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关键词： 教学研究   细胞生物学实验   细胞膜渗透性   创新实践  

摘要： 细胞生物学实验是高等院校"细胞生物学"课程的重要教学环节。为了适应"细胞生物学"实验教学实际需要和深化实验教学改革,提高学生学习兴趣,培养学生创新意识,该文对细胞膜的渗透性实验进行了优化创新和实践,增加了必要的实验药品和等渗溶液p H值测定等实验内容,并在本校2017和2018年度实验教学中进行了教学实践。该实践获得了明确的实验结果和分析,对学生的教育意义深刻,取得了良好的教学效果,对高等院校"细胞生物学"实验教学改革创新具有参考意义。

关键词： 脂滴   生物物理学   细胞生物学  

摘要： 最早对脂滴的研究可以追溯到19世纪,Richard Altmann和***都描述了细胞中的脂肪滴,并推测了它们的起源(Altmann,1890;威尔逊,1896)。早期,脂滴的高衍射特性为其鉴定提供了便利的光学条件。20世纪初,由于它们被认为是大多数细胞的组成部分,这种细胞器被称为脂质体。然而,在20世纪60年代末,人造脂质体被发明出来,并很快取代了这个名字。从那时起,这种细胞器被有过许多名称,包括脂滴、脂体、脂体、脂滴和脂质体。在植物中,它们通常被称为油体。随着这一领域的迅速发展,它似乎已经定名为“脂滴”。几十年来,除了形态学研究,脂滴的其他方面几乎没有受到关注。1991年,脂肪细胞中与脂滴相关的磷酸蛋白perilipin的发现,引起人们对这种细胞器的新关注。从那时起,关于脂滴的论文数量急剧增加,关于脂滴的功能也逐渐被重视起来。

关键词： 肺腺癌   血红素加氧酶1   自噬   增殖   侵袭   迁移  

摘要： 目的观察血红素加氧酶1(H0-1)基因敲减对肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并探讨其机制.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人支气管上皮细胞(HBECs)和人肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达水平,免疫组织化学染色检测人肺腺癌标本组织中HO-1的表达量.采用RNA干扰技术,将HO-1短发卡RNA(shRNA)转染A549细胞,制备稳定低表达HO-1的A549细胞(HO-1 shRNA组),并行RT-qPCR和Western blot验证.应用自噬诱导剂Torin1或抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)处理HO-1 shRNA组A549细胞和对照组细胞,Western blot检测各组自噬标志物LC3B和p62的表达.采用计数法、Transwell实验和伤口愈合实验分别评估各组A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力.结果肺癌细胞系A549、H1299、H358和H1993中HO-1 mRNA的表达均显著高于HBECs,人肺腺癌组织中HO-1过表达.未处理、Torin1处理和Baf A1处理情况下,HO-1 shRNA组细胞的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值和p62蛋白表达量均高于相应对照组(均P<0.05);经过11d培养后,HO-1 shRNA组细胞数分别为相应对照组的41.8%、30.4%和14.0%;HO-1 shRNA组下室细胞数分别为(35.7±2.1)、(27.0±1.0)和(38.0±1.0)个/视野,均低于相应对照组[分别为(66.0±9.2)、(39.3±1.2)和(43.0±2.6)个/视野,均P<0.05];HO-1 shRNA组的迁移距离分别为(7.47±0.91)、(4.23±0.82)和(5.42±0.24)mm,均低于相应对照组[分别为(10.07±1.26)、(7.14±0.07)和(12.04±0.80)mm,均P<0.05].结论HO-1敲减通过阻止自噬来抑制肺腺癌细胞增殖、侵袭和迁移.

关键词： 神经菌毛素-1   急性淋巴细胞白血病   CCRF-CEM细胞   生物学特性  

摘要： 目的:探究神经菌毛素-1(NRP-1)对急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞的生物学特征的影响。方法:分别采用以下两种方法(构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株或使用NRP-1单克隆抗体)抑制NRP-1功能,通过对比抑制NRP-1功能后CCRF-CEM细胞株与正常CCRF-CEM细胞株,确定NRP-1对CCRF-CEM细胞的生物学特性的影响。结果:成功构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株(NRP-1-shRNA)。两种方法抑制NRP-1功能后,细胞的增殖、迁移能力均显著降低,而细胞凋亡及对化疗药物的敏感性增加。结论:NRP-1可促进急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞增殖和细胞迁移能力,抑制细胞的凋亡和降低细胞的化疗敏感性。

