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关键词： 双氢青蒿素   犬   乳腺肿瘤   侵袭性  

摘要： 犬乳腺肿瘤是犬类的一种常见肿瘤性疾病,目前治疗多为手术结合放、化疗法,但结果多易转移复发。双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)是中药提取物,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。为探求双氢青蒿素是否影响犬乳腺肿瘤细胞的侵袭及其影响机制,本试验取对数增长期状态相同的犬乳腺肿瘤细胞CHMm,使用低(5μM)、中(10μM)、高(20μM)浓度DHA处理并分别培养24,48,72h。收集各组细胞,使用CCK-8法检测细胞活性;利用细胞划痕试验检测细胞迁移性;利用transwell检测细胞侵袭性;利用CCK-8检测细胞毒性。结果表明:DHA对CHMm细胞抑制率呈明显药物浓度依赖性。细胞划痕试验检测细胞迁移速率结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,低、中、高试验组对CHMm细胞迁移性抑制作用效果极显著(p<0.01)。各组组间比较,DHA对细胞迁移性抑制影响差异极显著(p<0.01)。DHA对CHMm细胞迁移性抑制呈明显的药物时间、浓度依赖性。细胞侵袭试验检测细胞侵袭性结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,低、中、高试验组穿透基底膜着色细胞个数显著增多,说明DHA对CHMm细胞侵袭性抑制效果极显著(p<0.01),组间比较,不同DHA作用浓度效果差异显著(p<0.05)。相同DHA作用浓度,随着培养时间的增加,细胞侵袭性降低,效果显著(p<0.05)。细胞毒性结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,低、中、高试验组对CHMm细胞抑制性影响效果极显著(p<0.01)。各组组间比较,DHA对细胞抑制性影响差异极显著(p<0.01)。综上所述,DHA对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭作用具有显著抑制作用,且随着DHA作用浓度增加和时间增长,抑制作用增强,呈浓度时间依赖性。

关键词： 宫颈癌   成纤维生长因子受体4   siRNA   Hela细胞   顺铂  

摘要： 目的:探讨沉默成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)对宫颈癌Hela细胞生长、转移以及顺铂(DDP)化疗敏感性产生的影响。方法:培养宫颈癌Hela细胞系并分为5组:空白对照组、阴性对照组、FGFR4-siRNA组、DDP组和FGFR4-siRNA+DDP组,设计合成靶向FGFR4的siRNA转染FGFR4-siRNA组和FGFR4-siRNA+DDP组细胞,而后对DDP组和FGFR4-siRNA+DDP组加入化疗药物DDP(10ug/mL)。分别于培养24h、48h和72h后MTT法检测各组细胞生长抑制率,流式细胞仪检测凋亡率;PCR检测FGFR4以及肿瘤细胞生长、转移相关基因VEGF和MMP2的mRNA水平,Western blot检测其蛋白表达水平。结果:沉默FGFR4基因后,与对照组相比,FGFR4-siRNA组细胞增殖活性下降,生长抑制率和细胞凋亡率上升,FGFR4几乎不表达,VEGF和MMP2表达水平下降;FGFR4-siRNA+DDP组细胞生长抑制率和凋亡率高于FGFR4-siRNA组和DDP组,FGFR4几乎不表达,VEGF和MMP2表达水平均低于FGFR4-siRNA组和DDP组。结论:沉默FGFR4基因的表达能够抑制宫颈癌细胞生长,促进细胞凋亡和提高对顺铂的化疗敏感性,下调VEGF和MMP2的表达抑制癌细胞的侵袭转移能力,可以作为宫颈癌新的靶向治疗目标之一。

关键词： 骨髓间充质干细胞   促炎因子   抑炎因子   肿瘤坏死因子α  

摘要： 目的:探讨不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,倒置显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测BMSCs表面标记物;分别以10、100、1000 ng/mL的TNF-α完全培养液预处理P3代BMSCs,并设置仅含培养基的空白对照组,24 h后采用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中IL-6、IL-10的表达水平;胰酶消化细胞,用Presto Blue法检测10、100、1000 ng/mL TNF-α完全培养液预处理BMSCs后细胞增殖活性。结果:ELISA检测结果显示,与对照组相比,各浓度TNF-α干预组IL-6、IL-10均有不同程度升高,差异有统计学意义(P<0.05),且1000 ng/mL TNF-α干预组IL-10表达水平最高,其浓度为170.2±11.9 pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);100 ng/mL TNF-α干预组IL-6表达水平最高,其浓度为144.0±18.6 pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Presto Blue检测结果显示,与对照组相比,10、100、1000 ng/mL TNF-α干预组荧光值均增高,差异有统计学意义(P<0.05),但组间荧光值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:10~1000 ng/mL TNF-α可促进BMSCs的增殖,且随着TNF-α浓度的升高,BMSCs分泌促炎因子IL-6的能力降低,分泌抑炎因子IL-10的能力升高。

关键词： 细胞生物学   多模块化   医学研究生   教学改革  

摘要： 《细胞生物学》作为一门专业基础课,是生命科学领域发展迅速的前沿学科,与各基础和临床学科的教育教学环节密切相关,在医学研究及临床应用方面发挥了重要作用。以解决本校医学研究生教学过程中"多专业、多类型、多层次、少课时"的问题为出发点,建立了包含基础知识、研究热点、临床案例和实验技能的多模块化《细胞生物学》教学内容和综合性成绩评价体系。通过问卷调查的方式,对此次教学改革在满意度、授课内容、考核方式等方面进行评价,以期进一步完善教学体系、提高教学效果。

