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关键词： 大数据   高等农业院校   细胞生物学实验课程   数字资源库  

摘要： 数字化实验教学是高校细胞生物学实验课程教学方式发展的趋势之一,数字资源库的建设是支撑数字化实验教学的重要手段之一。本文分析了细胞生物学实验课程的教学现状,提出了高校细胞生物学实验课程数字资源库建设的建议与方案,为高校细胞生物学实验课程的建设提供参考。

关键词： 蛋白质标记   标记方法   细胞生物学   基因融合   荧光成像技术   荧光蛋白   蛋白质定位   标记酶  

摘要： 标记和可视化蛋白质是研究细胞生物学的基本工具,可以用于监测蛋白质动态变化和解析细胞内复杂相互作用,从而理解特定感兴趣蛋白质(protein of interest,POI)的细胞功能。荧光成像技术在活细胞中研究蛋白质定位、功能及互作方面发挥着巨大作用。目前,常用的标记方法都有一定的局限性,例如抗体染色不能应用与活细胞,而小分子化学探针又缺乏通用型。目前最常用的是基因融合(使用荧光蛋白、自标记酶或肽标签),然而该方法通常需要过表达编码POI的开放阅读框架(ORF),可能对蛋白质的正常表达、折叠、定位和功能造成干扰。

关键词： miRNA-34a-5p   CDK6   肺癌   生物学特性  

摘要： [目的]分析miRNA-34a-5p靶向CDK6表达对肺癌细胞生物学特性的影响,探讨两者的作用关系。[方法]采用手术切除治疗的非小细胞肺癌患者的手术肿瘤组织样本和癌旁组织样本,对比miRNA-34a-5p、CDK6 mRNA以及CDK6蛋白表达水平;将miR-34a-5p抑制物转染至肺癌A549细胞,观察其对A549细胞存活、克隆形成、凋亡、迁移侵袭的影响;并验证miR-34a-5p对CDK6的靶向调控关系。[结果]肿瘤组织中miRNA-34a-5p(0.21±0.05)显著低于癌旁组织(0.54±0.08),而CDK6 mRNA表达水平(0.76±0.07)显著高于癌旁组织(0.23±0.04)(P<0.05);抑制质粒组的miRNA-34a-5p(0.14±0.03)、CDK6 mRNA(0.94±0.12)、增殖抑制率(17.32±2.39)%、凋亡率(12.32±2.39)%、克隆形成数(103.84±7.68)个、细胞迁移数(233.21±31.02)个、细胞侵袭数(102.16±10.93)个、CDK-6(0.79±0.09)和p-AKT(0.88±0.10)水平均高于空白对照组(0.30±0.05)、(0.75±0.09)、(29.84±5.01)%、(21.23±2.85)%、(77.17±8.43)个、(121.83±20.94)个、(24.39±5.12)个、(0.45±0.07)、(0.54±0.08)和阴性对照组(0.22±0.07)、(0.83±0.14)、(30.17±4.83)%、(22.08±3.94)%、(74.39±10.95)个、(118.38±26.38)个、(26.14±4.38)个、(0.48±0.06)、(0.56±0.07)(P<0.05)。Wt-CDK6荧光素强度(0.38±0.09)显著低于Mut-CDK6(0.99±0.21),且miR-34a-5p转染后CDK-6蛋白表达(0.28±0.05)低于阴性对照(0.95±0.11),差异存在统计学意义(P<0.05)。[结论]miRNA-34a-5p可直接靶向调控CDK6表达对肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移、克隆形成等生物学特性进行调控。

