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关键词： 人直肠癌细胞   STIM1基因   细胞增殖   凋亡   迁移  

摘要： 目的研究STIM1基因干扰对人直肠癌SW837细胞增殖、凋亡及体外迁移的影响,以期为直肠癌临床防治及药物研发提供新的靶点。方法采用STIM1干扰慢病毒转染人直肠癌SW837细胞,实时定量PCR(q RT-PCR)和Western blot验证STIM1的干扰效果,分别采用MTT法和划痕试验检测细胞增殖及迁移情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 STIM1干扰慢病毒转染后,干扰组SW837细胞STIM1基因m RNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05)。与对照组比较,干扰组细胞增殖、体外迁移能力均显著减弱(P<0.05);干扰组SW837细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.05),STIM1干扰促进SW837细胞凋亡与上调caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达水平有关。结论STIM1基因干扰可抑制人直肠癌SW837细胞的增殖活性和体外迁移能力,并促进其凋亡。

关键词： 医学细胞生物学   教学资源库   医学院校  

摘要： 为了给师生提供优秀的教学和学习参考资料。文章从构建教学资源库的必要性出发,从素材的类型、甄选原则、甄选途径及质量保障、素材的规划处理、整合方式及发布途径等方面阐明如何构建医学细胞生物学课程的优秀教学资源库。

关键词： TROP2基因   胰腺癌   NOTCH1信号通路  

摘要： 目的探讨抑制胰腺癌组织中肿瘤相关钙信号传导因子2(TROP2)表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法选取胰腺癌组织和相应的癌旁组织各46例。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测并分析胰腺癌组织和癌旁组织中TROP2基因的m RNA表达情况;将人胰腺癌PANC-1细胞分为对照组、NC-si RNA组和TROP2-si RNA组,培养48 h后,采用蛋白质印迹法检测并分析TROP2、cleaved caspase 3、NOTCH1和HES1蛋白表达情况;采用CCK8法和流式细胞仪分别检测并分析细胞的增殖和凋亡情况。结果在胰腺癌组织中TROP2基因的m RNA表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P﹤0.01)。对照组、NC-si RNA组和TROP2-si RNA组中,TROP2蛋白表达、细胞存活率、细胞凋亡率及cleaved caspase 3、NOTCH1、HES1蛋白表达比较,差异均有明显统计学意义(P﹤0.01);TROP2-si RNA组TROP2蛋白表达、细胞存活率及NOTCH1、HES1蛋白表达均明显低于对照组,细胞凋亡率和cleaved caspase 3蛋白表达均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01),而NC-si RNA组TROP2蛋白表达、细胞存活率、细胞凋亡率及cleaved caspase 3、NOTCH1、HES1蛋白表达与对照组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论抑制胰腺癌组织中TROP2基因表达,可以明显降低肿瘤细胞的增殖能力,促进细胞凋亡,其机制与阻断NOTCH1信号通路有关。

关键词： 细胞生物学实验   多元化考核评价体系   创新能力  

摘要： "细胞生物学"是一门理论与实践并重的专业基础课程,也是当前发展迅速的学科之一。为配合细胞生物学理论课程的不断深化,促进学生实践动手能力与创新能力的培养,对细胞生物学实验教学进行改革探索是非常必要的。实验教学是人才培养的重要环节,也是高校培养学生创新能力的重要手段。结合山东农业大学的具体情况,从大学生早期科研素质培养、实验技能规范操作、教学模式改善及多元化考核评价体系等方面对细胞生物学实验教学进行深入的探索与实践,以激发学生对生物学实验的兴趣,提高实验教学质量,培养出更多的新世纪创新型人才。

关键词： 生命科学   中国科协   科学学会   联合体   科学研究所   四川农业大学   细胞生物学   中国科学院  

摘要： 为推动生命科学领域的创新发展,充分展示和宣传中国生命科学领域的重大科技成果,中国科协生命科学学会联合体组织22家成员学会推荐,经生命科学领域同行专家审核与评选,向社会公布了2017年度“中国生命科学十大进展”评选结果：水稻新型广谱抗病遗传基础发现与机制解析（四川农业大学陈学伟研究组）、人Piwi基因突变致男性不育（中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所刘默芳研究组和上海市计划生育科学研究所施惠娟研究组合作）。

