教学课程资源库 更多>>

关键词： SCID小鼠   淫羊藿提取物   急性髓系白血病   细胞周期   白细胞  

摘要： 目的观察淫羊藿提取物对急性髓系白血病SCID模型小鼠细胞生物学特性的影响。方法 SCID小鼠共60只,随机选取其中的50只,采用腹腔注射对数生长期HL-60细胞株于经环磷酰胺预处理的SCID小鼠以建立急性髓系白血病SCID小鼠模型,4周后随机均分为模型组、阿糖胞苷组、观察1组、2组和3组,另10只正常小鼠设为空白对照组。观察1组、2组和3组分别用淫羊藿提取物10、5、2.5 m L/kg灌胃治疗5周,模型组和空白对照组灌胃等体积0.9%氯化钠注射液5周,阿糖胞苷组尾静脉注射阿糖胞苷。在治疗第5周时尾静脉采血,采用人工法计数外周血血象及分类;采用Western blotting法检测同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)和多聚腺苷二磷酸核糖多聚酶(PARP)蛋白表达;流式细胞学检测HL-60细胞膜CD13和CD71表达率及细胞各周期细胞百分率。结果观察2组、3组外周血白细胞、淋巴细胞和HL-60细胞总数明显降低,中性粒细胞升高,PARP蛋白表达量、CD13和CD71阳性表达率明显下降,PTEN蛋白表达量增加,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组HL-60细胞均被阻滞于G_1期,且G_1和S期细胞百分率呈浓度效应关系。结论淫羊藿提取物有与阳性药阿糖胞苷相似的药理作用,在体内对急性髓系白血病HL-60细胞株有一定的抑制作用,其机制可能通过下调CD13和CD71,裂解PARP以诱导急性髓系白血病细胞凋亡,增强PTEN蛋白表达并促使细胞阻滞于G_1期,从而发挥抑制白血病细胞的增殖作用。

关键词： 肝癌   肿瘤浸润淋巴细胞   蛋白激酶B抑制剂   中央记忆型T细胞  

摘要： 目的探讨蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)抑制剂对肝癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)生物学活性的影响。方法肝癌患者4例,取其手术切除肿瘤组织标本密度梯度离心法分离TIL,并分为白细胞介素(interleukin,IL)-2组(6 000u/mL IL-2)和Akt抑制剂组(1mmol/L Akt抑制剂+6 000u/mL IL-2),培养第10天,2组均加入抗CD3抗体,继续原培养液培养20d。依据细胞增殖倍数绘制生长曲线检测TIL增殖活性;流式细胞法检测2组T淋巴细胞亚型及TIL分泌干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的能力;ELISA法检测TIL培养上清液中IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及IL-10水平。结果 Akt抑制剂组与IL-2组TIL数目在抗CD3抗体刺激前(培养第5、10天)、刺激后(培养第15、20、25、30天)比较差异均无统计学意义(P>0.05);培养第5、10、15、20、25、30天,Akt抑制剂组中央记忆型T细胞占CD8^+T淋巴细胞比率[(9.57±9.14)%、(13.98±3.92)%、(15.74±2.74)%、(16.05±2.36)%、(19.14±3.55)%、(14.33±3.66)%]均明显高于IL-2组[(9.14±3.06)%、(10.07±3.57)%、(11.10±3.32)%、(11.72±2.87)%、(12.80±4.20)%、(9.61±4.23)%](P<0.05);培养第25天,中央记忆型T细胞占CD8^+T细胞比率在Akt抑制剂组、IL-2组均最高;随培养时间延长,2组TIL上清中IL-10、IFN-γ、TNF-α分泌量均逐渐升高,且Akt抑制剂组IFN-γ分泌量自第5天开始明显高于IL-2组(P<0.05),TNF-α分泌量在第25天明显高于IL-2组(P<0.05),2组不同时间IL-10分泌量比较差异均无统计学意义(P>0.05);流式细胞法检测结果显示,培养第25天,Akt抑制剂组分泌IFN-γ的TIL比率[(11.35±0.47)%]明显高于IL-2组[(6.25±0.66)%](P<0.05)。结论 Akt抑制剂可提高肝癌组织TIL中中央记忆型T细胞比率,促进TIL分泌IFN-γ,且不影响TIL增殖活性。

