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关键词： 前列腺肿瘤   miR-17-92基因簇   Bcl-2家族促凋亡蛋白   人第10号染色体缺失   的磷酸酶及张力蛋白同源物   蛋白激酶B   细胞外调节蛋白激酶  

摘要： 目的探讨过表达miR-17-92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及潜在机制。方法采用过表达miR-17-92基因的质粒转染包装细胞，并构建过表达miR-17-92基因簇的前列腺癌DU145-17-92细胞。采用xCelligence系统实时动态监测DU145-control和DU145-17-92细胞的生长能力，采用Ki-67抗原检测技术和原位末端转移酶标记技术（TUNEL）分别检测DU145-control和DU145-17-92细胞中细胞增殖和凋亡情况，采用流式细胞术分析DU145-control和DU145-17-92细胞的细胞周期，采用Western blot检测DU145-control和DU145-17-92细胞中凋亡相关蛋白和增殖相关蛋白的表达。结果xCelligence系统监测显示，从接种24 h后，DU145-17-92细胞的生长速度显著高于DU145-control细胞（P〈0.01）。细胞培养24、48、72 h后，DU145-control组的Ki-67阳性细胞率分别为（56.57±1.68）%、（85.48±0.26）%和（90.85±2.08）%，DU145-17-92组的Ki-67阳性细胞率分别为（73.64±0.68）%、（93.43±1.23）%和（97.36±0.86）%，两组仅在培养24 h时差异有统计学意义（P〈0.01）。细胞培养24、48、72 h后，DU145-control组的细胞凋亡率分别为（6.76±0.09）%、（14.51±0.86）%和（20.73±1.64）%，DU145-17-92组的细胞凋亡率分别为（1.86±0.15）%、（7.90±0.40）%和（4.92±0.48）%，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。Western blot检测显示，DU145-control和DU145-17-92细胞中，Bcl-2家族促凋亡蛋白（BIM）的表达水平分别为0.83±0.00和0.16±0.00, 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）蛋白的表达水平分别为0.91±0.00和0.13±0.00，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。过表达miR-17-92基因簇促进了蛋白激酶B（Akt）中丝氨酸473位点（p-Akt-473）的磷酸化，但对308位点（p-Akt-308）的磷酸化无明显影响。DU145-control和DU145-17-92细胞中磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）蛋白的表达水平分别为0.21±0.01和0.72±0.01，差异有统计学意义（P〈0.01）。结论过表达miR-17-92基因簇能显著影响DU145细胞的生长、增殖、凋亡和细胞周期等生物学特性，这与凋亡调控相关蛋白BIM和抑癌蛋白PTEN表达的下调有关，Akt和ERK信号通路的活化及凋亡相关蛋白表达水平的失调也起着重要的作用。

关键词： 胃癌细胞生长   西红柿   防治   B族维生素   细胞生物学   维生素C   胡萝卜素   抗氧化剂  

摘要： 西红柿中含有大量的维生素C、B族维生素和胡萝卜素，还含有丰富的抗氧化剂，常吃可以防止自由基对皮肤的破坏，具有非常好的美容抗皱效果。美国和意大利的科学家近期联合发表在《细胞生物学杂志》上的研究发现称，西红柿的提取物还能阻止胃癌细胞生长并抑制其恶性特征，帮助预防、治疗胃癌。

关键词： 东北林业大学   生命科学学院   美国国立卫生研究院   出国   分子生物学   发生与发展   细胞生物学   动物模型  

摘要： “出国那天，我就想，我要回来，不仅是回国，还要回到家乡哈尔滨。”在东北林业大学办公室，隋广超坚定地说。隋广超曾是美国维克森林大学医学院癌症生物学系副教授，美国国立卫生研究院（NIH）综合癌症研究中心的副教授，在美期间，主要利用分子生物学、细胞生物学和动物模型来探索癌症的发生与发展过程中的分子调控机制，他的研究将有助于攻克乳腺癌、前列腺癌、肺癌等。

关键词： 树突状细胞   micro-RNA   适应性免疫应答   抗原提呈细胞   固有免疫应答   抗原特异性   免疫学方面   目的基因   细胞因子   免疫防御  

