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关键词： 睾丸肿瘤   畸胎瘤   维甲酸  

摘要： 目的 探讨全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）对人睾丸畸胎瘤NCCIT细胞的增殖、迁移和分化的影响及其相关分子机制.方法 选取人睾丸畸胎瘤细胞系NCCIT为研究对象.分别采用MTT和Transwell小室检测细胞的增殖和迁移变化;ELISA法检测细胞产生TGFβ1的变化;Western blot检测细胞内PI3K/Akt通路及其下游关键蛋白表达的影响.结果 ATRA显著抑制NCCIT细胞的增殖和迁移,并下调培养液上清中的TGFβ1;ATRA显著下调PI3K/Akt磷酸化及其下游蛋白Ecadherin、Occludin、MMP-2和-9的表达水平.而ATRA细胞核受体RXR和PI3K/Akt通路抑制剂,分别拮抗ATRA对NCCIT细胞增殖和迁移的抑制效应,并抑制ATRA对细胞的促分化作用.结论 ATRA参与抑制人睾丸畸胎瘤细胞的增殖和迁移并促进其分化,其机制可能是通过激活细胞核受体RXR进而调控PI3K/Akt通路来发挥作用的.

关键词： 多发性骨髓瘤   双歧杆菌脂磷壁酸   骨髓间充质干细胞   白细胞介素-17   白细胞介素-6  

摘要： 目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸对多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞增殖及细胞因子分泌情况的影响。方法应用密度-梯度离心法分别获取多发性骨髓瘤患者及对照组骨髓间充质干细胞,应用流式细胞仪确定间充质干细胞表型,EDU法和ELISA法分别检测不同质量浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、6.0g/L)的双歧杆菌脂磷壁酸共培养后的骨髓间充质干细胞增殖率及培养液上清中IL-17及IL-6含量变化。结果多发性骨髓瘤患者与对照组骨髓间充质干细胞的形态及表型表达完全相同,当双歧杆菌脂磷壁酸干预质量浓度为1.0g/L和2.0g/L时,多发性骨髓瘤组间充质干细胞的增殖率显著高于正常对照组(P<0.05),质量浓度为4.0g/L和6.0g/L时,细胞增殖率反而显著低于正常对照组(P<0.05)。多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的IL-17和IL-6水平均显著高于正常人,应用0.5、1.0、2.0和4.0g/L双歧杆菌脂磷壁酸干预后,其细胞因子的表达水平显著下降(P<0.05)。结论一定质量浓度的双歧杆菌脂磷壁酸可以促进多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的增殖且降低其IL-17和IL-6的表达水平。

关键词： 新小杆线虫,漂亮   嗅觉   分子生物学   神经元   综述  

摘要： 嗅觉适应是动物的一项重要生理功能,可以保护自身细胞免受过度刺激,进而更好地应对周围环境变化。目前发现秀丽隐杆线虫嗅觉适应性主要与嗅觉神经元胞内信号分子和感受蛋白有关,如AWC神经元区域特异性环鸟苷酸(c GMP)反应、瞬时受体电位香草酸亚型(TRPV)离子通道蛋白OSM-9、细胞质基质抑制蛋白ARR-1和G蛋白信号通路中的甘油二酯(DAG)通路等均可以调控嗅觉适应,而神经环路方面的嗅觉适应性研究甚少。本文总结回顾了线虫嗅觉适应有关的分子细胞生物学机制,以期为高等生物嗅觉的研究提供参考。

关键词： 高级细胞生物学   研究生课程   教学改革  

摘要： "高级细胞生物学"是为生物化学与分子生物学专业硕士研究生开设的一门专业必修课,重点讲授动物细胞的运动、代谢、物质传递和信息交流的分子机制及其化学本质,穿插以分子细胞生物学的最新研究成果及研究技术,并对课程进行了国际化探索,旨在培养学生的国际视野,从知识储备和思维方式等方面为从事科研工作做准备。

关键词： 华人科学家   科学院   院士   美国   麻省理工学院   加州大学   神经生物学   细胞生物学  

摘要： 美国国家科学院近日公布新增选院士和外籍院士名单.其中6名华人科学家当选美国国家科学院院士。这6名华人科学家分别是加州大学伯克利分校神经生物学系教授丹扬、加州大学旧金山分校神经学系教授傅螢惠、布朗大学工程学院教授高华健、耶鲁大学细胞生物学和遗传学系教授林海帆、麻省理工学院神经科学教授张锋以及麻省理工学院物理学系教授文小刚。