关键词： GDF-15   H2O2   心肌细胞   增殖   凋亡   PI3K/AKT信号通路  

摘要： 目的:探讨上调生长分化因子-15(GDF-15)的表达对H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:CCK8法检测不同浓度的H_2O_2处理H9C2心肌细胞后的细胞增殖情况;H9C2心肌细胞分为Control组、NC组、H_2O_2组、GDF-15+H_2O_2组,各组细胞处理24 h后收集细胞,RT-PCR及Western blot分别检测各组细胞中GDF-15的mRNA及蛋白表达;CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的增殖和凋亡情况;2',7'-二氯二氢荧光素黄二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测细胞活性氧簇(ROS)水平;Western blot检测Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PI3K、pAKT蛋白表达。10μmol/L的PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002处理H9C2心肌细胞,通过CCK8法及流式细胞术分别检测GDF-15+H_2O_2组及PI3K/AKT信号通路抑制剂组细胞活力及凋亡率,Western blot检测Ki67、Bcl-2、Bax、PI3K、p-AKT蛋白表达。结果:不同浓度H_2O_2处理H9C2心肌细胞后,细胞活力均受到抑制,且有浓度依赖性(P<0.05),由于200μmol/L的H_2O_2处理H9C2心肌细胞后可抑制将近一半的细胞增殖,选择200μmol/L的H_2O_2作为研究对象;与Control组比较,H_2O_2组GDF-15的mRNA及蛋白表达均显著升高,细胞增殖显著降低,凋亡率增加,ROS水平升高,Ki67、Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05);与H_2O_2组比较,GDF-15+H_2O_2组细胞GDF-15的mRNA及蛋白表达均显著升高,细胞增殖显著增加,凋亡率降低,ROS水平降低,Ki67、Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低(P<0.05)。PI3K/AKT信号抑制剂组细胞活力及Bcl-2、PI3K和p-AKT的蛋白表达均显著低于GDF-15+H_2O_2组,细胞凋亡率及Bax蛋白表达显著高于GDF-15+H_2O_2组(P<0.05)。结论:上调GDF-15表达可促进H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞增殖,降低细胞凋亡,其机制可能与调节细胞中ROS水平,Ki67、Bcl-2、Bax表达及PI3K/AKT信号通路有关。

关键词： 胶质瘤   增殖   凋亡   侵袭   细胞周期  

摘要： 目的:探究NF-κB抑制剂QNZ对人胶质瘤细胞系U251生物学功能的影响。方法:胶质瘤U251细胞中加入QNZ处理,用CCK8法、Transwell实验、流式细胞术和Western blot检测细胞增殖、侵袭、凋亡以及Caspase-3的表达。结果:QNZ处理后绘制出生长曲线,发现胶质瘤细胞增殖受到抑制。QNZ降低U251细胞的侵袭性。不同浓度QNZ处理后,U251细胞凋亡增加,与QNZ浓度有相关性。QNZ处理后细胞周期被阻滞于G2期。结论:QNZ抑制胶质瘤细胞U251的增殖和细胞侵袭力,促进凋亡并阻滞细胞周期进展,为胶质瘤治疗提供新的思路。

关键词： miRNA-19a   结肠癌   LoVo细胞   生物学特性  

摘要： 目的探讨微小RNA(miRNA)-19a对结肠癌LoVo细胞生物学特性影响的可能机制。方法采用脂质体介导的转染方法将miRNA-19a模拟物转染到人结肠癌细胞系LoVo细胞;检测转染后miRNA-19a基因的表达;利用CCK8试剂盒检测细胞的增殖能力,TUNEL法检测细胞凋亡影响,细胞侵袭小室法检测细胞的体外侵袭力,RT-PCR和Western blot检测Hsp90/Akt信号通路的变化。结果转染miRNA-19a的结肠癌LoVo细胞,miRNA-19a表达上调,细胞体外增殖能力增强,细胞凋亡减少,细胞的侵袭力增强;细胞Hsp90和Akt的基因和蛋白表达升高。结论 miRNA-19a可通过上调Hsp90/Akt信号通路表达,促进LoVo细胞增殖,减少细胞凋亡,增强LoVo细胞的侵袭能力。

