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关键词： 研究生培养   细胞生物学   实验教学   科研技能提升  

摘要： 生命科学是建立在实验基础上的学科,实验教学对于提高研究生的科研创新及实验技能具有重要的作用。笔者探索以科研平台为依托开展现代细胞生物学方法实验课:以科研一线教师为主导,通过立体丰满的课题式实验设计,将细胞生物学前沿实验技术予以展开,结合仪器和技能培训,以小组探讨式学习形式开展。这一实验课程促使研究生对课题设计有了初步的认识,掌握仪器使用和实验操作的同时了解如何应用实验技能实现实验设计,小组探讨式学习开启研究生自我探索和解决问题的意识,此外有助于提高科研平台的投入产出比。

关键词： NB4细胞   血液系统疾病   白血病   癌症发生发展   前期实验  

摘要： 虽然已陆续发现一些与癌症发生发展相关的功能性长链非编码RNA(lncRNA),但人们对lncRNA功能和机制的研究尚处于起步阶段,目前已知确切功能的lncRNA数量极少.lncRNA与多种血液系统疾病相关,然而其在白血病发病中的作用尚不清楚.我们前期实验揭示了急性白血病(AL)患儿lncRNA与正常儿童存在明显差异[1],本研究选取差异最显著的AC002454.1,探讨AC002454.1在儿童AL中的表达及其对NB4白血病细胞生物学功能的影响.

关键词： 细胞生物学   生命   个人   科学   奠基者   小动物   启蒙者   读书  

摘要： 1.他是从乡村走出来的博士,为了读书,做过许多种苦工;他是我国细胞生物学和实验生物学的创始人和奠基者之一,对我国生物学作出了重要贡献。他叫朱洗。2.1900年10月14日,朱洗出生在浙江临海的店前村。祖父经营中药铺,爱养鸟等小动物,是引导他走进生物世界的启蒙者。到了学龄,朱洗进入私塾,读书很勤奋。

关键词： 少突胶质前体细胞   保存   保存介质   细胞活率   细胞增殖能力   国家自然科学基金  

摘要： 背景:保存介质直接影响干细胞活性以及细胞功能,目前国内外缺乏对人少突胶质前体细胞保存介质方面的研究。目的:评价临床常用的保存介质对人少突胶质前体细胞活率的影响。方法:在4℃条件下,将处于对数生长期的人少突胶质前体细胞分别在少突细胞完全培养基、含有1%白蛋白的生理盐水、生理盐水中放置24h,比较不同保存介质中的细胞活性以及继续培养后的细胞增殖能力。结果与结论:①细胞冷藏24h进行锥虫蓝染色,少突细胞完全培养基组、含有1%白蛋白的生理盐水组、生理盐水组细胞活率分别为83%,68%和51%,少突细胞完全培养基组细胞活率最高,单纯生理盐水组细胞活率最低;②细胞冷藏后继续培养1代,3种保存介质中少突胶质前体细胞的扩增能力有逐渐降低的趋势,少突细胞完全培养基组细胞增殖能力最高,其次是含有1%白蛋白的生理盐水组,单纯生理盐水中保存的细胞无法继续增殖。

关键词： 前列腺肿瘤   基因,   Src   NIN1结合蛋白1  

摘要： 目的探讨NIN1结合蛋白1(NOB1)对前列腺癌细胞生物学特性的影响及其作用机制。方法采用实时定量PCR和Western印迹法检测常见前列腺癌细胞22RV1、PC-3、DU145、LNCap中NOB1的表达量;构建NOB1干扰慢病毒,转染前列腺癌细胞PC-3、DU145,并检测干扰效率。采用MTT法检测敲低NOB1后前列腺癌细胞PC-3和DU145增殖活性,应用流式细胞技术检测敲低NOB1后前列腺癌细胞PC-3和DU145周期,采用Transwell实验检测转染NOB1干扰慢病毒后前列腺癌细胞PC-3和DU145的侵袭能力。检测敲低NOB1后的人Src原癌基因(c-Src)磷酸化水平。结果恶性程度较高的前列腺癌细胞22RV1、PC-3、DU145的NOB1 mRNA相对表达量均显著高于恶性程度较低的前列腺癌细胞LNCaP(P值均<0.05);前列腺癌细胞22RV1、PC-3、DU145的NOB1蛋白质相对表达量均显著低于前列腺癌细胞LNCaP(P值均<0.05)。在NOB1表达量较高的前列腺癌细胞PC-3和DU145中转染NOB1干扰慢病毒(Lv-shNOB1,敲低组)和空白对照慢病毒(Lv-shCtrl,阴性对照组)以构建NOB1敲低模型,PC-3、DU145细胞的敲低组NOB1 mRNA相对表达量均显著低于空白对照组(不转染病毒)和阴性对照组(P值均<0.05),表明构建慢病毒介导NOB1稳定敲低前列腺癌细胞PC-3和DU145。PC-3、DU145细胞的敲低组NOB1蛋白质相对表达量均显著低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05)。实验第3、4、5天,PC-3、DU-145细胞敲低组A595值均显著低于阴性对照组同时间(P值均<0.05)。PC-3和DU145细胞阴性对照组的G0/G1期细胞百分比均显著低于敲低组(P值均<0.05),S期细胞百分比均显著高于敲低组(P值均<0.05)。PC-3、DU145细胞敲低组的迁移细胞数均显著低于阴性对照组和空白对照组(P值均<0.01)。PC-3、DU145细胞敲低组c-Src(tyr416位点)的磷酸化半定量均显著低于阴性对照组(P值均<0.01)。结论敲低NOB1可能通过抑制c-Src的磷酸化来降低前列腺癌细胞的增殖和侵袭能力。

