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关键词： 附属小学   私塾教育   蒙养院   高等师范   细胞生物学   求学之路   汪德耀   安徽安庆  

摘要： 求学之路道阻且长汪德耀先生祖籍安徽安庆,1903年2月8日出生于江苏省灌云县板蒲镇一个普通的小职员家庭,幼年接受私塾教育,背诵四书五经、古文诗词。稍长,在父亲的影响下,他广泛接触大自然,启发了对生物学的兴趣。1912年,其父亲被聘为农林部主事,他即随父母迁往北京,先入蒙养院,后进入北京高等师范(今北京师范大学)附属小学和中学学习,开始接受现代教育。

关键词： 组织金属蛋白酶抑制因子-3   p38信号通路   腹主动脉瘤   平滑肌细胞   生物学特性  

摘要： 目的:探讨组织金属蛋白酶抑制因子- 3(tissue inhibitor of metalloproteinase - 3, TIMP - 3)靶向抑制p38信号通路对腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysms, AAAs)人血管平滑肌细胞(human vascular smooth muscle cells,HVSMCs)生物学特性的影响。方法:将HVSMCs分为Control组(不进行任何处理)、NC组(转染空载体)、TIMP - 3组(转染TIMP - 3载体)、SB203580组(加p38信号通路抑制剂SB203580)4组。采用qRT - PCR和Western blotting检测各组转染细胞中TIMP - 3、p38MAPK、Bcl - 2、Bax、Caspase - 3的mRNA及蛋白表达水平;MTT法检测HVSMCs增殖能力;流式细胞术检测HVSMCs细胞周期和凋亡情况。结果:与Control组相比,TIMP - 3组细胞中TIMP - 3、Bcl - 2的mRNA和蛋白表达量显著增加,p38MAPK、Bax、Caspase - 3的mRNA和蛋白表达量显著下降(均 P <0.05);Control组与SB203580组相比,细胞中TIMP - 3的mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义(均 P >0.05),而Bcl - 2的mRNA和蛋白表达量显著增加,p38MAPK、Bax、Caspase - 3的mRNA和蛋白表达量显著下降(均 P <0.05)。相对于Control组,TIMP - 3组和SB203580组细胞增殖能力显著提高,凋亡减少,G 1期细胞比例减少,同时S期、G 2期细胞比例显著增加(均 P <0.05)。结论: TIMP - 3基因可抑制p38信号通路的激活,进而促进HVSMCs增殖,抑制其凋亡,在腹主动脉瘤的发病中具有保护作用。

关键词： 自组装单分子层技术   细胞生物学  

摘要： 本篇综述简单总结了自组装单分子层技术在研究蛋白吸附、生物识别、细胞粘附以及制备图案化和动力学表面等方面的进展.

关键词： 形成素同源蛋白   非小细胞肺癌   转移   预后  

摘要： 目的探讨同源形成素蛋白2(formin homology proteins,FMNL2)在肺癌细胞系中的表达,及其与肺癌细胞侵袭、迁移的相关性。方法通过细胞转染siRNA降低FMNL2的表达,采用细胞增殖实验、划痕实验和侵袭实验等观察FMNL2对肺癌HCC827细胞的影响。结果敲低FMNL2的表达,发现肺癌HCC827细胞的活力以及增殖能力均降低,而在划痕实验和侵袭实验中,敲低FMNL2也降低了划痕的愈合速度和侵袭细胞数量。结论FMNL2的高表达能够促进肿瘤的恶性生物学行为,FMNL2参与并调控了肺癌细胞的发生和发展过程,并可能成为影响患者预后的关键因子。

