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关键词： 卵巢肿瘤   细胞增殖   促红细胞生成素产生肝细胞受体A2   细胞迁移侵袭  

摘要： 目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)基因沉默对人卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭的影响。方法利用质粒和脂质体介导转染法,经稳定筛选后,采用Western blot检测细胞EphA2蛋白表达情况,应用CCK-8和Transwell小室侵袭实验,观察EphA2基因沉默对卵巢癌HeyA8-MDR细胞生物学性状的影响。采用SPSS21.0软件进行统计分析。结果与HeyA8-MDR(阴性对照组)、HeyA8-MDR+空白对照组进行比较,HeyA8-MDR+实验组EphA2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞增殖能力、迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05)。结论EphA2基因沉默可抑制卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭,为卵巢癌的治疗提供了新思路。

关键词： 新农科   畜牧学   研究生课程   改革   人才培养  

摘要： 随着新农业科技的快速发展和推广,畜牧业作为农业生产的重要组成部分,面临着诸多新的挑战和机遇。畜牧学研究生课程也需要顺应时代变化,不断进行改革与创新,才能为我国畜牧业的发展储备高质量的人才资源。本文旨在以细胞生物学为例探讨在新农业科技背景下,针对畜牧学研究生课程进行的改革和调整,并分析这些改革对培养高水平畜牧专业人才的影响。

关键词： 丹酚酸B   巨噬细胞   衰老   小鼠   PI3K/AKT/mTOR信号通路   炎症因子  

摘要： 目的:分析丹酚酸B通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶标(mTOR)信号通路对衰老巨噬细胞生物学功能的影响。方法:以小鼠骨髓巨噬细胞为研究对象,利用3%过氧化氢溶液建立巨噬细胞衰老模型。实验分为对照组、衰老组和丹酚酸B组,对照组为未衰老的巨噬细胞,衰老组为衰老的巨噬细胞,丹酚酸B组为经丹酚酸B处理衰老的巨噬细胞,干预浓度分别为10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L。以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测炎症因子表达,免疫双荧光法检测衰老巨噬细胞向M1和M2型极化情况,蛋白质印迹法(WB)检测PI3K、AKT、mTOR表达。结果:从0 h至72 h,各组检测到的吸光度(OD)值逐渐增加。在72 h时,衰老组巨噬细胞增殖活力低于对照组(P<0.05)。与衰老组比较,10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L丹酚酸B组巨噬细胞增殖活力均更高(P<0.05)。100μmol/L、50μmol/L丹酚酸B组巨噬细胞增殖活力均高于10μmol/L丹酚酸B组(P<0.05)。100μmol/L丹酚酸B组巨噬细胞增殖活力虽低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,衰老组和100μmol/L丹酚酸B组白细胞介素(IL)-1β、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相对表达量均上升(P<0.05),IL-4、IL-10、精细氨酸1(Arg1)相对表达量均下降(P<0.05)。与衰老组比较,100μmol/L丹酚酸B组IL-1β、iNOS、TNF-α相对表达量均下降(P<0.05),IL-4、IL-10、Arg1相对表达量均上升(P<0.05)。与衰老组比较,100μmol/L丹酚酸B组CD206表达上调,CD86表达下调。与对照组比较,衰老组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR表达量均上升(P<0.05)。与衰老组比较,100μmol/L丹酚酸B组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR表达量均下降(P<0.05)。100μmol/L丹酚酸B组中p-PI3K表达量高于对照组(P<0.05),而p-AKT、p-mTOR表达量与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:丹酚酸B可通过PI3K/AKT/mTOR信号通路增强衰老巨噬细胞增殖活力并促进其向M2型极化。