摘要： 微小RNA（microRNA,miRNA）是一种小型、非编码RNA分子,通过作用于目的基因调控相应功能蛋白的表达从而参与各种生理反应。近年来众多文献报道了特异性miRNA在免疫学方面的作用,而树突状细胞（Dendritic cell,DC）作为重要的抗原提呈细胞（Antigen presenting cell,APC）,连接着固有免疫应答和适应性免疫应答。

关键词： 基因   p16   Ki-67抗原   免疫组织化学   细胞生物学  

摘要： 目的 探讨p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法对宫颈细胞学结果为不能明确意义的不典型鳞状细胞（ASCUS）和低级别鳞状上皮内瘤变（LSIL）患者的分流作用.方法 收集2014年4月至2015年2月宫颈液基细胞学结果为ASCUS（318例）或LSIL（102例）的420例患者资料,包括剩余细胞学样本、高危人乳头状瘤病毒（HPV）检测结果、活检结果和随访资料,采用p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法检测细胞学样本.以活检结果为参照,比较p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法和高危HPV检测法筛查宫颈癌前病变或宫颈癌[包括宫颈上皮内瘤变（CIN）2、CIN3、原位癌及浸润性癌,简称为CIN2＋]的灵敏度和特异度.结果 采用宫颈细胞学筛查CIN2＋时,p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法与高危HPV检测相比,灵敏度略低（84.2%比94.7%）,特异度较高（84.0%比53.9%）.在ASCUS患者中,p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法与高危HPV检测的灵敏度分别为82.6%和91.3%,特异度分别为88.8%和63.7%;在LSIL患者中,p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法与高危HPV检测的灵敏度分别为86.7%和100.0%,特异度分别为67.8%和20.7%.在＆lt;30岁患者和≥30岁患者中,p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法的特异度均较高（80.8%和84.5%）,而高危HPV检测的特异度明显较低,分别为42.3%和56.9%.结论 p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色对于筛查宫颈细胞学样本CIN2＋兼具较高的灵敏度和特异度,其特异度高于高危HPV检测,能有效分流细胞学ASCUS或LSIL中的高危人群.对于年龄〈30岁的女性患者,p16INK4a/Ki-67双免疫细胞化学染色法可能是一个潜在的细胞学联合筛查或初筛工具.

关键词： 学术期刊   浮世绘   葛饰北斋   富岳三十六景   画中   细胞生物学   日本关东   粗面内质网   光面内质网  

摘要： 著名的《富岳三十六景》是浮世绘大师葛饰北斋的代表作,描绘了日本关东各地远望富士山时的景色。可是当浮世绘加富士山的双重日本元素与生物学碰撞在一起的时候,会发生什么呢？日本分子生物学会发行的细胞生物学学术期刊Genesto Cells给出了他们的答案,这本封面独具特色的杂志,总是能不动声色地将浮世绘作品与生物学融合在一起。

关键词： 槲皮素   内皮祖细胞   内皮型一氧化氮合酶  

摘要： 目的:探讨槲皮素(quercetin,QUE)对大鼠骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能的影响与机制。方法:密度梯度离心法分离大鼠骨髓单个核细胞,条件培养基EGM-2诱导分化后,进行双荧光染色及免疫表型鉴定。将培养14 d的细胞用PI3K抑制剂BYL719(3μmol/L)和ERK抑制剂FR180204(15μmol/L)预处理2 h后,再加入不同浓度QUE(0、10、20、40、80和100μmol/L)处理。MTT法检测细胞活力,Transwell法检测细胞迁移,Western blot法检测AKT、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和ERK蛋白表达及磷酸化水平。结果:QUE呈浓度依赖性提高EPCs活力,促进EPCs迁移;PI3K抑制剂BYL719能抑制QUE诱导的EPCs活力和迁移能力,ERK抑制剂FR180204能抑制QUE诱导的EPCs活力,而对EPCs迁移能力并没有影响。QUE能激活AKT、eNOS和ERK蛋白;BYL719能同时抑制AKT和ERK蛋白的激活,FR180204仅能抑制ERK的激活,而未能抑制AKT的激活,但两者对QUE诱导的eNOS蛋白表达均有抑制作用。结论:QUE能部分通过PI3K/AKT/eNOS和ERK/eNOS信号转导通路,提高EPCs活力及迁移能力,促进EPCs发挥心血管保护作用。

