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关键词： 胃癌   MAPK/ERK信号通路   PD98059   细胞增殖   细胞凋亡  

摘要： 目的:研究MAPK/ERK信号通路中关键信号分子MEK和ERK在胃癌SGC-7901细胞中的表达及PD98059抑制MAPK/ERK通路对胃癌细胞生物学功能的影响。方法:体外培养胃癌细胞株SGC-7901,不同浓度(0、25、50、100、200、300和400 mmol/L)PD98059处理24 h后CCK-8法检测细胞增殖率变化;再用0、25、50和100μmol/L PD98059处理24 h后采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MEK和ERK m RNA的表达量;Western blot检测MEK和ERK蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡变化。同时设正常胃黏膜上皮GES-1细胞为对照。结果:与正常胃黏膜上皮GES-1细胞相比,胃癌SGC-7901细胞中MEK和ERK mRNA的表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05);p-MEK、p-ERK蛋白的表达亦显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。0～200μmol/L PD98059处理SGC-7901细胞后,细胞增殖率随着抑制剂浓度的升高而降低(P<0.05)。当PD98059浓度处于200～400μmol/L时抑制作用逐渐趋于平稳。0～100μmol/L PD98059作用后MEK、ERK m RNA的表达量低于对照组(P<0.05),随着PD98059浓度升高,ERK mRNA表达量逐渐降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示50和100μmol/L PD98059作用后p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05)。且抑制剂PD98059使胃癌SGC-7901细胞发生G0/G1期阻滞,可诱导细胞凋亡。结论:MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞中激活,PD98059通过抑制MAPK/ERK信号通路的活性可影响胃癌细胞的生物学功能。

关键词： 复制缺陷型痘苗病毒天坛株(NTV)   复制缺陷机制   细胞生物学特性  

摘要： 痘苗病毒减毒株作为基因表达载体,广泛应用于多种疾病的预防和治疗。复制缺陷型痘苗病毒天坛株(Non-replicating Tiantan vaccinia virus,NTV)作为一株高度减毒的痘苗病毒株,其生物学特性和复制缺陷机制还有待研究。探究NTV细胞生物学特性和复制缺陷机制。在不同种属和组织来源的细胞中测定NTV复制能力、细胞嗜性和毒力;Western Blot检测HeLa细胞中的NTV的A17/A27蛋白表达水平,Real-time PCR检测晚期蛋白A17/A27转录水平。NTV在BHK-21、CEF细胞中可有效复制和扩散,而在Vero细胞及人源细胞HeLa、2BS、Hep-2和143TK-中均不能有效复制;在HeLa细胞中,晚期蛋白A17和A27蛋白表达受阻,而转录水平基本不变。NTV是一株复制缺陷型痘苗病毒,在多种细胞中复制和扩散受限;NTV晚期蛋白A17和A27的表达受阻且与蛋白表达转录水平无关,初步判定蛋白表达受阻发生在蛋白翻译阶段。

关键词： 神经母细胞瘤   SHEP2细胞   长链非编码RNA   MALAT1   miR-181a-5p   细胞侵袭   细胞增殖   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨长链非编码RNA MALAT1对神经母细胞瘤系细胞生物学特性的影响及作用机制。方法体外培养神经母细胞瘤系SHEP2细胞,细胞分为Control、sh-MALAT1、miR-181a-5p inhibitor和sh-MALAT1+miR-181a-5p inhibitor组,其中sh-MALAT1组转染sh-MALAT1,miR-181a-5p inhibitor组转染miR-181a-5p inhibitor,sh-MALAT1+inhibitor组共同转染sh-MALAT1与miR-181a-5p inhibitor,Control组加入等量空载体。PCR检测mRNA水平;生物信息预测MALAT1与miR-181a-5p的靶向关系,荧光素酶实验鉴定;CCK8法检测细胞增殖能力;Hoechst法检测细胞凋亡;划痕实验测试细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;免疫印迹法检测蛋白表达。结果 sh-MALAT1明显降低MALAT1并提高miR-181a-5p在神经母细胞瘤细胞系SHEP2细胞mRNA水平。miR-181a-5p mimic明显降低MALAT1 wt荧光素酶活性。sh-MALAT1抑制SHEP2细胞增殖、侵袭及迁移,促进细胞凋亡;miR-181a-5p inhibitor促进细胞增殖、侵袭及迁移,抑制细胞凋亡,并减弱sh-MALAT1产生的影响。同时,sh-MALAT1抑制PI3K/Akt信号通路,而miR-181a-5p inhibitor可激活此信号通路并减弱sh-MALAT1的抑制作用。结论MALAT1靶向下调miR-181a-5p表达促进神经母细胞瘤细胞系SHEP2细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词： MOOC   细胞生物学   混合式教学  