关键词： 颌骨骨髓间充质干细胞   自然衰老   骨质疏松   成骨分化  

摘要： 目的:探讨衰老性骨质疏松微环境对颌骨骨髓间充质干细胞(Jaw bone-marrow-derived mesenchymal stem cells,JBMMSCs)生物学功能的影响。方法:分别取2月龄和20月龄SD(Sprague Daw ley)大鼠,分离其颌骨和股骨,并进行Micro-CT扫描,确定衰老性骨质疏松大鼠模型建立成功;体外分离、培养并鉴定两组大鼠的JBMMSCs,通过克隆形成实验、CCK8实验和成骨诱导观察其增殖和成骨分化能力;并采用实时定量荧光PCR技术(Real-time PCR)对成骨诱导7d后的JBMMSCs成骨重要相关基因Runx2、OCN进行检测。结果:与2月龄大鼠相比,20月龄大鼠颌骨、股骨均出现了明显的骨质疏松,主要表现为骨密度及骨小梁强度下降;年轻和衰老大鼠JBMMSCs阳性表达CD29、CD90,阴性表达CD34、CD45,符合间充质干细胞特性;衰老组JBMMSCs的增殖、成骨分化能力以及Runx2 mRNA、OCN mRNA表达水平均显著下降(*P<0. 05)。结论:JBMMSCs增殖和成骨分化能力降低可能是导致颌骨骨质疏松的重要原因。

关键词： 配对盒基因6   小鼠胚胎干细胞   基因转染   G418筛选   流式细胞术   小鼠  

摘要： 目的建立配对盒基因6(Pax6)/小鼠胚胎干细胞(m ESCs)细胞系并鉴定其干细胞生物学特性。方法体外培养m ESCs,将重组载体p EF1α-Pax6-IRES-AcGFP和空载体p EF1α-IRES-AcGFP分别用脂质体法转染m ESCs,经G418梯度及荧光蛋白双筛选后,使用细胞免疫荧光染色、免疫印迹法及RT-PCR技术检测Pax6的表达情况,流式细胞术检测Pax6/m ESCs阳性细胞的比例。将获得正确的细胞系分别采用细胞免疫荧光染色对其干细胞标志物阶段特异性胚胎抗原1(SSEA1)、八聚体结合转录因子4(OCT4)进行检测,碱性磷酸酶(AP)染色法对其多能性进行检测,流式细胞术检测增殖指数Ki67。将Pax6/m ESCs进行肾背囊下移植,移植物行HE染色观察其分化能力。结果 Pax6成功在m ESCs内表达,经G418筛选后,获得Pax6/m ESCs细胞系,流式结果显示,Pax6阳性率为90%,免疫荧光显示,干细胞标志物SSEA1、OCT4表达阳性且AP染色阳性,并且在体内移植后能向3个胚层分化。结论 Pax6成功在m ESCs内表达,经G418筛选后,获得细胞系Pax6/m ESCs并维持良好的干细胞特性。

关键词： 细胞生物学   课程   知识体系   解构   教学实践  

摘要： 课程知识体系的构建始终是课程建设与教学改革的根本。以国内普遍采用的由翟中和等主编的《细胞生物学》为蓝本,运用PBL模式对细胞生物学课程知识体系进行解构,以理顺细胞学、细胞生物学与细胞分子生物学之间的关系,突出课程重点、化解课程难点、顾及课程热点;有利于师生更好地把握细胞生物学课程教学的主要目标与任务,提升教与学的水平。同时,提炼了该课程知识体系下多年教学的体会,以供借鉴。

关键词： 诺贝尔奖   中医药国际化   兰迪   诺贝尔生理学或医学奖   拉斯克基础医学奖   斯坦福大学   细胞生物学   医学研究所  

摘要： 【专家简介】兰迪·谢克曼(Randy ***)——毕业于加州大学洛杉矶分校和斯坦福大学,1974年获得博士学位。导师是阿瑟·科恩伯格教授(1959年获得诺贝尔奖)。1976年,谢克曼任职于加利福尼亚大学伯克利分校,目前为该大学分子和细胞生物学系教授,并兼任霍华德·休斯医学研究所研究员。曾任《美国国家科学院院刊》主编。1992年当选美国国家科学院院士。2002年与詹姆斯·罗思曼因对细胞膜传输的研究获拉斯克基础医学奖。2013获得诺贝尔生理学或医学奖。