关键词： 金天格   肿瘤坏死因子-α   MC3T3E1细胞   Wnt/β-catenin通路   细胞增殖   细胞凋亡   小鼠  

摘要： 目的:探讨金天格通过调节Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的小鼠成骨细胞(MC3T3E1)细胞生物学功能的影响。方法:体外培养MC3T3E1细胞,分为对照组、TNF-α组(50 ng/ml TNF-α)、L-金天格组(50 ng/ml TNF-α+10^(-6) g/L金天格)、M-金天格组(50 ng/ml TNF-α+10-5 g/L金天格)、H-金天格组(50 ng/ml TNF-α+10^(-4) g/L金天格)、Dickkopf-1(DKK-1)组(50 ng/ml TNF-α+10 ng/ml Wnt/β-catenin通路抑制剂DKK-1)、H-金天格+LiCl组(50 ng/ml TNF-α+10^(-4) g/L金天格+20μmol/L Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl)。用CCK-8试剂盒对细胞活性进行检测,用流式细胞仪对细胞凋亡情况进行检测,用酶联免疫吸附试验对细胞白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6水平进行检测,用Western blot对细胞凋亡相关蛋白及Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达情况进行检测。结果:与对照组比较,TNF-α组细胞活性、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞程序性死亡配体-1(PD-L1)蛋白表达降低,细胞凋亡率、IL-1β、IL-6水平以及B细胞淋巴瘤(Bax)、β-catenin、转录因子7样2(TCF7L2)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达升高(均P<0.05)。与TNF-α组比较,L-金天格组、M-金天格组、H-金天格组、DKK-1组细胞活性及Bcl-2、PD-L1蛋白表达升高,细胞凋亡率、IL-1β、IL-6水平以及Bax、β-catenin、TCF7L2、Cyclin D1蛋白表达降低(均P<0.05)。与H-金天格组比较,H-金天格+LiCl组细胞活性及Bcl-2、PD-L1蛋白表达降低,细胞凋亡率、IL-1β、IL-6水平以及Bax、β-catenin、TCF7L2、Cyclin D1蛋白表达升高(均P<0.05)。结论:金天格可能通过抑制Wnt/β-catenin通路减轻TNF-α诱导的MC3T3E1细胞损伤。

关键词： 核心素养   细胞生物学   师范生   教学改革  

摘要： 师范专业的培养目标需要适应国家基础教育课程改革的发展需求,“细胞生物学”作为生物科学(师范)专业的基础课程,教学改革需要关注并落实核心素养的培养。基于核心素养背景,对于“细胞生物学”课程进行了包括课程目标、教学内容、教学理念和方法的系列改革,在促进了师范生生物学知识学习的同时,全方位地促进师范生学科核心素养的发展,为提高高等师范院校的教育教学质量和培养生物科学专业师范生的教学能力提供了理论依据和实践依据。

关键词： 卵巢癌   纤维介素2   侵袭   迁移   白细胞介素-6   信号转导和转录激活因子3  

摘要： 目的 探讨纤维介素2(FGL2)在上皮性卵巢癌中的表达情况及其对人卵巢癌SKOV3细胞生物学特性的影响及相关机制。方法 (1)取2018年7月—2020年5月在河北省人民医院行手术治疗的40例浆液性卵巢癌以及16例卵巢浆液性囊腺瘤患者的切除组织标本,免疫组化法检测组织标本中FGL2蛋白表达情况。(2)取SKOV3细胞,实验设空白组、FGL2 siRNA转染组和阴性对照siRNA组,采用Western blot法检测细胞中FGL2蛋白表达情况,以确定FGL2 siRNA转染效率;后续通过CCK-8法以及Transwell实验检测FGL2 siRNA转染组和阴性对照siRNA组SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力,Western blot法检测细胞中白细胞介素-6(IL-6)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达情况,观察沉默FGL2对SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力和IL-6/STAT3信号通路的影响。结果 浆液性卵巢癌患者组织标本中FGL2蛋白高表达率明显高于卵巢浆液性囊腺瘤患者[80.0%(32/40)比37.5%(6/16),P<0.05]。FGL2 siRNA转染组FGL2蛋白相对表达量明显低于阴性对照siRNA组(P<0.05);FGL2 siRNA转染组转染后48 h、72 h、96 h、120 h的SKOV3细胞增殖活性均明显低于同期阴性对照siRNA组(P均<0.05);Transwell加基质胶侵袭实验和不加基质胶迁移实验显示FGL2 siRNA转染组穿膜细胞数均明显少于阴性对照siRNA组(P均<0.05);FGL2 siRNA组IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量均明显低于阴性对照siRNA组(P均<0.05)。结论 卵巢癌组织中存在FGL2高表达,沉默FGL2抑制IL-6/STAT3信号通路的活性可影响卵巢癌细胞的生物学特性,推测FGL2可作为卵巢癌诊治的靶点之一。

关键词： 肺癌A549细胞   生物信息学   GTP酶激活因子   增殖   侵袭   迁移   凋亡  

摘要： 目的探讨STARD8对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡生物学功能的影响。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI),获取两份公开的基因芯片数据集(GSE18842和GSE68571),运用limma R包识别差异表达基因(DEGs)。采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归法结合SVM-RFE算法对候选基因进行筛选,构建受试者工作特征(ROC)曲线,应用CIBERSORT工具进行免疫浸润分析。通过RT-qPCR和Western blot分析STARD8在对照组及肺癌组的mRNA及蛋白水平,通过细胞平板克隆、Transwell、细胞划痕及流式细胞实验分析STARD8对A549细胞的增殖、侵袭、迁移及凋亡能力的影响。结果共筛选出285个上调基因和377个下调基因,取交集得到1个诊断标志物基因STARD8,免疫分析显示CD4 T细胞、NK细胞出现免疫抑制。肺癌组中STARD8的mRNA及蛋白表达均下调(P均<0.05)。STARD8过表达时肺癌A549细胞的增殖、侵袭及迁移能力降低,凋亡能力增加(P均<0.05)。结论STARD8可抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移,促进细胞凋亡。

