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关键词： 星形胶质细胞   增殖   凋亡   TFPI-2  

摘要： 目的:研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性的影响,探讨其对大鼠星形胶质细胞缺氧保护的机制。方法:从大鼠脑组织中分离培养星形胶质细胞,将细胞作缺氧处理,分别采用qRT-PCR和Western blot法检测星形胶质细胞中TFPI-2表达水平。在星形胶质细胞中转染TFPI-2 siRNA后,采用qRT-PCR和Western blot法检测TFPI-2基因沉默效果,MTT检测星形胶质细胞增殖,流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况,qRT-PCR检测星形胶质细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)mRNA表达水平。结果:Hypoxia组星形胶质细胞中TFPI-2 mRNA水平和蛋白水平明显高于Control组星形胶质细胞,转染TFPI-2 siRNA后,si-TFPI-2组星形胶质细胞中TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平明显低于si-control组细胞,差异有统计学意义(P<0. 05)。缺氧星形胶质细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,与正常培养的星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。对缺氧星形胶质细胞敲减TFPI-2后,细胞存活率升高,细胞凋亡率和细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,与缺氧星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:下调TFPI-2可以促进缺氧星形胶质细胞增殖,抑制细胞凋亡,其作用机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

关键词： 细胞生物学   实验教学   教学改革与实践   科研与教学相结合  

摘要： 作为医学院校生物工程、药学、基础医学和临床医学的骨干课程,细胞生物学实验课程的开展对学生掌握研究细胞的基本方法和技能、培养学生科研能力具有重要意义。本教研组从教学内容、教学模式和考核制度三个方面对细胞生物学实验教学进行了改革,以期提高实验教学质量、调动学生的积极性、培养学生独立思考、综合运用知识和科研创新的能力,为开展后续的科研项目和毕业论文设计奠定基础。

关键词： 胰腺导管腺癌   上皮细胞转化序列2   增殖   凋亡  

摘要： 目的:探讨上皮细胞转化序列2(epithelial cell transforming 2,ECT2)基因在人胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中的表达及其对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:采集2018年7月至2019年3月在海军军医大学附属长海医院病理科PDAC及相应癌旁样本各35例。通过GEO数据库中人胰腺癌基因表达谱筛选差异表达基因,采用TCGA数据分析该基因在PDAC中的表达及与患者生存的相关性。以qPCR及免疫组化在人PDAC样本中验证了ECT2 mRNA及蛋白的表达。以siRNA干扰人胰腺癌细胞系PANC-1中ECT2基因的表达,CCK-8增殖实验检测肿瘤细胞增殖,流式细胞术检测对胰腺癌细胞凋亡的影响,最后WB检测凋亡相关蛋白的变化。结果:生物信息学分析筛选出胰腺癌中差异表达基因ECT2,TCGA数据库分析发现其在癌组织中高表达(t=4.005,P<0.05)并与生存显著相关(P<0.01)。mRNA(1.01±0.06 vs 4.25±0.12,t=24.09,P<0.01)及蛋白水平验证其在人PDAC样本中高表达。干扰ECT2基因后,其细胞增殖受到明显抑制(P<0.01)、他莫昔芬诱导的细胞凋亡显著增加(P<0.01),同时影响凋亡相关蛋白BAX及BCL-2的表达。结论:ECT2基因在人PDAC中高表达并与患者生存相关,其增加了胰腺癌细胞的增殖及抗凋亡能力。本结果为探讨ECT2作为胰腺癌预后判断及治疗新靶点提供了实验依据。