关键词： 人肠癌细胞   小干扰RNA   LoVo   Lipofectamine   迁移能力   反转录-聚合酶链反应   Transwell   细胞生物学功能  

摘要： 我们探讨TUG1在多株人肠癌细胞中表达情况及其与肠癌细胞生物学功能的关系。一、材料与方法1．材料：肠癌细胞株HCT116、HCT8、HT29、LS174T、LoVo和SW620购自美国典型菌种保藏中心（ATCC）。Lipofectamine 2000购自Invitrogene公司；针对TUGl的小干扰RNA（siRNA）及无关序列由深圳吉玛公司合成；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）仪购自美国ABI公司；细胞计数试剂盒（CCK-8）购自上海碧云天生物技术公司；Transwell试剂盒购自B＆D公司。

关键词： 细胞生物学   细胞形状   组织工程   生物材料   细胞排列   微接触印刷技术   干剥离技术   沟槽阵列   微柱阵列   微孔阵列   微波阵列   纤维支架   国家自然科学基金  

摘要： 背景:精确控制细胞形状、实现细胞体外排列对细胞生物学、组织工程和再生医学研究及应用均有极其重要的意义,而目前对控制细胞几何形状和诱导体外排列的方法缺乏系统性的研究和表述。目的:总结并讨论表面化学修饰技术、表面拓扑学改造技术加工制备细胞生长基底的方法,以及实现细胞形状和排列控制的可行性和最新进展。方法:作者检索1995至2017年百链云数据库和Pub Med数据库中与微加工方法对细胞形状和体外排列影响相关的文献,并进行系统整理、归纳总结和分析。结果与结论:随着微纳米加工技术的发展和对细胞生物学行为的深入研究,表面化学修饰、表面拓扑学改造、纤维支架等方法逐步被建立,以实现细胞形状的精确控制和体外排列。表面微图案化、微柱、微孔阵列等拓扑结构能够精确控制细胞几何形状,而基底表面拓扑形貌对细胞排列占据更重要的支配作用,可将基底表面化学修饰作用和拓扑形貌作用相结合更好地实现细胞体外排列。合适的基底结构可用于精确控制细胞的形状、调控干细胞的分化抑或诱导细胞的定向排列、促进细胞融合和分化等。

关键词： Lemur酪氨酸激酶3   A549   增殖   迁移   周期  

摘要： 目的探讨Lemur酪氨酸激酶3(LMTK3)在人肺腺癌细胞系A549中表达下调后对细胞生物学功能的影响。方法采用shRNA(small hairpin RNA)技术干扰A549细胞中LMTK3的表达并用RT-PCR对其进行鉴定,采用细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验及流式细胞术检测LMTK3对肺癌细胞增殖、迁移、细胞周期及凋亡等生物学行为的影响。结果通过shRNA技术成功构建LMTK3表达下调的肺癌细胞系shLMTK3及对照组Scramble。细胞增殖实验结果显示,在培养24、48、72h后,shLMTK3组细胞的增殖水平(0.305±0.018,0.461±0.044,0.74±0.029)明显低于Scramble组(0.354±0.011,0.551±0.027,0.881±0.028),差异均有统计学意义(t分别为5.24,3.91,7.70,P均<0.01);划痕试验结果表明,划痕24 h后的shLMTK3组细胞相对倍数(0.51±0.096)明显低于Scramble组(1.00±0.029),差异有统计学意义(t=4.81,P<0.01);Transwell迁移实验结果表明,shLMTK3组迁移到膜下的细胞数[(161±9.29)个]明显低于Scramble组[(308.66±17.60)个],差异有统计学意义(t=7.42,P<0.01);细胞周期检测结果显示,抑制LMTK3的表达可将细胞阻滞于G1期(t=4.35,P<0.05);细胞凋亡试验显示,抑制LMTK3的表达对A549细胞的凋亡率无影响。结论下调A549细胞中LMTK3的表达可明显抑制细胞的增殖及迁移能力,提示肺癌细胞异常表达LMTK3参与调节其肿瘤生物学行为。