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关键词： 急性髓系白血病   白血病干细胞   巨噬细胞   造血微环境   耐药  

摘要： 目的探讨急性髓系白血病干细胞(acute myeloid leukemia stem cells,AML LSCs)分化成AML LSCs源性巨噬样细胞的生物学现象、生物学特点及潜在的病理学意义。方法分选AML细胞系Kasumi-3中AML LSCs,在巨噬细胞条件培养基中培养14 d,从形态学、免疫表型、分泌细胞因子、吞噬功能等角度鉴定获得的贴壁细胞,明确AML LSCs源性巨噬样细胞的基本生物学特点。检测与AML LSCs源性巨噬样细胞共培养的Kasumi-3细胞表面耐药蛋白水平、胞内化疗药物浓度和对柔红霉素(DNR)的摄药量,初步评价AML LSCs源性巨噬样细胞促进白血病耐药的作用及可能机制。结果培养获得的AML LSCs源性巨噬样细胞呈多形性,以多角形和椭圆形贴壁细胞为主,透射电镜观察发现细胞呈椭圆形,胞浆丰富,有较多空泡;近胞核处高尔基体富集;包膜绒毛丰富且较长。AML LSCs源性巨噬样细胞特异性表达CD11b、CD163、CD206,分泌一定水平IL-10和IL-13。细菌吞噬实验证明其可吞噬大量呈绿色杆状荧光的***菌,随着孵育时间的延长,吞噬数量逐渐增多。激光共聚焦显微镜观察发现与AML LSCs源性巨噬样细胞共培养的Kasumi-3细胞表面ABC转运蛋白表达明显强于对照组,DNR摄药量低于悬浮培养Kasumi-3细胞(54.75±4.28 vs 93.84±3.93,P<0.01),对DNR、阿霉素(ADM)、阿糖胞苷(Ara-C)和足叶乙甙(VP-16)均有一定的耐药性。结论 AML LSCs在特定条件下可以分化成为AML LSCs源性巨噬样细胞,后者有类似巨噬细胞的生物学特性,参与白血病耐药的形成。

关键词： 医学细胞生物学   图像信息   生物图   教育教学  

摘要： 图像信息资源的综合整合和利用对于提高细胞生物学的教学质量是非常有效的,在教学实践中师生共同参与,贯彻利用图像信息启发教学的理念,将图像教学模块整合与点·面式教学法有机结合,开展图像资源库的建立,并伴随教学环节的改革,采用一系列教学手段,加大"生物图"在教学中的应用。在理论教学中增加图像类资源的利用,实践教学中指导鼓励学生制作个性化图像资源,从制图、识图、绘图全方面培养学生,实现三方面有机统一,从而使学生潜移默化的构建起图像资源综合利用的全方位完整体系,有效提高教学质量与效果。

关键词： 鼻咽肿瘤   免疫球蛋白M   抗体   HNE-1   生物学特性  

摘要： 目的研究抗人免疫球蛋白M(IgM)抗体对鼻咽癌HNE-1细胞增殖、凋亡、细胞周期和成瘤的影响。方法经抗人IgM抗体处理后,采用细胞增殖抑制实验观察HNE-1细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡;构建裸鼠动物模型,腹腔注射抗人IgM抗体,观察移植瘤的生长,免疫组织化学SP法检测移植瘤中IgM和糖蛋白96(gp96)的蛋白表达。结果抗人IgM抗体可呈浓度和时间依赖性抑制HNE-1细胞的增殖(P<0.05);流式细胞术检测表明抗人IgM抗体可促进HNE-1细胞G1期细胞百分比明显降低,S期细胞百分比明显增加,细胞凋亡率明显增高(P<0.05);TUNEL检测提示抗人IgM抗体可促进HNE-1细胞凋亡(P<0.01);移植瘤实验显示抗人IgM抗体可明显抑制移植瘤的体积和质量(P<0.05);移植瘤免疫组织化学显示裸鼠腹腔注射抗人IgM抗体后,移植瘤内IgM和gp96蛋白的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论抗人IgM抗体可有效抑制HNE-1细胞的增殖、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期,并且能抑制裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制IgM和gp96蛋白表达有关。

关键词： 食管癌   PDCD4基因   RNA干扰   增殖   迁移  

摘要： 目的探讨沉默PDCD4基因对食管癌细胞生物学特性的影响。方法选取27例食管癌患者的癌组织和对应的癌旁组织,采用荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测PDCD4表达水平,对患者5年生存率进行调查分析,并分析PDCD4表达与食管癌临床病理学特征的相关性。采用Western blot法检测食管癌细胞的PDCD4蛋白表达。利用siRNA特异沉默PDCD4基因表达。将si-PDCD4或si-NC转染到食管癌细胞TE-1中,转染稳定后,在0、24、48和72 h利用MTT法检测细胞增殖能力。用结晶紫染色法检测转染细胞克隆形成能力,用细胞划痕实验(Wounding heal)检测转染细胞迁移能力。结果 PDCD4在癌组织及癌细胞中显著低表达,PDCD4相对高表达的患者生存率高于低表达PDCD4的患者。沉默PDCD4基因能够增强食管癌细胞的增殖、克隆形成和迁移能力。结论沉默PDCD4基因促进了食管癌细胞的增殖与迁移。