关键词： 可溶性CD40配体   THP-1细胞   细胞增殖   细胞凋亡   侵袭   迁移   PI3K/AKT信号通路  

摘要： 目的急性单核细胞白血病(acute monocytic leukemia, AMoL)具有易浸润、易复发、预后差和死亡率高等特点。可溶性CD40配体(soluble CD40 ligand,sCD40L)在肿瘤细胞抗原递呈等方面发挥重要作用。本研究分析不同浓度的sCD40L对人白血病THP-1细胞增殖、凋亡、侵袭迁移及对PI3K/AKT信号传导通路表达影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法不同浓度2、4和6 Mg/mL的sCD40L作用THP-1细胞24 h,采用CCK-8法检测sCD40L对THP-1细胞增殖抑制作用,流式细胞术Annexin V FITC/PI法检测细胞凋亡的影响,迁移实验Transwell法检测3组不同浓度sCD40L单用或者联合PI3K抑制剂LY294002对THP-1细胞迁移能力的影响,蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号传导通路中关键蛋白PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT、MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果 CCK 8法检测2 Mg/mL的sCD40L A 值为 0. 317+0. 029,细胞增殖抑制率为(23. 62 土 2. 17)%细胞凋亡率为(14. 32 ± 2. 01)%;4 Mg/mL 的sCD40L A 值为 0. 253±0. 021,细胞增殖抑制率为(37. 24 ± 3. 68)%,细胞凋亡率为(50. 40 ± 6. 17)%;6 Mg/mL 的sCD40L作用THP-1细胞24 h后A值为0. 196±0. 017 ,细胞增殖抑制率为(52. 13 ±4. 96)%,细胞凋亡率为(67. 53±7. 26)%;对照组A值为0. 58 + 0. 05 ,增值抑制率为(11. 63 士 1. 07)%,细胞凋亡率为(& 79±0. 92)%;增值抑制率之间比较,差异有统计学意义,F=83. 184,P = 0. 001;细胞凋亡率之间比较,差异有统计学意义,F=100. 759, PV0. 001;Transwell法结果显示,单独使用sCD40L干预,随着sCD40L浓度增加,细胞迁移能力逐渐降低,同时加入PI3K抑制剂LY294002后,细胞迁移能力降低,与对照组比较,差异有统计学意义,F=90. 033,P<0. 001;蛋白质印迹法结果显示,随着sCD40L浓度增加,PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT、MMP-2和MMP-9蛋白表达随之降低,加入PI3K抑制剂LY294002后,AKT(F=5. 394, P = 0. 004)、PI3K(F = 5. 689, P = 0. 004)、p-AKT(F= 7. 621, P = 0. 001). p-PI3K( F =& 787,P<0. 001)、MMP-2(F=6. 827,P = 0. 002)和MMP-9(F=11. 903, P<0. 001)蛋白表达降低,与对照组比较,差异有统计学意义。结论 sCD40L能够在体外抑制白血病THP-1细胞增殖、诱导凋亡及抑制侵袭迁移,可能通过影响PI3K/AKT信号传导通路抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达发挥作用,为sCD40L用于AMoL的治疗提供了一定的实验依据。

关键词： 《中国细胞生物学学报》   细胞生物学  

摘要： 《中国细胞生物学学报》(原《细胞生物学杂志》)创刊于1979年9月,目前由中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所和中国细胞生物学学会共同主办,是国内外公开发行的专业性学术期刊。在过去四十年里,作为我国细胞生物学最权威的中文期刊,《中国细胞生物学学报》秉承推动我国细胞生物学发展的宗旨,通过研究论文、综述论文和教学研究等栏目,发表了大量论文,为中国细胞生物学的发展作出了重要贡献。

关键词： 胶质瘤   IQGAP1基因   细胞侵袭   细胞迁移   免疫抑制   STAT3信号通路  

摘要： 目的:探讨敲减IQGAP1基因表达对脑胶质瘤细胞侵袭、迁移及免疫抑制的影响及机制。方法:将人脑胶质瘤U251细胞随机分为空白组、阴性对照组和si-IQGAP1组,AG490作为STAT3信号通路抑制剂。转染48 h后,MTT法检测细胞活力;Western blot检测IQGAP1、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、STAT3和p-STAT3的蛋白水平;Transwell小室检测细胞的侵袭和迁移能力。结果:si-IQGAP1-1组和si-IQGAP1-2组的IQGAP1蛋白表达均显著低于空白组(P<0.05)。与空白组比较,si-IQGAP1组和AG490组的细胞活力、侵袭能力和迁移能力均显著降低,VEGF、TGF-β1和p-STAT3的蛋白水平均显著降低(P<0.05)。与AG490组比较,AG490+si-IQGAP1组的细胞活力、侵袭能力和迁移能力均显著降低,VEGF和TGF-β1的蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论:敲减IQGAP1基因表达可降低脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力,减弱细胞免疫抑制因子VEGF和TGF-β1的表达,机制与下调STAT3信号通路有关。