摘要： 细胞生物学是生物学专业本科生的一门必修专业基础课,由于课程内容多,学时少,理论知识不易理解,这就需要教育工作者尝试进行教学模式的改革并为学生提供更多获取知识的平台。在细胞生物学课程教学中引入基于MOOC平台的混合式教学模式,将网络课程与课堂教学相结合,更能激发学生的学习兴趣和积极性。本文主要探讨将MOOC应用于细胞生物学的教学中,通过混合式教学提高学生学习的主动性和积极性,增加教与学的互动,进而提高教学质量。

关键词： 细胞生物学   中国科学院   研究论文   合成生物学   生物化学   学术期刊   中文期刊   教学研究  

摘要： 《中国细胞生物学学报》(原《细胞生物学杂志》)创刊于1979年9月,目前由中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所和中国细胞生物学学会共同主办,是国内外公开发行的专业性学术期刊。在过去四十年里,作为我国细胞生物学最权威的中文期刊,《中国细胞生物学学报》秉承推动我国细胞生物学发展的宗旨,通过研究论文、综述论文和教学研究等栏目,发表了大量论文,为中国细胞生物学的发展作出了重要贡献。在学报创刊四十周年之际,我受学报主编郭礼和先生的委托,组织了创刊四十周年专栏,包含了囊泡运输、细胞器及其互作、细胞骨架、染色质生物学、细胞代谢、细胞死亡、干细胞、发育、器官再生、基于细胞的治疗和合成生物学等,每个专栏都由一位国内知名专家负责,他们再分别邀请相关专家撰写不同研究方向的综述论文。这些论文着重介绍相关研究领域的发展历史、重要进展和未来的展望,希望读者能感受到细胞生物学的快速发展和对大生命科学的贡献。借此机会,祝愿《中国细胞生物学学报》越办越好,为中国细胞生物学的发展作出更大的贡献。

关键词： 高迁移率族蛋白2   肝细胞癌  

摘要： 目的:探究高迁移率族蛋白2(HMGB2)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及对HCC细胞生物学活性的影响。方法:利用TCGA和GEO公共数据库数据,分析HMGB2 mRNA在HCC组织中表达的特点。采用Western blot法检测正常肝细胞LO2和HCC细胞SMMC7721、Hep3B中HMGB2蛋白的表达。分别用HMGB2 siRNA和阴性对照siRNA转染SMMC7721和Hep3B细胞,采用CCK-8检测细胞增殖,Transwell体外迁移实验检测侵袭能力,流式法检测细胞周期和凋亡,以未转染细胞为空白对照。结果:HCC组织中HMGB2 mRNA的表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05),TNM分期晚、分化程度低和甲胎蛋白高表达的HCC组织HMGB2 mRNA表达水平更高(P<0.05);Kaplan-Meier法生存分析结果显示,HMGB2 mRNA高表达者的总体生存期、无进展生存时间小于低表达者(P<0.05)。与空白对照和阴性对照siRNA转染细胞相比,HMGB2 siRNA转染的SMMC7721和Hep3B细胞中HMGB2蛋白表达降低,细胞增殖、侵袭能力降低(P<0.05),细胞被阻滞于G0/G1期(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论:HMGB2高表达能够促进HCC细胞的增殖、侵袭能力,有望成为HCC诊断及治疗的新靶点。

