教学课程资源库 更多>>

关键词： 肺癌   M2型丙酮酸激酶   shRNA干扰   生物学功能  

摘要： 目的探讨M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)下调对人肺癌A549细胞生物学特性的影响。方法采用免疫荧光技术检测A549细胞中PKM2蛋白的表达;将构建有PKM2-shRNA的重组质粒转入A549细胞;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测PKM2 mRNA和蛋白表达水平; CCK-8法检测PKM2基因沉默对A549细胞增殖能力的影响;采用葡萄糖测定试剂盒测定细胞对葡萄糖的消耗量; Transwell实验检测细胞穿过人工基膜的能力。结果肺癌A549细胞的细胞质及细胞核中均有PKM2表达; PKM2-shRNA质粒转染A549细胞48h后,可明显下调A549细胞中PKM2 mRNA及蛋白的表达水平,并且明显抑制A549细胞增殖; PKM2 shRNA可减少A549细胞葡萄糖的消耗,还可抑制细胞侵袭能力。结论在肺癌细胞A549中,抑制PKM2表达可显著抑制细胞增殖、侵袭和糖代谢能力。

关键词： 甲状腺肿瘤   RNA干扰   细胞凋亡   细胞增殖   基因,CITED   1  

摘要： 目的:探讨沉默CITED1(Cbp/p300 interacting transactivator with Glu/Asp rich carboxy-terminal domain 1)基因表达对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、凋亡和迁移等生物学行为的影响。方法:将携带特异性靶向CITED1基因的shRNA(CITED1-shRNA)及其阴性对照shRNA(negative control-shRNA,NC-shRNA)的重组慢病毒分别感染甲状腺乳头状癌K1细胞株,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测CITED1基因沉默效率;然后采用CCK-8法检测细胞增殖,FCM法检测细胞周期和细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移能力。结果:经携带CITED1-shRNA的重组慢病毒感染后,甲状腺乳头状癌K1细胞中CITED1 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P值均<0.01),证明成功获得了CITED1基因沉默的K1细胞株。沉默CITED1基因表达后,K1细胞的增殖能力明显降低(P <0.01),细胞凋亡率明显升高(P=0.001),G0/G1期细胞所占比例明显增高(P=0.007),G2/M及S期细胞所占比例均明显降低(P值均<0.05),而且12 h和24 h时细胞迁移能力明显减弱(P值均<0.01)。结论:沉默CITED1基因表达可以抑制甲状腺乳头状癌K1细胞的增殖和迁移,促进肿瘤细胞凋亡。

关键词： SPAG9基因   非小细胞肺癌   细胞增殖   细胞周期   凋亡   迁移  

摘要： 目的:研究精原相关抗原9(spermatogenic antigen 9,SPAG9)对非小细胞肺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移等生物学功能的影响。方法:A549细胞转染SPAG9 siRNA后,qRT-PCR和Western blot检测转染前后SPAG9的表达变化;CCK-8检测SPAG9对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPAG9基因对A549细胞周期和凋亡的影响;Transwell实验检测SPAG9基因对A549细胞体外迁移能力的影响。结果:qRT-PCR检测结果表明:实验组的SPAG9的相对表达量为(0.28±0.12),明显低于对照组(1.04±0.06)(P<0.05);Western blot结果表明:对照组相对蛋白表达水平为(0.34±0.12),实验组为(0.11±0.08),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8实验表明:SPAG9沉默可抑制细胞增殖;流式细胞术检测结果表明:沉默SPAG9可使A549细胞发生G0/G1期阻滞,凋亡增加;Transwell迁移实验表明:实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论:SPAG9沉默可抑制非小细胞肺癌A549的增殖、迁移,促进凋亡发生,为探寻中药治疗非小细胞肺癌的靶点奠定了实验基础。

