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关键词： 胰腺肿瘤   细胞增殖   细胞凋亡   肿瘤侵润   RNA干扰  

摘要： 目的探讨干扰Sema4D基因的表达对胰腺癌细胞生物学的影响。方法设计合成Sema4D-siRNA,转染到人胰腺癌细胞系中,将实验分为3组,转染siRNA组、阴性对照组(即转染非特异性对照组)﹑空白对照组(未经任何处理的胰腺癌细胞)。转染48 h后利用RT-q PCR检测转染前后Sema4D mRNA表达的变化,转染72 h后利用Western-Blot的方法检测转染前后Sema4D蛋白表达的变化;采用四甲基偶氮唑蓝显色法观察转染后细胞生长变化;Transwell小室侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变;采用流式细胞技术检测肿瘤细胞凋亡的变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析比较,进一步两两比较采用LSD-t检验法。结果转染Sema4D-siRNA 48 h后,转染siRNA组Sema4D mRNA的表达明显低于阴性对照组和空白对照组,3组比较差异有统计学意义(F=421.990,P<0.001)。转染Sema4D-siRNA 72 h后,转染siRNA组Sema4D蛋白明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义(F=27.074,P=0.002 3)。转染siRNA组48、72、96 h的细胞生长速度明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为15.314、62.255、223.493,P值分别为0.004、<0.001、<0.001)。转染siRNA组穿膜细胞个数明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义(42.0±5.9 vs 60.0±6.1 vs 61.0±4.6,F=37.21,P=0.000 4]。转染siRNA组穿膜细胞凋亡率明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义[(16.57±0.31)%vs(9.50±0.45)%vs(9.90±0.61)%,F=26.75,P=0.007 4]。结论 siRNA能够下调Sema4D基因在胰腺细胞中的表达,可以抑制胰腺癌细胞增殖,使胰腺癌细胞侵袭能力明显下降,凋亡率下降。

关键词： 医学生   第二课堂   细胞生物学   创新  

摘要： 医学生创新能力的培养是时代发展的要求,针对现有教学方式的不足,在细胞生物学第二课堂的教学中,进行了学生批判性学习文献,学生自主实验,参与科室课题研究等有特色的教学设计和实施.实践证明,此教学活动不仅拓展了第一课堂的内容,锻炼了学生的动手技能,而且激发了学生的独立思考潜能,提升了学生的科研素质和创新能力.

关键词： 细胞生物学   细胞自噬   蛋白质机器   多细胞生物自噬   自噬启动   代谢胁迫   自噬晚期   自噬与人类疾病  

摘要： 细胞自噬是进化保守的,基于溶酶体的胞内降解途径,对维持细胞的稳态平衡有重要作用。自噬参与生物体发育、免疫反应、代谢调节、细胞凋亡和衰老等多种过程。自噬异常与神经退行性疾病、肿瘤等的发生密切相关。自噬是当今生命科学领域的研究热点之一。1992年大隅良典实验室利用酵母遗传筛选鉴定了15个自噬核心基因,也因此获得2016年度诺贝尔生理学或医学奖。当前自噬领域研究的重点集中在酵母以及通过酵母遗传筛选获得的核心蛋白质机器。然而单细胞酵母、单一诱导条件为出发点的筛选和研究具有明显的局限性。本文将从自噬过程的细胞、组织和发育阶段的特异性;多细胞生物中具有重要生理意义的自噬新蛋白质机器和新通路;自噬核心蛋白质机器的组装、蛋白质复合体的形成及多种蛋白质的翻译后修饰等高层调控体系;自噬晚期事件以及核心蛋白质机器;细胞面对不同的代谢胁迫条件会启动的不同的自噬通路等几个方面探讨自噬领域的研究方向和突破点,并讨论自噬领域研究的策略和方法。

关键词： 血管生成   内皮祖细胞   生物学性状   肝癌   脾脏  

摘要： 目的:以正常人为对照探讨内皮祖细胞在肝癌患者中组织学分布的差异性、分析其表面标志物表达情况、细胞形态变化、增殖和管形成能力改变。方法:密度梯度离心、免疫磁珠贯序分离获取单个核细胞,用条件分化培养基进行分化刺激培养,直到分化成熟为内皮细胞。流式检测其生物标志物变化情况。分化潜能,倍增能力,功能状况。结果:单个核细胞经条件诱导培养可定向分化为内皮祖细胞,表现出部分血管内皮的功能特征。肝癌患者骨髓、外周血与正常人无差异,脾内内皮祖细胞系分化明显增强。结论:来源于骨髓单个核细胞分布于多个组织中,可定向分化为内皮祖细胞,进而成熟为内皮细胞,此过程干/祖细胞的生物学特征逐渐降低直至消失。肝癌患者脾脏为此过程提供了最佳的分化诱导内环境。