关键词： 结肠癌   干细胞   胰岛素样生长因子2   自我更新   干性维持  

摘要： 目的探讨下调胰岛素样生长因子2(IGF2)基因对HCT116结肠癌干细胞生物学特性的影响。方法采用流式细胞分选技术利用CD133抗体从结肠癌HCT116细胞株分离结肠癌干细胞。采用流式细胞术检测分离前后CD133+细胞的比例,通过成球实验、免疫荧光染色、流式细胞术测定肿瘤干细胞标志蛋白的表达和软琼脂克隆形成实验等方法鉴定结肠癌干细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测结肠癌干细胞中IGF2的表达,应用小干扰RNA建立IGF2瞬时干涉细胞模型,通过细胞增殖实验、细胞周期和凋亡测定、细胞侵袭实验、克隆形成实验等观察下调IGF2对结肠癌干细胞生物学特性的影响。结果从结肠癌HCT116细胞中成功分离出干细胞,并可在无血清干细胞培养基中培养形成细胞球,连续消化传代后仍能保持与原代相同的形态特征。免疫荧光染色分析显示,干细胞标志物CD133和乙醛脱氢酶(ALDH)在结肠癌干细胞表面持续阳性表达。在软琼脂培养基上培养13 d后,非肿瘤干细胞组的克隆形成率为(28.10±2.66)%,肿瘤干细胞组的克隆形成率为(43.73±2.30)%,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-qPCR结果显示,非肿瘤干细胞组和肿瘤干细胞组中IGF2的基因表达水平分别为1.06±0.24和2.17±0.51,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,非肿瘤干细胞组和肿瘤干细胞组中IGF2的蛋白表达水平分别为1.10±0.55和2.14±0.23,差异有统计学意义(P<0.05)。下调IGF2基因后,结肠癌干细胞的增殖受到抑制(P<0.01);结肠癌干细胞中CD133+细胞的比例明显降低;细胞周期中G2/M期细胞比例增高(siNC组为23.46%,siIGF2组为60.14%),同时G0/G1期细胞比例降低(siNC组为40.77%,siIGF2组为17.73%);细胞凋亡率显著增高(siNC组为2.80%,siIGF2组为40.70%);siNC组和siIGF2组穿透至基底膜下室面的细胞数分别为109.00±16.37和54.00±8.19,差异有统计学意义(P<0.01);siNC组和siIGF2组的干细胞成球率分别为(51.70±7.42)%和(21.27±2.35)%,差异有统计学意义(P<0.01);siNC组和siIGF2组的克隆形成率分别为(37.20±3.87)%和(18.23±2.25)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论IGF2基因在维持结肠癌干细胞生物学特性中发挥重要作用,并促进了干细胞的自我更新和干性维持。

关键词： miR-31   SFRP1   Wnt/β-catenin   胃癌   MKN45   增殖   迁移   侵袭  

摘要： 目的探讨miR-31靶向SFRP1调控Wnt/β-catenin信号通路及其在胃癌增殖、迁移和侵袭过程中的作用。方法收集300例胃癌患者的癌组织及癌旁5 cm的正常组织标本作为研究对象。实时定量PCR(qRT-PCR)法比较胃癌组织及癌旁正常组织中miR-31的表达水平,免疫组化法检测SFRP1蛋白表达水平。在人胃癌细胞系MKN45中转染miR-31过表达和抑制剂、SFRP-1过表达质粒及siRNA,Western blotting法检测SFRP1和β-catenin表达,CCK8法检测细胞增殖水平。Transwell法检测细胞体外迁移和侵袭能力。Luciferase荧光素酶报告基因法检测Wnt/β-catenin通路活化情况。结果胃癌组织及其细胞系MKN45中miR-31表达水平明显上调,SFRP1阳性表达率降低(P<0.05)。体外转染miR-31 inhibitor可抑制MKN45细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05);转染miR-31 mimic可抑制SFRP1表达,促进β-catenin表达,从而促进细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论miR-31在胃癌组织中呈高表达,可抑制SFRP1表达,激活Wnt/β-catenin通路,从而抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。