关键词： 棕色脂肪   间充质干细胞   衰老   小鼠  

摘要： 旨在探讨青年和老年小鼠肩胛骨间棕色脂肪来源间充质干细胞(Brown adipose-derived mesenchymal stem cells,BADSCs)生物学特性的比较。用细胞流式检测第3代BADSCs表面抗原表达,MTT法检测细胞增殖情况,7-ADD-AnnexinV双染色观察细胞凋亡情况和β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老情况,比较两组细胞的成骨和成脂分化差异。结果显示,第3代BADSCs表面抗原CD29、CD105和CD44的表达均为阳性、CD73为低表达。MTT法显示老年小鼠的BADSCs增殖能力与青年小鼠相比没有显著性差异(P>0.05)。7-ADD-AnnexinV双染色显示青年小鼠的BADSCs早凋比例4.63±0.87%,老年的BADSCs早凋比例9.88±0.81%,且有显著性差异(P<0.05)。β-半乳糖苷酶染色法显示青年组染成蓝色细胞数为2.33±0.3,老年组染成蓝色细胞数为6.66±1.2,有显著性差异(P<0.05)。青年组成骨分化OD值为1.26±0.046,老年组成骨分化OD值为0.88±0.047,有显著性差异(P<0.05)。青年组成脂分化OD值为0.9808±0.066,老年组成脂分化OD值为0.769±0.035,有显著性差异(P<0.05)。青年组的BADSCs更倾向于成骨分化,老年组的BADSCs更倾向于成脂分化。老年组小鼠凋亡和衰老细胞比例增加;成骨和成脂分化能力下降。

关键词： 乳腺癌   miR-146a   细胞增殖   细胞周期  

摘要： 目的检测miR-146a在乳腺癌组织中的表达情况及体外过表达miR-146a后对MDA-MB-231乳腺癌细胞周期、凋亡的影响。方法利用实时荧光定量PCR检测miR-146a在41例乳腺癌及7例正常乳腺中的表达;利用化学合成的miR-146a模拟物(has-miR-146a mimics)转染MDA-MB-231, 48h后,RT-PCR检测miR-146a过表达效率,流式细胞实验检测细胞的凋亡变化,CCK-8检测增殖能力变化。结果 miR-146a在乳腺癌组织中的表达量明显低于癌旁组织,且miR-146a的表达量与乳腺癌患者分期相关(P<0.05);过表达miR-146a后抑制MDA-MB-231细胞增殖,阻滞细胞周期进程。结论 miR-146a在乳腺癌组织中低表达,miR-146a可能通过调控CARD10蛋白表达发挥生物学功能。

关键词： lateral line system   auditory system   mechanosensation   hearing loss  

摘要： Although perhaps best known for their use in developmental studies, over the last couple of decades, zebrafish have become increasingly popular model organisms for investigating auditory system function and disease. Like mammals, zebrafish possess inner ear mechanosensory hair cells required for hearing, as well as superficial hair cells of the lateral line sensory system, which mediate detection of directional water flow. Complementing mammalian studies, zebrafish have been used to gain significant insights into many facets of hair cell biology, including mechanotransduction and synaptic physiology as well as mechanisms of both hereditary and acquired hair cell dysfunction. Here, we provide an overview of this literature, highlighting some of the particular advantages of using zebrafish to investigate hearing and hearing loss.

关键词： Axotomy   Chemokine   Conditioning lesion   Dorsal root ganglion   Macrophage   Neuroinflammation   Wallerian degeneration  

摘要： Neuroinflammation has positive and negative effects. This review focuses on the roles of macrophage in the PNS. Transection of PNS axons leads to degeneration and clearance of the distal nerve and to changes in the region of the axotomized cell bodies. In both locations, resident and infiltrating macrophages are found. Macrophages enter these areas in response to expression of the chemokine CCL2 acting on the macrophage receptor CCR2. In the distal nerve, macrophages and other phagocytes are involved in clearance of axonal debris, which removes molecules that inhibit nerve regeneration. In the cell body region, macrophage trigger the conditioning lesion response, a process in which neurons increase their regeneration after a prior lesion. In mice in which the genes for CCL2 or CCR2 are deleted, neither macrophage infiltration nor the conditioning lesion response occurs in dorsal root ganglia (DRG). Macrophages exist in different phenotypes depending on their environment. These phenotypes have different effects on axonal clearance and neurite outgrowth. The mechanism by which macrophages affect neuronal cell bodies is still under study. Overexpression of CCL2 in DRG in uninjured animals leads to macrophage accumulation in the ganglia and to an increase in the growth potential of DRG neurons. This increased growth requires activation of neuronal STAT3. In contrast, in acute demyelinating neuropathies, macrophages are involved in stripping myelin from peripheral axons. The molecular mechanisms that trigger macrophage action after trauma and in autoimmune disease are receiving increased attention and should lead to avenues to promote regeneration and protect axonal integrity.