关键词： 动物生物学   竞赛试题   奥林匹克   国际   生物系统学   细胞生物学   动物行为学   进化生物学  

摘要： 理论考试B共3 h。 1~11题：动物生物学;12~14题：生物系统学;15~23题：细胞生物学;24~29题：生态学;30~31题：动物行为学;32~41题：遗传与进化生物学;42~49题：植物生物学。每个正确答案得1分。例如：一个问题中所有4个空都回答正确，得1分；只有3个空是正确的，则得到0．6分；只有2个空是正确的，则得到0．2分；只有1个空是正确的，则得到0分。

关键词： 胰腺囊性肿瘤   超声内镜   细针穿刺术   癌胚抗原   细胞生物学  

摘要： 目的评价囊液癌胚抗原(CEA)检测、液基细胞学检查及两者联合应用对进展期胰腺囊性肿瘤(A-PCNs)的诊断价值。方法收集2006年1月至2017年6月间上海长海医院行内镜超声下细针穿刺术(EUS-FNA)后囊液分析并进行外科手术获得病理学诊断为PCNs的78例患者的临床资料,其中A-PCNs32例,非A-PCNs46例。比较囊液CEA水平和液基细胞学在A-PCNs和非A-PCNs中是否存在差异;绘制囊液CEA水平的受试者特征曲线(ROC),计算ROC曲线下面积(AUC),评估CEA水平与液基细胞学联合应用对A-PCNs诊断的敏感性、特异性和准确性。结果35例患者中,囊液CEA水平在A-PCNs(9例)和非A-PCNs(26例)两组间差异有统计学意义[(1419.9±1416.9)μg/L比(316.0±475.2)μg/L,P=0.049]。根据ROC曲线分析得出囊液CEA>418.9μg/L可以帮助预测A-PCNs,AUC为0.863,采用该截断值诊断A-PCNs的敏感性、特异性和准确性分别为85.7%、73.1%和75.8%。液基细胞学检测了27例A-PCNs和33例非A-PCNs,阳性率在两组间的差异有统计学意义(48.1%比9.1%,P=0.001),液基细胞学诊断A-PCNs的敏感性、特异性和准确性分别为48.1%、90.9%和55.1%。囊液CEA联合液基细胞学可以有效诊断A-PCNs,其敏感性、特异性和准确性分别为100%、64.7%和76.0%。结论囊液液基细胞和囊液CEA水平对于诊断A-PCNs有一定的价值,两者联合诊断A-PCNs的敏感性和准确性更高。

关键词： 呼吸窘迫综合征   成人   肺泡   支气管肺泡灌洗液   成纤维细胞  

摘要： 目的探讨不同程度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺泡微环境的变化对肺成纤维细胞(LF)的影响。方法以2014年1月至2016年12月绍兴市人民医院重症监护病房(ICU)收治的58例符合ARDS诊断标准的患者,依据患者氧合指数和柏林定义标准将患者分为轻度组(26例)、中度组(15例)、重度组(17例),另纳入10例行机械通气但无肺部疾病患者作为无肺损伤组。所有入选患者均进行支气管肺泡灌洗,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)标本,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其中白细胞介素1β(IL-1β)、角质细胞生长因子(KGF)和肝细胞生长因子(HGF)水平,并进行蛋白定量及细胞计数。同时,体外培养肺成纤维细胞系MRC-5细胞,与各组患者BALF共培养,采用Transwell法检测细胞迁移能力,采用Western-blotting法检测各组细胞CollagenⅠ和血小板源性生长因子α受体(PDGF-Rα)表达。结果与无肺损伤组比较,ARDS轻度组、中度组及重度组患者的IL-1β[12(8,21)、776(449,943)、802(691,1 004)、886(548,1 130)ng/L]、KGF[2.0(1.0,2.2)、19.0(15.8,24.5)、41.4(36.2,57.3)、64.7(49.2,82.1)ng/L]、HGF[90(75,106)、514(373,785)、867(674,1 248)、940(660,1 344)ng/L]、蛋白含量[(0.09±0.03)、(0.29±0.10)、(0.45±0.09)、(0.68±0.16)g/L]及细胞总数[(2.4±0.6)、(16.5±2.1)、(17.8±2.0)、(18.2±2.0)×109个/m L]均明显升高(Z=26.182、55.871、36.354,F=72.860、177.291,P均<0.05),且与重度组患者比较,轻度组及中度组患者的KGF水平及蛋白含量显著降低(P均<0.05),轻度组仅HGF水平及总细胞数明显降低(P均<0.05),而ADRS各组间IL-1β比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。同时,与无肺损伤组比较,ARDS各组间趋化指数均明显升高(F=12.291,P=0.003),且重度ARDS组患者明显高于轻度及中度组患者(P均<0.05)。四组间CollagenⅠ蛋白及PDGFRα蛋白比较,差异均有统计学意义(F=358.943,P=0.001;F=4.574,P=0.002)。ARDS各组CollagenⅠ蛋白明显高于无肺损伤组,且中度、重度组明显高于轻度组(P均<0.05)。而PDGF-Rα蛋白在无肺损伤组和轻度组几乎无表达,但在中度、重度组均有明显表达(P均<0.05)。结论随着ARDS程度的加重,BALF中KGF、HGF明显上升,BALF可通过诱导LF表达PDGF-Rα和CollagenⅠ,促进LF的迁移与分化。