关键词： 案例导向学习   细胞生物学   教学  

摘要： 为了更好地实现教学效果最大化,激发医学生对细胞生物学的兴趣与热情,培养既有专业扎实的知识基础,又有科研兴趣的研究实干型人才,在教学中必须进行教学模式的创新,发现以案例为基础的CBL教学模式更能适应临床医学教学,弥补了传统医学教学方法在现代医学高速发展情况下的不足,但是由于属于比较浅层次的实践和应用,CBL模式在医学细胞生物学教学中的应用还存在一些值得讨论的问题。

关键词： 预实验   细胞生物学实验   教学改革   作用  

摘要： 预实验是正式实验开始之前的一次预演,是对正式实验可行性的一次检阅。它具有小规模和探索性的特点,对正式实验条件的建立和优化、仪器设备的合理配置、实验影响因素的排查、教学内容的完善都起着重要的作用。作者结合自己多年从事《细胞生物学》实验课的教学经历,对预实验在实验教学中的作用进行总结,诣在充分重视预实验对提高实验教学质量的重大意义。

关键词： 形成性评价   细胞生物学   教学效果   留学生  

摘要： 目的:探讨形成性评价在医学留学生细胞生物学教学中的应用效果。方法:以潍坊医学院2014级留学生为研究对象,设形成性评价为改革组,传统的终结性评价为对照组,通过分析期末考试成绩及调查问卷问题,对比两组的教学效果。结果:改革组平均成绩较高。调查问卷结果发现,形成性评价能够调动学生的积极性、提高学生的学习效率、提高分析问题解决问题的能力。结论:形成性评价能够有效提高课程教学效果,更加适合留学生教学。

关键词： 鼻粘膜   间质干细胞移植   脊髓损伤   组织工程  

摘要： 背景:干细胞应用于脊髓损伤的报道很多,但是这些细胞存在免疫排斥、取材困难、纯化不易等各方面的缺陷,而鼻黏膜间充质干细胞无上述缺点,将其应用于临床脊髓损伤患者疗效分析目前尚无相关报道。目的:观察人鼻黏膜间充质干细胞的生物学特性,同时进行自体鼻黏膜间充质干细胞移植治疗晚期不完全性脊髓损伤的临床疗效观察与评价。方法:①取材、培养鼻中隔偏曲手术患者的鼻黏膜间充质干细胞,扫描及透射电子显微镜观察细胞的超微结构,并在体外对其进行多向诱导分化;②经医学伦理委员会同意后,取材培养脊髓损伤患者的鼻黏膜,通过腰椎穿刺术注射到8例晚期不完全性脊髓损伤患者椎管内,细胞移植1-3次,前后移植间隔时间为5-7 d,每次移植细胞总数约为5×107个。细胞移植治疗前及随访6个月时按照国际截瘫医学会ASIA评分标准进行评分。结果与结论:①鼻黏膜间充质干细胞在光镜下形态以梭形为主,并呈现出放射状排列,细胞免疫荧光表达STRO-1;②流式细胞学检测显示高表达间充质干细胞表面标记物CD73、CD90、CD105,不表达造血干细胞标记物CD34、CD45,且细胞纯度达97%以上;③鼻黏膜间充质干细胞在扫描及透射电子显微镜下可见短粗的微绒毛及不同的细胞生长形态;④鼻黏膜间充质干细胞还具有向骨组织、脂肪组织、干细胞球及神经元分化的潜能;⑤经自体血清培养的鼻黏膜间充质干细胞移植后,除1例患者住院期间无明显神经功能改善外,其余患者均有不同程度的神经功能恢复且无任何不良副反应;⑥结果表明,鼻黏膜间充质干细胞是组织工程细胞修复中一种新型的种子细胞来源;自体鼻黏膜间充质干细胞移植治疗脊髓损伤患者能达到一定的治疗效果,具有临床应用价值。

关键词： ZNF300基因   巨核细胞分化   细胞生物学  

摘要： 目的:研究ZNF300对巨核细胞分化和增殖的影响。方法:通过公共数据分析及定量RT-PCR方法检测ZNF300表达水平以研究ZNF300与白血病及巨核细胞分化的相关性;使用慢病毒和逆转录病毒感染介导过表达ZNF300,使用流式细胞术、MTT比色法、集落形成试验分析K562细胞和原代小鼠骨髓细胞向巨核细胞分化、增殖的情况;应用细胞浆和细胞质蛋白分离结合蛋白印迹实验方法检测ZNF300亚细胞定位;并应用双荧光素酶试验和用ChIP-qPCR技术探讨ZNF300调控的靶基因。结果:ZNF300表达水平伴随巨核细胞的分化而升高;TPA诱导后巨核细胞分化的表面标记CD41、CD61在过表达ZNF300的K562细胞明显比对照细胞增多。同时,ZNF300显著降低K562细胞增殖率、阻滞G1ME细胞周期并降低小鼠骨髓细胞集落形成单位。ZNF300蛋白主要位于细胞核内,能够结合在C-MYC基因的启动子区并增强启动子活性。结论:过表达ZNF300可促进巨核细胞分化。

关键词： 细胞生物学   中国   学会   学术   国际会展中心   国家重点实验室   厦门大学   生命科学学院  

摘要： 为促进我国细胞生物学领域研究人员的交流与合作,推动中国细胞生物学学科的发展,由中国细胞生物学学会主办,厦门大学生命科学学院、厦门市科学技术协会、上海博生会展有限公司共同承办、厦门市海沧区人民政府、细胞应激生物学国家重点实验室（厦门大学）、细胞信号网络协同创新中心共同协办的盛会-“中国细胞生物学学会2017年全国学术大会·厦门”于2017年9月26-29日在厦门国际会展中心举行,会议主题为：探索细胞,创新未来.