关键词： 细胞生物学   教学改革   科研素质   创新能力  

摘要： 文章通过对生命科学领域国际化应用型人才需求现状和高校培养目标的分析,以细胞生物学为研究对象,根据课程目标和教学思想,对细胞生物学教学内容、教学方法和考核制度进行改革。构建适应需求的课程体系,完善理论课程和实验课程内容,注重学生科研素质培养;采用多样化教学模式,重视实验教学环节,理论联系实际,激发学生的学习动力,培养学生的科研创新能力;建立累加式的考核评价体系。这些改革和尝试取得了比较好的效果,促进了哈尔滨工业大学人才培养和重点课程的建设。

关键词： 中国工程院院士   生物技术中心   分子遗传   中国共产党   学术带头人   细胞生物学   中国科学院   生物学家  

摘要： 著名分子生物学家,中国工程院院士,中国共产党的优秀党员,原国家生物工程顾问委员会副主任、联合国基因工程生物技术中心评审组成员、中国遗传学会副理事长,我国首个分子遗传实验室的创建者和学术带头人,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所研究员李载平先生因病医治无效.

关键词： 特异性识别   结构基础   趋化因子   整合素   配体   介导   细胞生物学   中国科学院  

摘要： 2018年5月22日,The Journal of Cell Biology在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所陈剑峰研究组的研究论文“Integrinα4β7 switches its ligand specificity via distinct conformer-specific activation＂。

关键词： 神经胶质瘤   细胞低氧   肿瘤侵润   上皮-间质转化   TRIM33  

摘要： 目的观察低氧条件下TRIM33基因表达的变化情况及对胶质瘤U251细胞生物学功能的影响。方法将U251细胞分别在低氧及常氧条件下培养不同时间，采用实时荧光定量PCR及Western blot检测TRIM33的表达变化情况。通过构建TRIM33过表达慢病毒转染U251细胞，采用Western blot检测转染后U251细胞TRIM33的表达，低氧条件下利用CCK-8检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移及侵袭，Western blot检测上皮－间质转化（EMT）相关蛋白的表达情况。结果（1）与常氧条件培养的U251细胞相比，低氧条件下U251细胞中的TRIM33表达发生下调（P〈0.001）。（2）与空白对照组相比，TRIM33组的TRIM33相对表达水平明显升高（P〈0.001）。（3）CCK-8实验表明，与空白对照组相比，TRIM33组的细胞增殖活力差异无统计学意义（P〉0.05）。（4）Transwell实验结果显示，TRIM33组的迁移及侵袭能力较空白对照组明显降低（均P〈0.05）。（5）Western blot结果显示，与空白对照组相比，EMT相关蛋白即波形蛋白、N-钙黏素表达水平均明显降低（均P〈0.01），E-钙黏素表达水平显著升高（P〈0.001）。结论在低氧条件下人脑胶质瘤U251细胞TRIM33表达发生下调，过表达TRIM33可以显著抑制低氧环境对U251细胞迁移、侵袭的影响，其可能是通过影响EMT实现的。TRIM33可作为拮抗低氧微环境的潜在基因治疗靶点。

关键词： 脐带间充质干细胞   脂肪源性间充质干细胞   细胞增殖   细胞分化   免疫抑制  

摘要： 目的比较脐带间充质干细胞(UC-MSCs)与脂肪源性间充质干细胞(AD-MSCs)的体外生物学特性。方法分离培养UC-MSCs与AD-MSCs,CCK-8法检测UC-MSCs与AD-MSCs的增殖能力,流式细胞术检测细胞表面标志物表达。油红O,茜红素及Von Kossa染色比较UC-MSCs与AD-MSCs成脂成骨诱导分化能力。MSCs与外周血单个核细胞(PBMC)共培养,在植物血凝素(PHA)刺激作用下,流式细胞术分析MSCs对PBMC增殖抑制作用。结果生长曲线结果显示,UC-MSCs细胞增殖优于AD-MSCs,UC-MSCs与AD-MSCs稳定表达CD13、CD44、CD73及CD90分子,不表达CD34和CD45。AD-M SCs成脂能力优于UC-M SCs,但成骨能力没有明显差异。UC-M SCs抑制PBM C增殖能力优于AD-M SCs。结论 UC-M SCs在免疫调节方面是一种更佳的种子细胞选择。