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关键词： p14ARF   DNA甲基化   肺癌  

摘要： 目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,DAC)去除p14ARF基因启动子异常甲基化状态对人肺癌细胞生物学功能的影响。方法利用巢式甲基化特异性PCR(NMSP)检测spca1细胞系及beas2b细胞系p14ARF启动子区域甲基化情况,根据细胞类型及是否进行DAC处理将细胞分为4组:spca1 DAC处理组、spca1对照组、beas2b DAC处理组、beas2b对照组,每组设置6个复孔,Western blot检测各组p14ARF蛋白表达情况,流式细胞术进行细胞凋亡检测。结果 NMSP检测到spca1细胞p14启动子区域存在异常的甲基化状态,使用DAC去除p14启动子区异常甲基化spca1细胞中ARF蛋白的表达恢复,细胞凋亡率spca1 DAC处理组(20. 69±1. 03)%显著高于spca1对照组(10. 63±0. 82)%(t=13. 17,P <0. 05);而在beas2b细胞系以上结果均无明显差异,其中细胞凋亡率beas2b DAC处理组(7. 38±0. 36)%与beas2b对照组(6. 98±0. 42)%无显著差异(t=1. 25,P> 0. 05)。结论 DAC去除p14ARF启动子区域异常甲基化后ARF蛋白表达恢复,诱导spca1细胞凋亡,对肺癌发生起到抑制作用。

关键词： 应用型   生物工程   细胞生物学实验   教学改革  

摘要： 为适应应用型本科院校生物工程本科专业人才培养需要,提升应用型人才培养质量,需要对细胞生物学实验课程在教学内容、方法以及考核方式等方面进行改革探索。通过不断优化改进实验项目,注重理论与应用实践相结合;科学合理的考核方式,体现学生对理论知识的掌握以及实践动手能力的提高。

关键词： 放射线   舌鳞状细胞癌   Tca8113   生物学反应  

摘要： 目的探讨放射线治疗的分子机制,以更好地指导口腔鳞癌患者的临床放射治疗。方法以不同剂量(0、4、8、10 Gy)的放射线照射舌鳞癌Tca8113细胞,采用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,并在相差显微镜下观察细胞形态学变化。结果流式细胞仪分析结果显示,10 Gy放射线照射明显诱导了Tca8113细胞G2/M期阻滞和细胞凋亡,并且Tca8113细胞经10 Gy放射线照射后细胞形态发生了明显的变化。结论放射线照射可导致口腔癌细胞周期阻滞、凋亡和胀亡的形态学变化。

关键词： 高等教育   创新人才   考试改革   细胞生物学  

摘要： 考试内容和方法改革是高等教育培养创新人才的主要内容.从细胞生物学课程考试内容和方法改革入手,探索课程考试的有效方式和合理途径,能够更加科学、客观、全面地反映学生的学习成绩和学习能力,培养学生的创新能力,以适应创新人才培养的需要.

关键词： MSCs   DMOG   增殖   细胞周期   迁移   分化  

摘要： [目的]探讨二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的影响。[方法]以DMOG作用于P4代MSCs,分为DMOG 0、20、40和80μmol·L^(-1)组,以CCK-8法、流式细胞术、Transwell迁移法和Real-time q PCR依次检测不同浓度的DMOG对MSCs增殖能力、细胞周期、迁移能力以及成骨、成脂、成软骨和成神经分化能力的影响。[结果]DMOG各浓度组细胞生长曲线均接近S型,与DMOG 0μmol·L^(-1)组比较,20μmol·L^(-1)对MSCs增殖能力具有促进作用,40μmol·L^(-1)促进作用最明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。与DMOG0μmol·L^(-1)组比较,DMOG处理可提高处于S期+G2/M期的MSCs细胞比例,差异具有统计学意义(P<0.05)。与DMOG 0μmol·L^(-1)组比较,DMOG20μmol·L^(-1)时促迁移作用显著(P<0.05)。DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的成骨、成脂、成软骨、成神经分化能力,DMOG 20μmol·L^(-1)可显著促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制MSCs成脂分化能力,差异具有统计学意义(P<0.05),对MSCs成神经分化能力无显著影响(P>0.05)。[结论]不同浓度DMOG处理后,MSCs仍保留了原有的多向分化能力,其中20μmol·L^(-1)DMOG可促进MSCs成骨和成软骨分化能力,抑制其成脂分化能力,对其成神经分化能力无显著影响,同时可显著提高MSCs增殖、迁移能力。