关键词： 科研思维   细胞生物学实验   教学改革  

摘要： 细胞生物学实验是生命科学、医学相关专业的重要实验课程。当前,课程存在内容陈旧、教学模式单一等问题,不利于学生批判精神和创新思维的培养。我们以培养学生科研思维为导向,从实验设计、教学过程、课程思政等方面进行教学改革,帮助学生掌握分析问题、设计实验、归纳总结的科研方法,树立团队协作、务实诚信的科研精神。

关键词： 三阴性乳腺癌   核前mRNA结构域调节因子   细胞增殖   细胞侵袭   上皮间质转化  

摘要： 目的探讨核前mRNA结构域调节因子1B(RPRD1B)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响。方法免疫组化检测RPRD1B在三阴性乳腺癌组织和癌旁组织的表达水平,Western blot检测三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和HCC-1937中RPRD1B的表达水平。三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和HCC-1937分别用sh-RPRD1B慢病毒(sh-RPRD1B组)和sh-NC慢病毒(sh-NC组)感染,然后检测下调效率;CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot和qRT-PCR法检测敲低RPRD1B对三阴性乳腺癌细胞中上皮间质转化标志性蛋白E-cadherin和N-cadherin的影响。结果RPRD1B在三阴性乳腺癌组织和三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系和HCC-1937细胞系中均表达。CCK-8结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组MDA-MB-231和HCC-1937细胞增殖能力显著降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。Transwell结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞侵袭能力显著降低(P<0.01)。划痕实验结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞迁移能力显著降低(P<0.01)。与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞上皮间质转化标志分子E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低。结论敲除RPRD1B表达使三阴性乳腺癌细胞的凋亡能力增强而增殖能力减弱,其侵袭和迁移能力的减弱可能与上皮间质转化过程相关。

关键词： 微小RNA   结直肠癌   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的:探讨miR-212-5p在结直肠癌(CRC)进展中的作用和机制。方法:从新乡医学院第一附属医院收集32例患者的CRC组织及邻近正常组织,体外培养购自上海中科院细胞库的正常结肠黏膜上皮细胞NCM460和CRC细胞系(SW480、SW1116、HT29),实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-212-5p和ATP结合盒E1(ABCE1)。将SW480细胞分为miR-NC组、miR-212-5p组、si-NC组、si-ABCE1组、miR-212-5p+pcDNA组、miR-212-5p+pcDNA-ABCE1组。噻唑蓝(MTT)法、Transwell分析用于检测SW480细胞增殖、侵袭迁移。蛋白质印迹法(Western blot)评估ABCE1蛋白表达;双荧光素酶实验分析miR-212-5p和ABCE1靶向关系。两组数据差异用独立样本t检验,多组数据的差异用单因素方差分析和SNK-q检验。结果:CRC组织和细胞中miR-212-5p的表达明显低于对照组(组织:t=100.411,P<0.01;细胞:F=1192.235,P<0.01),ABCE1 mRNA(组织:t=85.952,P<0.01;细胞:F=219.953,P<0.01)和蛋白(组织:t=39.634,P<0.01;细胞:F=125.185,P<0.01)的表达明显升高;miR-212-5p组SW480细胞活力(48 h:0.34±0.01比0.53±0.03,t=18.025,P<0.01;72 h:0.51±0.02比0.97±0.08,t=16.735,P<0.01)、迁移数(40.31±2.12比87.42±6.85,t=19.710,P<0.01)、侵袭数(29.06±1.35比72.19±5.91,t=21.344,P<0.01)、ABCE1蛋白(0.17±0.02比0.56±0.05,t=21.726,P<0.01)表达明显低于miR-NC组。si-ABCE1组SW480细胞活力(48 h:t=10.436,P<0.01;72 h:t=17.332,P<0.01)、迁移数(t=16.741,P<0.01)、侵袭数(t=17.164,P<0.01)明显低于si-NC组。miR-212-5p与ABCE1直接结合。miR-212-5p+pcDNA-ABCE1组SW480细胞活力(48 h:q=21.689,P<0.01;72 h:q=16.709,P<0.01)、迁移数(q=20.273,P<0.01)、侵袭数(q=29.325,P<0.01)、ABCE1蛋白表达(q=24.000,P<0.01)明显高于miR-212-5p+pcDNA组。结论:miR-212-5p靶向ABCE1可抑制CRC细胞生物学行为。