关键词： 微课   细胞生物学   自主学习  

摘要： 将多种教学方法和手段优化组合,以学生的自主学习为着眼点,全方位、多角度地培养具有岗位胜任力的医学人才是目前医学教学改革的重点。为培养学生自主学习的能力和方法,并针对《细胞生物学》现有教学方式的不足,我们在教学过程中运用了微课教学的模式:学生围绕相应的主题进行文献的查阅并自主制作微课;课程结束后,对学生的微课制作与课外作业的完成情况进行考核,并计入最终考核成绩。结果分析表明,微课的教学模式,能达到预期教学目标,有助于优化细胞生物学教学内容和前沿知识,激发学习兴趣,充分锻炼了独立思考潜能,提高了学生自主学习的能力。

关键词： Cellular biology   molecular biology   integration of research into undergraduate teaching   laboratory exercises  

摘要： This sequence of labs was developed for an upper level undergraduate cell biology course at Fairfield University. The labs are based on the use of the K562 human erythroleukemia cell line, a model system that is exceptionally amenable to an undergraduate cell biology lab course due to its ease of maintenance and propagation and usefulness for studies of growth, death, and differentiation. The sequence of labs is conducted over a 6-week period, following a series of weekly cell biology labs covering basic cell and molecular biology techniques. Together, the lab series has four primary objectives 1) to teach students how to culture and maintain mammalian cells;2) to build student competency in standard cell biology techniques;3) to demonstrate the role of growth factors on cell proliferation and viability;and 4) to provide students with an opportunity to use these cells in an independent investigation on cell differentiation. We provide examples of student data and offer a range of experimental measurements depending on institutional capacity and facilities. Our assessment data suggest that students find great value in this lab series, enhancing their comprehension of key concepts, acquisition of important lab skills, and depth of understanding of the research process. (c) 2019 International Union of Biochemistry and Molecular Biology, 47(3):263-271, 2019.

关键词： 细胞生物学   竞赛试题   奥林匹克   植物解剖   生物分类学   理论考试   生理   动物  

摘要： 理论考试A共3 h。1~10题:细胞生物学;1 1~1 7题:植物解剖和生理;18?30:动物解剖和生理;3 1~3 2:习性学;33~42:遗传和演化;4 3~4 7:生态;4 8~5 0:生物分类学。每个正确答案得1分。一个问题中4个答案都正确,得1分;只有3个答案正确,得0.6分;只有2个答案正确,得0.2分;只有1个答案正确,得0分。

关键词： miR-33a   胃癌   增殖   迁移   侵袭   粘附  

摘要： 目的探究miR-33a对胃癌细胞生物学功能的影响。方法收集胃癌患者胃癌组织标本40例,同时收集相应癌旁正常组织40例,采用实时定量PCR检测各组织中miR-33a相对表达量。以脂质体为载体将miR-33a模拟物转染于人胃癌细胞株SGC-7907(miR-33a mimics组),以转染脂质体的SGC-7907细胞为阴性对照组(miR-NC组),未转染的SGC-7907细胞为对照组(Control组)。采用CCK-8法检测各组细胞孵育不同时间后的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭,并检测各组粘附细胞数随孵育时间的变化。结果胃癌组织中miR-33a相对表达量明显低于癌旁正常组织(P <0. 01)。随着孵育时间延长,各组细胞增殖能力增强,且miR-33a mimics组增殖细胞数高于miR-NC组及Control组(P <0. 05)。miR-33a mimics组细胞迁移数及侵袭数均少于miR-NC组及Control组(P <0. 05),其粘附细胞数少于miR-NC组(P <0. 01)。结论胃癌组织低表达miR-33a,提升miR-33a表达量能明显抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭及粘附能力。