基础上,增加随堂测验和随堂作业两项过程性评价指标,比较两组教学效果及教改组各次随堂测验和随堂作业标准化得分。结果教改组期末成绩、框架图中标记的知识点数目、问卷调查中的学习方法培养、解决问题能力提高、对课程认可度以及与其他课程相关性的得分均高于对照组(均P<0.05)。教改组第2、3、4、5次的随堂测验标准化得分和随堂作业标准化得分均分别高于第1次得分(均P<0.05)。结论与传统教学相比,对分课堂能提升学生的期末考试成绩,培养良好的学习方法,锻炼学以致用的实践能力,促进学生对知识的内在化吸收,保障学生进行自主性学习。

关键词： 翻转课堂   医学细胞生物学   课堂观察  

摘要： 为了培养学生自主学习的能力,本团队在医学细胞生物学课程教学过程中运用了翻转课堂教学的模式,深受学生喜爱并取得较好的学习效果。为进一步分析翻转课堂教学效果,本团队在翻转课堂的教学过程中从学生维度进行了课堂观察,内容包括学生在翻转课堂教学中的参与度及对核心知识的掌握程度,并请学生对该教学模式做了主观评价。结果分析表明,翻转课堂的教学模式,能达到预期教学目标,提高学生学习的自主性和学习热情,并受到学生的喜爱。