关键词： 中国科学院院士   实验胚胎学   生物科学研究   海洋科学研究   中共党员   细胞生物学   童第周   主要创始人  

摘要： 童第周(1902-1979),中共党员,民盟盟员,中国科学院院士,我国卓越的生物学家、教育家、社会活动家,中国实验胚胎学的主要创始人,中国海洋科学研究的奠基人,生物科学研究的杰出领导者,被誉为“中国克隆之父”。在将近50年的科研生涯中,童第周一直从事实验胚胎学、细胞生物学和发育生物学等领域的研究。

关键词： 细胞生物学   考核模式改革   实验教学  

摘要： 作为生命科学的一门主干和基础课程,细胞生物学的教学效果对生命科学方向学生以后的学习和科研有着很重要的作用。但目前的教学模式存在以“教”为主、学生积极性不高的问题。将理论和实验教学相联系,进行教学模式和考核方式的改革,将有助于提高学生的学习兴趣和主动学习的能力,提高教学质量。

关键词： 血管外膜细胞   造血干/祖细胞   间充质干细胞   周细胞   内皮细胞   造血   国家自然科学基金  

摘要： 背景:血管外膜细胞广泛分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们可以为其他细胞的生长繁殖提供支持作用以及调节机体的免疫状态和免疫防御等。近年来越来越多研究显示,血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其通过细胞接触或旁分泌效应调节造血干细胞的行为并支持造血。目的:就血管外膜细胞的分布、功能以及对造血干/祖细胞的支持作用作一综述。方法:以“pericyte,perivascular cell,hematopoietic stem/progenitor cells”以及“血管外膜细胞,间充质干细胞,周细胞,造血干/祖细胞”为检索词,检索PubMed数据库、CNKI数据库及万方数据库2008至2018年间相关文献,并纳入64篇文献进行综述。结果与结论:血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,具有与间充质干细胞相似的生物学特性,表达间充质干细胞的表面标记物,并具有向成骨、成脂及成软骨细胞等分化的潜能,且可调节造血干细胞行为并支持造血。

关键词： 结直肠肿瘤   基质金属蛋白酶2   小RNA干扰   Wnt/β-catenin信号通路  

摘要： 目的:探讨小RNA干扰基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:收集结直肠癌病人的结直肠癌组织及正常的癌旁组织,Western blotting检测MMP-2表达水平。取结直肠癌细胞SW620作为对照组,将MMP-2 siRNA、siRNA control转染至结直肠癌细胞中,Western blotting检测转染48 h后MMP-2 siRNA组、siRNA control组和对照组细胞中MMP-2水平,MTT法检测各组细胞存活情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡变化,Western blotting检测各组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、β-连环蛋白(β-catenin)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、下游靶基因C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)水平。结直肠癌细胞与Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535作用后,测定抑制剂组和未处理组(不加抑制剂)细胞增殖、凋亡变化,同时检测细胞中Bcl-2、β-catenin、Bax、C-myc、cyclin D1蛋白变化。结果:结直肠癌组织中MMP-2蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)。MMP-2 siRNA组MMP-2水平均低于对照组和siRNA control组(P<0.05),细胞存活率低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率均高于对照组和siRNA control组(P<0.05)。Bcl-2、β-catenin、C-myc、cyclin D1水平均低于对照组和siRNA control组(P<0.05),Bax水平均高于对照组和siRNA control组(P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路抑制剂作用后,抑制剂组细胞存活率低于未处理组(P<0.05),细胞凋亡率高于未处理组(P<0.05),Bcl-2、β-catenin、C-myc、cyclin D1水平均明显低于未处理组(P<0.01),Bax水平明显高于未处理组(P<0.01),与转染MMP-2 siRNA的结直肠癌细胞一致。结论:MMP-2在结直肠癌组织中表达上调,抑制MMP-2的结直肠癌细胞增殖受到抑制,凋亡增多,其作用机制与Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词： 小组讨论   Mini-CEX   细胞生物学   优势互补   主观能动性   参与协作  

摘要： 将小组讨论与Mini-CEX教学方法融合运用于细胞生物学课程中,针对医学生缺乏主观能动性、被动填鸭式学习的问题,根据细胞生物学课程的基础性、实践性、实用性等特点,结合先进的教学评估理念进行全面改革。通过学习模式重构、教学投入的重构、教师角色重塑等路径广泛开展参与式教学,激发学生间的协作精神,提高教学效率。改革目的在于结合小组讨论与Mini-CEX评价模式,对教学模式进行全面反馈,通过基础知识、实践操作和沟通交流并重的教学方法,培养医学生的综合能力、团队合作精神以及人际交往能力,实现理论实践的提升,提高细胞生物学的教学质量。