关键词： 慢病毒   线粒体内膜蛋白   Mic19   Mic60   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的线粒体的功能取决于线粒体的膜系统,而线粒体内膜的形态由近期发现的线粒体接触位点复合物(mitochondrial contact site and crista organizing system,MICOS)所调节,MICOS复合物的突变可改变嵴的形成,导致线粒体功能障碍。本研究采用慢病毒shRNA靶向敲低MICOS复合物亚基蛋白-线粒体内膜蛋白Mic19及Mic60表达,并研究敲低Mic19和Mic60对肝癌细胞生物学作用的影响。方法根据NCBI中的序列设计、构建并包装敲低Mic19及Mic60的重组慢病毒,收集被病毒上清感染后经嘌呤霉素筛选得到的肝癌HepG2阳性细胞,并以空白组、空载pLKO.1慢病毒质粒组作为对照。采用蛋白印迹法检测Mic19及Mic60蛋白的表达,以筛选敲低效率最高的稳定细胞株。采用MTT法、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭情况,观察敲低Mic19及Mic60蛋白表达对肝癌细胞生物学行为的影响。结果 Mic19敲低组中蛋白相对表达量shRNA Mic19-1(0.579±0.042)和shRNA Mic19-2(0.524±0.111)均低于空白组(1.065±0.105)或空载组(1.07±0.092),差异有统计学意义,均P<0.01。Mic60敲低组蛋白相对表达量shRNA Mic60-1(0.172±0.107)、shRNA Mic60-2(0.269±0.027)明显低于空白组(1.065±0.105)或空载组(1.07±0.092),差异有统计学意义,均P<0.01。生长曲线表明,Mic19敲低组至感染第36h时的吸光度(A)值低于对照组,均P<0.05;Mic60敲低组至感染第12h时的A值显著低于对照组,P<0.01。划痕实验表明,至第48hMic19敲低组细胞迁移距离为(286.8±38.97)μm,Mic60敲低组细胞迁移距离为(214.6±41.64)μm,与空白组(500.8±25.6)μm或空载组(487.3±31.37)μm相比差异均有统计学意义,均P<0.01。在不铺胶的Transwell迁移实验中,Mic19敲低组穿膜细胞数为(440.4±65.35)个/低倍视野,Mic60敲低组穿膜细胞数为(235.2±21.3)个/低倍视野,均少于空白组(574.8±36.4)或空载组(574±53.95)个/低倍视野,均P<0.01。在铺胶的侵袭实验中,Mic19敲低组穿膜细胞数为(172.4±15.5)个/低倍视野,Mic60敲低组穿膜细胞数为(118.2±25.53)个/低倍视野,均少于对照组空白组(238.6±22.85)或空载组(227.8±22.27)个/低倍视野,差异有统计学意义,均P<0.01。结论重组慢病毒shRNA Mic19-2、shRNA Mic60-1可分别有效敲低HepG2细胞Mic19、Mic60的表达。慢病毒shRNA靶向敲低Mic19及Mic60表达可抑制肝癌HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并为后续进一步研究线粒体内膜蛋白(Mic19、Mic60)对肝癌细胞发生发展的影响提供依据。

关键词： 氧化型低密度脂蛋白   动脉粥样硬化   凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1   配体   治疗药物  

摘要： 动脉粥样硬化(AS)是一种血管慢性炎症性病变,低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白和其他修饰型的脂蛋白在血管内膜下的滞留和聚积被认为是AS的起始因素。凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体(LOX)-1在AS的发生、发展中起重要作用,介导了多种信号对血管内皮细胞的刺激,是AS斑块形成的起始因素之一。近年来,不断有新的证据发现LOX-1与细胞外不同配体的相互作用及细胞内效应,并发现多种药物通过抑制LOX-1产生抗AS的作用。本文将着重阐述近年来LOX-1在AS发生、发展中的细胞生物学效应与相关药物治疗新进展。