关键词： 椎间盘突出   髓核细胞   细胞外基质   骨髓间充质干细胞条件培养基   Ⅱ型胶原   蛋白聚糖   基质金属蛋白酶-3  

摘要： 目的观察经骨髓间充质干细胞条件培养基培养的退变髓核细胞的生物学活性及细胞外基质表达的变化。方法(1)从成年SD大鼠股骨和胫骨中提取骨髓间充质干细胞,传代培养后,收集骨髓间充质干细胞条件培养基;(2)取成年大鼠,破坏其椎间盘纤维环,2周后获得椎间盘退变大鼠模型,提取大鼠脊柱髓核细胞;(3)以骨髓间充质干细胞条件培养基培养髓核细胞24 h。结果与正常髓核细胞比较,退变髓核细胞的活性[(59.43±12.33)%,t=11.647,P<0.01]明显降低,细胞中Ⅱ型胶原(0.50±0.12,t=14.677,P<0.01、0.49±0.17,t=7.153,P<0.01)、蛋白聚糖(0.72±0.23,t=15.436,P<0.01、0.26±0.32,t=8.816,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显减少,基质金属蛋白酶-3(1.48±0.31,t=15.436,P<0.01、2.00±0.24,t=29.640,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显增多。而骨髓间充质干细胞条件培养基可显著恢复退变髓核细胞的活性(79.62±10.11,t=4.786,P<0.01),并促进细胞中Ⅱ型胶原(1.23±0.16,t=10.933,P<0.01;0.74±0.16,t=3.506,P<0.01)、蛋白聚糖蛋白(1.49±0.28,t=9.359,P<0.01;0.99±0.37,t=6.846,P<0.01)及mRNA表达,降低基质金属蛋白酶-3(0.49±0.39,t=9.359,P<0.01;0.89±0.12,t=21.934,P<0.01)蛋白及mRNA表达,但骨髓间充质干细胞条件培养基对正常髓核细胞的活性(94.87±8.36,t=0.524,P>0.05)以及细胞中Ⅱ型胶原(1.52±0.18,t=0.299,P>0.05;1.21±0.31,t=1.543,P>0.05)、蛋白聚糖(1.81±0.32,t=0.486,P>0.05;0.99±0.16,t=0.094,P>0.05)和基质金属蛋白酶-3(0.24±0.14,t=0.486,P>0.05;0.55±0.11,t=0.593,P>0.05)蛋白及mRNA表达水平没有明显影响。结论骨髓间充质干细胞条件培养基对退变髓核细胞的增殖以及细胞外基质蛋白表达有促进作用。

关键词： 医学细胞生物学   QQ群   教学  

摘要： 医学细胞生物学是我校临床医学、口腔医学本科等专业的一门重要的专业必修课程。该课程知识点零散且抽象,仅利用课堂时间开展教学已不能满足学生的需求。将QQ群运用在医学细胞生物学教学过程中,可以打破时间局限,培养学生的自学能力、强化师生间交流,从而有效提高了教学质量。

关键词： miR-760   食管鳞状细胞癌   c-Myc   靶基因  

摘要： 目的·观察miR-760对人食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)TE-10细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响并初步探究其机制。方法·应用反转录–定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting检测miR-760和c-Myc在5个ESCC细胞株(正常食管鳞状上皮细胞作为对照)和14例ESCC组织(癌旁组织作为对照)标本中的mRNA与蛋白表达水平。使用miR-760的模拟物、抑制剂(miR-mimics组、miR-inhibitor组)及模拟物阴性对照、抑制剂阴性对照(mimics-NC组、inhibitor-NC组)转染TE-10细胞,通过RT-qPCR验证miR-760的过表达和抑制效率以及c-Myc在mRNA水平的表达变化。CCK-8和集落形成实验检测miR-760对TE-10细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡比例的变化;Western blotting分析c-Myc蛋白及细胞周期、凋亡、迁移和侵袭等相关蛋白表达水平的变化。通过双荧光素酶实验验证miR-760与c-Myc的靶向结合作用。结果·5个ESCC细胞株的miR-760表达水平均低于正常食管鳞状上皮细胞,而c-Myc mRNA和蛋白的表达水平高于正常食管鳞状上皮细胞;在癌组织中miR-760的表达水平较癌旁组织降低,而c-Myc mRNA和蛋白的表达水平较癌旁组织升高。与mimics-NC组相比,miRmimics组的细胞增殖能力降低,细胞形成的集落数目减少,阻滞在G1期的细胞和凋亡细胞的比例均明显增加,迁移和侵袭细胞的数量减少;miR-mimics组周期蛋白D1、B细胞淋巴瘤2蛋白、基质金属蛋白酶2和波形蛋白的表达水平降低,而裂解型半胱氨酸蛋白酶3、上皮钙黏素和β-连环蛋白的表达水平升高;miR-inhibitor组则呈现与miR-mimics组相反的结果。双荧光素酶实验证实了miR-760与c-Myc 3'非翻译区具有靶向结合作用。结论·miR-760可能通过靶向c-Myc抑制TE-10细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡。

关键词： PK-15细胞   生物学特性   鉴定  

摘要： 对PK-15细胞进行细胞形态、生长曲线、微生物、外源病毒、胞核学及细胞致瘤性等特性进行了研究。结果表明,PK-15细胞呈不规则多边形、生长状态良好,无细菌、外援病毒及支原体污染,染色体共19对,细胞无致瘤性。