关键词： 细胞生物学   课程思政   教学改革   全方位育人  

摘要： “课程思政”是高等学校在目前新形势下践行“立德树人”人才培养理念的根本任务。“细胞生物学”是生命科学相关专业学生的基础课程,在人才培养中占有非常重要的地位,因此"细胞生物学"课程成为对生命科学类专业学生开展课程思政建设的理想阵地。本文以生物技术专业“细胞生物学”教学为例,分析了农业院校细胞生物学课程开展课程思政教育的必要性,深入挖掘了本课程蕴含的思政元素,并开展了“课程思政”融入课堂教学的应用实践,探索了农业院校生物技术专业细胞生物学课程思政的路径,实现了专业课程与思政课程的同行,同时也激发了学生内在的学习动力,提高了专业课教学质量,真正实现了全方位育人的目标。

关键词： 团队学习   线上   线下   医学本科生   细胞生物学   突发公共卫生事件   新冠流行  

摘要： 团队学习(team-based learning, TBL)结合了主动和协作学习,同时合并了翻转课堂教学法和基于问题的学习方法。然而突发公共卫生事件给TBL效果带来了一定的挑战。该研究调查了TBL对医学本科生细胞生物学课业成绩的影响,比较了经典的面对面(线下方式)和由于疫情影响而进行的线上团队学习方式。在传统的两节授课之后,笔者团队在细胞生物学课程中引入了非必修TBL环节,然后将参加TBL(线上和线下)和没有参加TBL同学的考试成绩和作业表现进行了比较。结果显示,无论是线上还是线下参加TBL的同学(n=120)在考试成绩(P<0.05)和相关课程作业(P<0.05)中都比未参加的同学(n=175)表现得更为优异。与未参加TBL的同学相比线上和线下参加TBL的两组同学的成绩分布更为集中,且未通过考试的同学分布于未参加TBL的同学中。线上和线下TBL两组之间在考试成绩(P=0.184 0)和课程作业(P=0.359 7)方面并没有明显差异。该研究显示,线上和线下TBL均可以成功地补充传统的课堂教学内容,进而提高学生学习能力,尤其是对于复杂的医学科目。该研究结果表明,线上TBL也可以收获很好的效果,这就表明在高等教育中可以灵活使用TBL教学方法。

关键词： 细胞生物学   医学遗传学   课程思政   教学改革  

摘要： 课程思政是高校课程建设的重要目标,也是体现课程育人的重要环节。但在实施过程中会出现如何将思政与专业知识有机结合,用何种教学方式能有效实施等困难。通过在“细胞生物学与医学遗传学”教学设计、教学实践过程中探讨课程思政的建设和教学的具体实施举措,为医学院校专业类课程开展思政教育提供了参考案例。

关键词： 癌症易感性基因15   miR-144-3p   富含亮氨酸的重复序列蛋白1   肝癌细胞   细胞生物学功能  

摘要： 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)癌症易感性基因15(Cancer susceptibility candidate 15,CASC15)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的分子调控机制。方法通过生物信息学方法预测目的基因表达,并分析目的基因表达与患者生存时间的关系;收集临床HCC患者肝癌组织和癌旁组织;CCK-8、Transwell和流式细胞术实验检测HCC细胞SMMC7721和Huh-7的增殖、侵袭、迁移以及凋亡;双荧光素酶实验检测miR-144-3p与CASC15和富含亮氨酸的重复序列蛋白1(Leucine rich repeat containing protein 1,LRRC1)的靶向关系;qRT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达情况;免疫荧光实验用于蛋白定位研究;回复实验验证CASC15/miR-144-3p/LRRC1对HCC进展的影响。体内实验验证CASC15对HCC进展的影响。结果TCGA数据库与qRT-PCR检测显示HCC组织和细胞中CASC15高表达、miR-144-3p低表达、LRRC1高表达(P<0.05)。增殖、侵袭、迁移的细胞功能实验结果表明在肿瘤发展中CASC15和LRRC1起到促进作用,miR-144-3p则是抑制作用,与凋亡实验结果一致(P<0.05)。细胞功能实验表明CASC15抑制miR-144-3p功能,miR-144-3p抑制LRRC1,CASC15与miR-144-3p结合,并导致LRRC1上调。回复实验结果表明CASC15通过抑制miR-144-3p促进LRRC1的表达从而促进HCC细胞增殖、侵袭和迁移并抑制细胞凋亡。结论CASC15可能通过调节miR-144-3p/LRRC1轴,从而促进HCC进展。