关键词： Eps8基因   慢性髓系白血病   K562细胞   慢病毒介导RNA干扰技术   AKT/m   TOR  

摘要： 目的:探索靶向沉默Eps8(表皮生长因子受体通路底物8)基因对人慢性髓系白血病K562细胞生物学活性的影响及其可能的分子机制。方法:采用慢病毒介导RNA干扰技术靶向沉默K562细胞中Eps8基因。实验分组为:空白对照(blank control)组、Eps8-shRNA靶向沉默(K562-shRNA)组和阴性对照(K562-NC)组。在荧光显微镜下观察转染效率;应用RT-PCR法和Western blot法分别从mRNA转录水平和蛋白水平验证Eps8基因沉默效率;台盼蓝拒染法和MTT法检测细胞体外增殖能力变化;流式细胞术检测细胞凋亡率变化;甲基纤维素克隆形成实验验证细胞集落形成能力;Western blot法检测沉默Eps8基因后AKT/mTOR及其下游信号通路磷酸化蛋白的表达情况。结果:成功建立稳定低表达Eps8的K562细胞株(K562-shRNA)和阴性对照细胞株(K562-NC)。与空白对照组和K562-NC组相比,沉默Eps8基因后K562-shRNA组细胞Eps8转录和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);体外培养48 h后,K562-shRNA组细胞增殖能力明显下降(P<0.05);K562-shRNA组细胞凋亡率为(5.81±0.39)%,空白对照组和K562-NC组细胞凋亡率分别为(1.02±0.70)%和(1.19±0.15)%,提示K562-shRNA组细胞凋亡率与空白对照组和K562-NC组之间有显著性差异(P<0.05),而空白对照组和K562-NC组之间没有显著性差异(P>0.05);体外甲基纤维素半固体培养10 d后,K562-shRNA组细胞集落形成能力与空白对照组和K562-NC组相比有显著性差异(P<0.05)。沉默Eps8基因可下调K562细胞p-AKT(308)和p-AKT(473)的表达(P<0.05),而t-AKT表达水平没有明显变化。另外,沉默Eps8基因可下调AKT下游的pmTOR和p-PRAS40蛋白的表达(P<0.05),而总mTOR和总PRAS40的表达水平没有明显变化。结论:利用慢病毒介导的RNA干扰技术靶向沉默Eps8基因能够抑制K562细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与AKT/mTOR及其下游信号通路下调有关。

关键词： 结直肠癌   肿瘤浸润T淋巴细胞   中心记忆T淋巴细胞   AKT抑制剂  

摘要： 目的探讨AKT抑制剂对结直肠癌肝转移肿瘤浸润T淋巴细胞生物学活性的影响。方法收集郑州大学附属肿瘤医院普外科2016年1-12月间收治的可手术的结直肠癌肝转移患者的肿瘤组织,密度梯度离心法分离获得组织中的淋巴细胞和肿瘤细胞,采用流式细胞学方法检测AKT抑制剂对肿瘤浸润T淋巴细胞增殖,分化,细胞表型及功能的影响。结果 AKT抑制剂组能增加中心记忆T淋巴细胞的比例而不影响肝转移癌浸润T淋巴细胞的增殖,自体肿瘤细胞刺激诱导出的分泌IFN-γ的T细胞比例明显高于IL-2组。结论在TIL培养体系中加入AKT抑制剂可以增强中心记忆T淋巴细胞的增殖及功能,而不影响CD8+T细胞的数量,这对于肿瘤过继免疫治疗方案的改进具有重要的参考意义。

关键词： 多学科知识融合   医学细胞生物学   教学改革  

摘要： 医学细胞生物学是在医学各领域广泛应用的一门基础学科。西藏大学医学院通过整合教学资源,提炼交叉学科教学知识点;寓教于乐,开展主题教学活动;构建丰富的多媒体素材库,建立导师-小组制团队学习模式以及科学的考核评价体系等,探索多学科知识融合下的医学细胞生物学教学改革,促进学生知识、思维和情感的全面发展。

关键词： 微课   教学   实践创新能力   《细胞生物学实验》  

摘要： 微课作为"互联网+"时代的新型教学模式,近年来已经越来越广泛地被应用于各种不同的课程体系。微课与《细胞生物学实验》教学的融合,可以帮助学生在掌握重难点知识点的前提下,动手实践,有助于充分吸收理论知识,提高学习效率。此外,教师学习掌握微课的设计开发与教学应用也是对新兴教学模式的响应与实践,对于学生的优质教育和个性化发展具有重要的理论和现实意义。

关键词： 医学细胞生物学   教学改革   改革的基点   教学思路  

摘要： 在医学细胞生物学教学中,改变教师的教学理念、教学思路和侧重点是改革的基本点,在保持知识的全面性和完整性的同时,培养学生独立学习、整合学习资源的能力,从而提高教学质量。