关键词： 细胞生物学   实验教学   教学改革   人才培养  

摘要： 大学本科生物相关专业课程中,细胞生物学属于重要的专业基础课。该课程的相关实验教学内容对培养高素质综合型人才具有举足轻重的作用。针对综合大学生命科学细胞生物学传统实验教学的不足,通过改进实验教学内容,引入创新性实验,改变教学模式,加强教学梯队建设,提高实验教学条件等方面进行了实验教学改革探讨,以期培养学生的创新意识及基本的科学素养,在实践中摸索出提高大学本科细胞生物学实验教学的方法措施。

关键词： 肝肿瘤   HepG2细胞   血管内皮细胞生长因子165b   血管内皮细胞生长因子165   细胞增殖   细胞迁移  

摘要： 目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA-VEGF165b)。MTT法检测各组HepG_2细胞生存率,RT-PCR法和Western blotting法检测HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165 mRNA和蛋白表达水平,Transwell小室法检测HepG_2细胞迁移能力。结果:与空白组比较,对照组HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。与空白组比较,PcDNA-VEGF165b组细胞中VEGF165bmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。空白组和对照组细胞生存率比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白组和对照组比较,PcDNAVEGF165b组细胞生存率有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验,空白组和对照组细胞迁移率比较差异无统计学意义(P<0.05);与空白组和对照组比较,PcDNA-VEGF165b组HepG_2细胞迁移率明显降低(P<0.05)。结论:VEGF 165b能抑制VEGF165基因和蛋白的表达,VEGF165b对肝癌细胞增殖无明显影响,但可降低肝癌细胞的迁移能力。

关键词： 脂肪酸结合蛋白质类   RNA干扰   肝肿瘤   细胞周期   细胞凋亡   Bel-7402细胞   人参川穹嗪  

摘要： 目的探讨通过siRNA干扰技术沉默表皮脂肪酸结合蛋白-5(FABP-5)基因表达对人肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响。方法以人肝癌Bel-7402细胞为研究对象,根据FABP-5mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染Bel-7402细胞。将人肝癌Bel-7402细胞分为FABP-5siRNA组、阴性对照组、空白对照组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FABP-5基因的表达;CCK8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术检测各组细胞周期和凋亡的变化情况;细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力;MTT法观察FABP-5基因沉默后Bel-7402细胞对人参川穹嗪的敏感性。结果 RT-PCR和Western blot显示,FABP-5 siRNA组较阴性对照组和空白对照组的FABP-5 mRNA和蛋白表达都明显下降;FABP-5 siRNA组细胞的生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01),增殖、侵袭能力显著下降(P<0.05);FABP-5 siRNA组细胞对人参川穹嗪的敏感性显著增强(P<0.05)。结论特异性沉默FABP-5基因表达能够降低肝癌细胞的侵袭能力,抑制细胞的增殖,将细胞周期阻滞于G_0/G_1期,使其凋亡显著增加。

关键词： 磷酸戊糖途径   T细胞   记忆性   机制   中国医学科学院   代谢   糖原   细胞生物学  

摘要： 中国医学科学院基础医学研究所黄波教授团队揭示了T细胞记忆形成与维持的关键机制,相关研究结果发表于《自然-细胞生物学》.活化的CD8＋T细胞高效杀灭病毒感染的细胞以及肿瘤细胞,其发挥效应后,极少数T细胞存活下来,转变成为记忆性的T细胞,

关键词： 细胞生物学   教学内容   教学模式   考核方式  

摘要： 21世纪是生命科学的世纪,在近几十年取得了迅猛的发展,为了培养新世纪创新型人才,需要加强细胞生物学等基础课程的教学。当前高校细胞生物学的教学普遍遵循前人的教学模式和教学内容,已经很难适应学科知识的交叉和新内容的更新,因此有必要对细胞生物学的教学进行改革和补充。本文从教学内容、教学模式和考核方式等几方面入手,提出了高校细胞生物学教学改革策略。

关键词： 间充质干细胞   牙龈干细胞   分化   组织再生  

摘要： 间充质干细胞(MSC)可从多种人体组织中分离获得,具有自我更新和多向分化的潜能。目前已证实,牙龈组织中也存在MSC,即牙龈干细胞(GMSC)。GMSC易于分离获得,表型稳定,增殖速度快,体外长期培养时还能维持正常的核型和端粒酶活性,日益成为组织工程和再生医学研究的干细胞来源。本文就其分离鉴定、生物学特性、分化能力等方面的研究进展作一综述。