关键词： 玫瑰精油   皮肤成纤维细胞   衰老   增殖   迁移  

摘要： 文章旨在探究不同浓度玫瑰精油对D-gal诱导的皮肤成纤维细胞衰老的影响。设立空白对照组、D-gal组、D-gal+玫瑰精油组。用β-gal染色检测阳性细胞数目、EdU-594染色检测细胞增殖能力和划痕实验检测细胞迁移能力。β-gal染色结果显示,D-gal+玫瑰精油组与对照组(D-gal组)比较,衰老染色阳性细胞数减少(p<0.001);EdU-594染色结果显示,与对照组相比,D-gal+玫瑰精油组增殖细胞数增多(p<0.01);细胞迁移实验结果显示,D-gal+玫瑰精油组细胞迁移率增加(p<0.001)。可见,玫瑰精油可以减少D-gal模型中细胞衰老数目,提高皮肤成纤维细胞的增殖能力,增加皮肤成纤维细胞的迁移能力。

关键词： 神经元死亡   环鸟苷酸   神经疾病   溶酶体   细胞生物学   功能障碍   团队合作   科创中心  

摘要： 2024年1月22日,《自然·细胞生物学》(Nature Cell Biology)在线刊登了浙江大学生命科学研究院徐平龙教授、转化医学研究院沈承勇教授、科创中心李欣然研究员的合作成果“Innate immune sensing of lysosomal dysfunction drives multiple lysosomal storage disorders”(DOI:10.1038/s41556-023-01339-x)。研究聚焦环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)天然免疫机制在识别和应答溶酶体损伤中的核心功能,鉴定了神经元中存在显著激活的cGAS-STING机制及其驱动体内神经元死亡和神经疾病发生的关键功能,揭示其驱动多种溶酶体贮积症(LSD)发病的机制,并提出了一种通用的治疗LSD新策略。

关键词： B细胞κ轻肽基因增强子抑制因子   核苷酸结合结构域受体家族含CARD结构域-5   核因子κB   胃癌   细胞生物学功能   临床诊断价值  

摘要： 目的:探究IKBKB基因在胃癌细胞中的表达水平与NLRC5、NF-κB的作用关系,明确其对胃癌细胞生物学功能影响。方法:采用pLenti-IKBKB-sgRNA基因敲除质粒直接对人胃癌SGC-7901细胞系进行转染,应用免疫印迹试验(western blot,WB)检测单克隆细胞株中IKBKB基因敲除的效果,以及NLRC5、NF-κB的表达水平。划痕实验和Transwell迁移实验检测单克隆细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。成瘤实验观察单克隆细胞对瘤体生长的影响。在临床胃癌组织和癌旁组织中采用免疫组化染色评估NLRC5、NF-κB、IKBKB的表达状态。明确IKBKB与NLRC5、NF-κB的相关性以及临床诊断价值。结果:敲除IKBKB基因后人胃癌SGC-7901细胞中NLRC5、NF-κB的表达水平显著降低,细胞迁移和侵袭能力减弱。细胞发生G1期阻滞,降低了SGC-79013细胞增殖能力,细胞总凋亡率显著上升。IKBKB敲除后NLRC5、NF-κB表达水平下调影响瘤体的生长发育。NLRC5、NF-κB、IKBKB在胃癌组织中表达水平高于癌旁组织,NLRC5、NF-κB与IKBKB的表达水平呈正相关。IKBKB、NLRC5、NF-κB三者联合诊断胃癌AUC为0.921(0.876~0.967)。结论:IKBKB在胃癌细胞与NLRC5、NF-κB存在相关作用关系,协同促进胃癌的发生和发展。