关键词： 骨髓瘤   SOX2蛋白   转录因子   趋化因子   趋化因子受体   生物学特性  

摘要： 目的揭示SOX2蛋白及趋化相关基因CCR1、CCR2和MCP-1影响骨髓瘤细胞生物学特性的机制。方法本研究以骨髓瘤细胞株H929为研究对象,采用随机数表法将细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。空白对照组为不进行任何处理的骨髓瘤细胞株H929,阴性对照组为转染慢病毒r LV-ZPP的稳转株H929-ZPP,实验组为转染慢病毒r LV-hsox2-Zs Green-Puro的稳转株H929-hsox2。采用Western blot检测各组细胞中SOX2蛋白表达,采用实时荧光定量PCR反应(RT-PCR)测定各组细胞中CCR1、CCR2和MCP-1基因表达,相应基因的相对表达水平用2-ΔΔCT代表。采用酶标仪测定细胞在450 nm处的吸光度值,计算细胞生存率。采用流式细胞仪计算各组细胞的凋亡率。结果实验组的SOX2蛋白表达为(1.38±0.07),高于空白对照组的(1.04±0.06)和阴性对照组的(0.72±0.07),差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的CCR1、CCR2和MCP-1基因表达水平分别为(4.37±0.33)、(4.45±0.38)、(10.72±1.14),高于空白对照组的(2.14±0.15)、(2.21±0.17)和(5.17±0.35)和阴性对照组的(1.22±0.10)、(1.16±0.09)和(1.59±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的细胞生存率为(40.53±2.21)%,低于空白对照组的(86.85±5.17)%和阴性对照组的(95.07±7.08)%,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的细胞凋亡率为(58.56±3.25)%,高于空白对照组的(12.15±1.14)%和阴性对照组的(4.93±2.12)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SOX2基因在细胞周期中特定时期的高表达会导致骨髓瘤细胞的凋亡。CCR1、CCR2和MCP-1基因参与了骨髓瘤细胞恶性增殖,其在细胞中的异常表达为骨髓瘤细胞提供合适的环境,导致疾病复发和抗凋亡的发生。

关键词： 细胞生物学   无纸化考试   实践与体会  

摘要： 目的探究在生物科学专业本科生中推行《细胞生物学》课程无纸化考试模式的效果。方法以某高校2015级生物科学专业本科生传统纸质试卷考试与该校2016级生物科学专业本科生无纸化考试为研究对象,对卷面平均成绩、各分数段考生占比、主观题与客观题得分率≥90%的试题占比等指标进行比较。结果与传统纸质试卷考试形式相比较,无纸化考试未显著影响考生卷面成绩和各分数段考生占比,显著降低主观题与客观题得分率≥90%的试题占比。结论无纸化考试模式的改革对培养人才素质的提高、构建节约型社会均具有重要意义。无纸化考试模式值得在其它专业和课程中进行推广。

