关键词:
乳腺肿瘤
核糖体合成调控因子1
RNA
小分子干扰
细胞增殖
细胞凋亡
肿瘤转移
摘要:
目的:研究沉默核糖体合成调控因子1(regulator of ribosome synthesis 1,RRS 1)基因表达对乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨可能的作用机制。方法:实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测乳腺癌BT549细胞及正常乳腺HMEC细胞中RRS1 mRNA及蛋白的表达量。构建携带有RRS1-shRNA的慢病毒表达载体,并感染BT549细胞。分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定RRS 1基因的沉默效率。MTT法、FCM法、DAPI染色法以及Transwell小室法分别检测沉默RRS 1基因表达后BT549细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的变化,并再次采用蛋白质印迹法检测对BT549细胞中凋亡相关蛋白p53和小鼠双微体2同源物(mouse double minute 2 homolog,MDM2)表达的影响。结果:乳腺癌BT549细胞中RRS1 mRNA及蛋白的表达水平均高于其在正常乳腺HMEC细胞中的表达水平(P值均<0.01)。RRS1-shRNA转入BT549细胞后,RRS1 mRNA和蛋白的表达水平均较对照组明显降低(P值均<0.01)。RRS 1基因沉默后,BT549细胞的增殖活力明显下降(P<0.01),细胞周期被阻滞在G2期(P<0.01),细胞早期凋亡率明显增高(P<0.05),迁移及侵袭能力均明显降低(P值均<0.05),凋亡相关蛋白p53的表达水平明显上调(P<0.05),而MDM2蛋白的表达水平明显下调(P<0.05)。结论:RRS 1基因在乳腺癌细胞中高表达;RRS 1作为一个新发现的乳腺癌相关基因,与乳腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭功能相关。