关键词： 肝细胞癌   微小染色体维持蛋白7   细胞增殖   细胞迁移   细胞凋亡  

摘要： 目的研究微小染色体维持蛋白7(MCM7)在肝癌细胞中的功能及作用机制,建立MCM7低表达的肝癌细胞株。方法构建MCM7基因的p SicoR慢病毒干扰载体,对上述载体进行XbaⅠ和XhoⅠ双酶切和测序鉴定。鉴定正确后,在HEK293T细胞中进行慢病毒包装,并使用40%PEG浓缩后的慢病毒感染肝癌细胞,通过流式细胞术分选得到绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞,扩增后收集细胞进行Western印迹鉴定;利用CCK-8、克隆形成、三维培养、凋亡检测以及细胞迁移实验初探MCM7敲低对肝癌细胞生物学功能的影响。结果双酶切和测序结果表明,p SicoR-shMCM7-GFP质粒构建成功; Western印迹结果表明,MCM7的表达水平在分选后的稳转肝癌细胞株中明显下调;对稳转细胞株的生物学功能进行分析,发现在体外敲低MCM7能抑制肝癌细胞的增殖及迁移能力并促进细胞凋亡。结论敲低MCM7的表达对肝癌细胞的增殖和迁移能力有一定的抑制作用并促进细胞凋亡。

关键词： 细胞生物学   实验教学   能力培养   教学改革  

摘要： 传统的细胞生物学实验以验证性实验为主,主要课程目标是对理论课知识的验证和基本操作的学习。为提高人才培养质量,推动实验课教学改革,针对"开设什么样的实验课""怎样开展实验教学"等问题,根据细胞生物学的学科发展,对细胞生物学基础实验课程进行了改革。课程以"能力培养"为核心目标,以认知、情感两个目标层次为支撑,转变原有的教学理念,匹配教学所需的资源,更新教学内容,摸索、实践相应的教学模式,形成了一套较为系统、具体、实操性强的教学方案,进一步拓展了实践教学改革的空间。

关键词： 快速原子力显微镜   细胞生物学   动态变化   DNA构象  

摘要： 快速原子力显微镜在不损失高分辨率的情况下,其扫描速度与检测精度达到了完美结合,在细胞和分子水平上实现了对生物体系动态过程的实时表征。这种超高时间分辨率和空间分辨率的结合,以及与其它先进技术的联用,为细胞生物学等生命科学领域的研究展现了诱人的前景。本文对快速原子力显微镜在细胞生物学领域的新进展进行了综述,包括环境因素对DNA构象的影响、DNA与蛋白质结合的过程、膜蛋白结构域的变化、肌球蛋白的运动、活细胞表面结构的变化等。

关键词： 地外生命   俄罗斯科学院   DNA测序   细胞生物学   西伯利亚   生命痕迹   科学家   研究所  

摘要： 俄罗斯科学院发布消息称，俄罗斯科学院西伯利亚分院分子与细胞生物学研究所的科学家发现了DNA测序新方法。利用该方法，可以在宇宙中的冰质行星上探索地外生命。该研究将有助于发现南极冰层和木卫二欧罗巴上的生命痕迹。

关键词： 永生化人肝细胞   永生化人肝窦内皮细胞   共培养   肝功能衰竭  

摘要： 目的:探讨永生化人肝窦内皮细胞(IHLESC)能否提高肝细胞的代谢、解毒及合成功能。方法:设立永生化人肝细胞(IHH)单独培养组和IHLESC与IHH共培养组,评价两种不同培养方式对肝细胞代谢、解毒和合成功能的影响;将两组细胞分别接种于微载体上,分别与肝衰竭患者血浆共孵育,比较两组IHH的解毒功能。结果:相比于单独培养组,共培养组IHH密切接触,聚集成团。共培养组IHH的谷氨酰胺合成酶(GS)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、鸟苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(UGT1A1)、白蛋白(ALB)表达量均显著高于单独培养组(P<0.01)。共培养组血浆总胆红素的下降及血浆尿素的上升均比单独培养组显著(P<0.01)。结论:用IHH与IHLSEC在微载体上共培养制备成新型生物人工肝的核心材料,可提高生物人工肝细胞的代谢、解毒及合成功能。

关键词： “互联网+”   翻转课堂   中西医临床医学专业   细胞生物学   教学模式  

摘要： 细胞生物学是现代前沿生命科学之一,在医学科学中占有重要地位。临床医学生无论借助中医、西医角度从微观世界认识人体和疾病,细胞无疑是认识生命规律和疾病发病机制的重要载体。中西医临床医学专业学生学习细胞生物学相关课程有利于完善中医及西医知识框架,加深对生命规律及临床疾病知识的理解和认识。以互联网平台为主体,开展以设置问题为引导的课前学习和以解决和探索问题为主导的中医药与细胞生物学翻转课堂授课形式,有利于培养迎合时代需求的中西医临床医学人才。