关键词： 食管癌   磷酸甘油变位酶1(PGAM1)   Warburg效应   糖代谢   Akt/mTOR信号通路  

摘要： 目的探讨沉默磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)基因对食管癌细胞生物学功能的影响及可能机制。方法收集2016年7月至2017年6月间在我院行手术切除的67例食管癌及对应癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测PGAM1表达并分析其表达与临床病理特征的关系。PGAM1 sh RNA(sh PGAM1组)或sh RNA-NC(NC组)转染至食管癌Eca-109细胞,分析PGAM1基因沉默对Eca-109细胞凋亡和增殖的影响。采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting法检测PGAM1对Akt/m TOR信号通路关键分子的影响。结果食管癌组织中PGAM1高表达率为58. 2%(39/67),高于癌旁组织的31. 3%(21/67),差异有统计学意义(P<0. 05)。PGAM1表达与临床分期、分化程度、浸润深度有关(P<0. 05),而与年龄、性别、淋巴结转移等无关(P>0. 05)。sh PGAM1组和NC组中PGAM1 m RNA表达量分别为0. 48±0. 10和1. 01±0. 14,差异有统计学意义(P<0. 05)。MTT法检测结果显示,培养24、48、72、96 h后,sh PGAM1组Eca-109细胞增殖率分别为(87. 65±7. 42)%、(79. 34±9. 11)%、(70. 17±6. 84)%、(60. 36±7. 95)%,明显低于NC组,差异有统计学意义(P<0. 05)。48 h后sh PGAM1组和NC组的Eca-109细胞凋亡率分别为(45. 36±5. 38)%和(24. 81±4. 67)%,差异有统计学意义(P<0. 05); sh PGAM1组和NC组Eca-109细胞培养上清的葡萄糖消耗量分别为(56. 84±11. 35)%和(99. 87±10. 48)%,sh PGAM1组和NC组Eca-109细胞培养上清的乳酸含量分别为(48. 02±10. 18)%和(99. 00±12. 35)%,差异均有统计学意义(P<0. 05)。sh PGAM1组细胞的PTEN表达量高于NC组(P<0. 05),而p-Akt、p-mTOR表达量均低于NC组(P<0. 05)。结论 PGAM1高表达与食管癌的发生、发展有关,通过激活Akt/mTOR信号通路诱导的Warburg效应,促使肿瘤细胞增殖,抑制其凋亡。

关键词： 医学细胞生物学   对分课堂   过程性评价   自主学习   教学  

摘要： 目的探讨对分课堂教学模式在医学细胞生物学教学中的应用效果。方法选择西安医学院2016级检验本科专业的114名学生为对照组,2017级检验本科专业的120名学生为教改组。对照组采用传统教学模式授课,教改组采用对分课堂教学模式授课。对照组通过期末考试、绘制知识点框架图、调查问卷3种方式进行教学效果评价。教改组在对照组评价内容的基础上,增加随堂测验和随堂作业两项过程性评价指标,比较两组教学效果及教改组各次随堂测验和随堂作业标准化得分。结果教改组期末成绩、框架图中标记的知识点数目、问卷调查中的学习方法培养、解决问题能力提高、对课程认可度以及与其他课程相关性的得分均高于对照组(均P<0.05)。教改组第2、3、4、5次的随堂测验标准化得分和随堂作业标准化得分均分别高于第1次得分(均P<0.05)。结论与传统教学相比,对分课堂能提升学生的期末考试成绩,培养良好的学习方法,锻炼学以致用的实践能力,促进学生对知识的内在化吸收,保障学生进行自主性学习。

关键词： 翻转课堂   医学细胞生物学   课堂观察  

摘要： 为了培养学生自主学习的能力,本团队在医学细胞生物学课程教学过程中运用了翻转课堂教学的模式,深受学生喜爱并取得较好的学习效果。为进一步分析翻转课堂教学效果,本团队在翻转课堂的教学过程中从学生维度进行了课堂观察,内容包括学生在翻转课堂教学中的参与度及对核心知识的掌握程度,并请学生对该教学模式做了主观评价。结果分析表明,翻转课堂的教学模式,能达到预期教学目标,提高学生学习的自主性和学习热情,并受到学生的喜爱。

关键词： 导师团队建设   细胞生物学专业   研究生   创新思维  

摘要： 创新是一个民族进步的灵魂,研究生的培养离不开创新思维的培养。文章以细胞生物学专业研究生为例,阐述了目前该专业研究生培养存在的主要问题,并从改革理论教学方法、跟进实验技术手段,增设前沿性实验内容、营造创新的学术氛围、实施导师团队建设的指导模式和提高导师团队的创新思维等几个方面探讨了在导师团队背景下研究生创新思维的培养。

关键词： 生物物理学   生物化学   征稿简则   分子生物学   细胞生物学   蛋白质组学   系统生物学   栏目设置  

摘要： 1征稿范围与栏目设置 1.1征稿范围 本刊为国内外公开发行的全国性学术期刊,月刊,每月20日发行.征稿的学科范围是生物化学、分子生物学、生物物理学、细胞生物学、神经科学、免疫学,以及基因组学、蛋白质组学、系统生物学等相关学科领域.