关键词： 臭椿酮   肺癌   泛素-蛋白酶体通路   细胞增殖   成瘤性  

摘要： 目的观察臭椿酮对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响,并研究泛素-蛋白酶体通路(UPP)在其中的作用机制。方法采用含不同浓度的臭椿酮培养基干预人肺癌细胞系A549,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度臭椿酮不同培养时间对A549细胞增殖抑制的作用,Transwell小室侵袭实验检测臭椿酮对A549细胞侵袭能力的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法、免疫印迹法(Western Blot)分别检测A549细胞中泛素(Ub)、20S蛋白酶体及泛素-蛋白酶体相关基因NF-κB、cyclinE、cyclinA、Skp2、p27、p53 mRNA和蛋白表达情况。构建肺癌裸小鼠皮下移植瘤模型40只,随机均分为对照组、1 mg/kg臭椿酮组、5 mg/kg臭椿酮组、10 mg/kg臭椿酮组,每组各10只,分别予0.9%氯化钠注射液及相应浓度的臭椿酮0.5 mL腹腔注射干预,3 d 1次,共注射14次,每周测量裸小鼠体质量,6周后摘取肿瘤,测量肿瘤直径。结果 0.4μmol/L臭椿酮组、0.8μmol/L臭椿酮组和1.0μmol/L臭椿酮组各时间点A549细胞增殖抑制率明显高于对照组(P<0.05),且随着臭椿酮浓度的增加,其抑制率呈浓度依赖性增加(P<0.05)。与对照组比较,0.4μmol/L臭椿酮组、0.8μmol/L臭椿酮组和1.0μmol/L臭椿酮组穿过人工基底膜的细胞数明显减少(P<0.05),且随着臭椿酮浓度的增加,穿过人工基底膜的细胞数逐渐减少(P<0.05)。臭椿酮组A549细胞Ub、20S蛋白酶体、NF-κB、cyclinE、cyclinA、Skp2 mRNA和蛋白表达强度均低于对照组(P<0.05),p27、p53 mRNA和蛋白表达强度高于对照组(P<0.05)。1 mg/kg臭椿酮组、5 mg/kg臭椿酮组及10 mg/kg臭椿酮组裸小鼠体质量均较对照组同期无明显变化(P>0.05),肿瘤直径减小(P<0.05),且随着臭椿酮剂量的增加,裸小鼠肿瘤直径逐渐缩小(P<0.05)。结论臭椿酮可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭和成瘤能力,其机制可能是通过影响UPP,进而影响癌细胞中相关基因的表达来实现的。

关键词： 细胞生物学   实验教学   教学改革  

摘要： 细胞生物学实验是生物专业非常重要的一门实践性课程,在应用型人才培养中占有重要的地位。为了适应应用型人才培养的需求,从存在问题、改革课程体系、改革实验内容、改革教学模式、改革教学方法、改革考核方法方面对细胞生物学实验教学改革进行了探讨。

关键词： 细胞生物学   农林院校   课程教学  

摘要： 当前《细胞生物学》教材的主要内容来自于对酵母和动物的研究结果,而普通农林类院校生物学相关专业的教学内容以认识植物的生命活动规律为核心,讲授的具体内容与学生的专业联系并不密切。为弥补这种不足,我们在教学活动中特意将植物中细胞生物学相关研究的结论和最新研究进展融入到教学中,将细胞生物学的教学内容与专业特点紧密结合,激发学生的学习兴趣,提高教学效果。

关键词： 合作探究教学法   大班上课、小班讨论   细胞生物学  

摘要： 为提高《细胞生物学》教学效果,加强生物学专业知识的深入理解和系统掌握,培养高素质、创新型人才,本课程进行了以"大班上课、小班讨论"为形式的合作探究式教学试验。结果表明,教学效果良好,学生普遍欢迎。合作探究式教学在提高学生学习兴趣、拓展知识面、激发学习潜能、培养团队合作精神等方面都发挥了重要的作用。

关键词： 血管瘤   异甘草素   血管内皮细胞   PI3K/AKT信号通路   儿童  

摘要： 目的:探讨异甘草素对小儿血管瘤内皮细胞生物学特性及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将培养的小儿血管瘤内皮细胞分为4组,分别用0、20、40和80μmol/L异甘草素处理24、48、72 h,采用MTT法检测细胞活力。处理72 h后,采用Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力,流式细胞仪检测细胞周期变化和凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中Cleaved Caspase-3、Bax、Cyclin B1、MMP-9和p-AKT mRNA和蛋白的表达。结果:异甘草素能够呈时间、浓度依赖性地抑制小儿血管瘤内皮细胞生长;随异甘草素作用浓度的升高,侵袭细胞数和G0/G1期细胞百分比均逐渐降低,而G2/M期细胞百分比及细胞凋亡率均逐渐升高;Cleaved Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达水平逐渐升高,而Cyclin B1、MMP-9、p-AKT mRNA和蛋白表达水平逐渐下降(P<0.05)。结论:异甘草素可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制小儿血管瘤内皮细胞的生长和侵袭,诱导细胞周期阻滞,并促进细胞凋亡。