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关键词： 微生物学家   海洋细菌   细胞生物学   浮游菌   耶拿大学   生物信息学分析   实验室   新机制  

摘要： 海洋细菌为开发新抗生素带来希望由德国耶拿大学牵头的国际团队在实验室成功培养了数十种迄今为止被忽视的海洋细菌,初步的生物信息学分析和细胞生物学观察表明,可能产生新的抗生素。相关研究已发表在《自然·微生物学》杂志上。他们研究了分离的浮游菌的细胞生物学,耶拿大学微生物学家克里斯蒂安·乔格勒说:"它们的分裂与所有关键病原菌完全不同。"这项工作还显示了细菌细胞分裂的新机制。

关键词： 视网膜色素上皮   细胞低氧   间充质干细胞   脐带   外泌体  

摘要： 目的探讨人脐带间充质干细胞(HUMSC)外泌体对缺氧条件下人视网膜色素上皮(RPE)细胞的增殖、凋亡及迁移生物学特性的影响。方法实验研究。组织块贴壁培养法原代培养HUMSC,扩增传代至第4代,流式细胞仪鉴定其细胞表面标志物;收集培养第4代HUMSC无血清培养基,分离提取外泌体,在电镜下观察其超微结构并用免疫印迹法鉴定其CD63、CD9蛋白表达;体外培养RPE细胞用噻唑蓝(MTT)法检测缺氧0、1、2、3、4、5 d的细胞增殖情况;用细胞划痕实验检测缺氧0、24、48、72 h的细胞迁移情况,并结合细胞凋亡实验确定缺氧时间。处于生长旺盛期的RPE细胞分为5个组,分别为对照组、缺氧组及不同剂量外泌体预处理组(100、200、300μg/ml),培育48 h后采用MTT法观察各组细胞的增殖能力,Annexin V/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术观察细胞凋亡,细胞划痕实验中观察各组细胞的迁移功能。结果流式细胞仪检测第4代HUMSC的表面标志CD105、CD73、CD90呈强阳性表达,体外诱导成脂和成骨细胞,提示分离培养的HUMSC具有MSC特异性表型。分离的外泌体经扫描电镜观察可见大小不一的球状膜性结构,且免疫印迹法结果提示CD63、CD9呈阳性表达。体外培养RPE在缺氧0、1、2、3、4、5 d用MTT法检测细胞增殖结果:与对照组比较,吸光度(A)值差异均有统计学意义,前2 d随缺氧时间延长,RPE细胞的增殖能力逐渐增强(A值为1.862±0.135和2.278±0.244);3 d后RPE细胞的增殖能力逐渐减弱(A值为1.419±0.124和1.599±0.156)。细胞划痕实验结果:随着缺氧时间的延长,RPE细胞迁移距离逐渐增加,至72 h全部长满且无缝隙。RPE细胞凋亡实验检测结果:缺氧前2 d,随缺氧时间延长细胞凋亡数量有差别[3.628%±1.348%、20.123%±1.183%],3 d时细胞凋亡数量较多(42.290%±3.217%),与2 d比较差异有统计学意义。缺氧48 h后MTT法检测细胞增殖结果:与对照组(1.870±0.499)比较,缺氧组(2.616±0.307)细胞增殖数显著增加(t=-3.116,P<0.05);与缺氧组比较,外泌体预处理组细胞增殖数减少(2.041±0.115、1.931±0.205、1.929±0.025)(t=-4.290,-4.547,-5.286;P<0.01),外泌体各剂量组之间差异无统计学意义(F=1.181,P>0.05)。采用Annexin V/PI双染流式细胞仪观察细胞凋亡结果:与对照组(1.180%±0.689%)比较,缺氧组细胞凋亡数(19.273%±1.194%)显著增加(t=-32.141,P<0.01);与缺氧组比较,外泌体预处理组的细胞凋亡数显著减少(12.318%±1.087%、11.878%±1.348%、11.090%±1.716%;t=-10.547,-10.057,-9.589;P<0.01),外泌体各剂量组之间差异无统计学意义(F=1.173,P>0.05)。细胞划痕实验结果:与对照组比较,缺氧组细胞迁移距离显著增加;与缺氧组比较,外泌体预处理组细胞迁移距离减小(t=11.766,10.770,11.311;P<0.01),外泌体各剂量组之间差异无统计学意义(F=1.179,P>0.05)。结论HUMSC外泌体可有效抑制缺氧状态下人RPE细胞增殖、凋亡及迁移,为寻找缺氧导致RPE相关疾病的研究和治疗提供理论依据。

关键词： 急性T淋巴细胞白血病   完全缓解期   加味青蒿鳖甲汤   树突细胞   生物学效应   CD34+  

摘要： 目的:探讨加味青蒿鳖甲汤对急性T淋巴细胞白血病完全缓解(T-ALL-CR)患者骨髓CD34+细胞源树突细胞(DC)生物学效应的影响。方法:采用血清药理学方法,运用Ficoll密度梯度离心、免疫磁珠阳性选择、细胞培养、流式细胞分析、MTT法检测等技术研究加味青蒿鳖甲汤含药血清对T-ALL-CR患者骨髓CD34+细胞源DC生物学效应的影响。结果:复方中药干预诱导的CD34+细胞能形成典型的DC形态,并高表达CD1a、CD80、CD83、CD86、HLA-DR;诱导的DC激活T细胞对CEM细胞具有良好的杀伤作用。结论:加味青蒿鳖甲汤能促进T-ALL-CR患者CD34+细胞源DC的成熟,并发挥良好的生物学效应。

关键词： 乳腺癌   miR-152-3p   PIK3CA   丝裂原活化蛋白激酶信号通路   细胞增殖  

摘要： 目的探讨miR-152-3p靶向PIK3CA基因对乳腺癌细胞生物学特性的调控及机制。方法选取2016年1月至2017年7月宣城市中心医院保存的乳腺癌组织和相应的正常乳腺组织(距肿瘤边缘>5 cm)标本各50例,培养乳腺癌MCF-7细胞和正常乳腺上皮细胞MCF-10A,采用反转录定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测乳腺癌组织、正常乳腺组织、MCF-7细胞及MCF-10A细胞中miR-152-3p及PIK3CA mRNA表达。培养MCF-7细胞,待细胞融合度达30%~50%时将细胞分为空白组、阴性对照组、miR-152-3p mimic组、miR-152-3p inhibitor组、si-PIK3CA组和miR-152-3p inhibitor+si-PIK3CA组,空白组细胞不转染任何序列,阴性对照组细胞转染miR-152-3p阴性对照质粒,miR-152-3p mimic组细胞转染miR-152-3p mimic质粒,miR-152-3p inhibitor组细胞转染miR-152-3p inhibitor质粒,si-PIK3CA组细胞转染si-PIK3CA质粒,miR-152-3p inhibitor+si-PIK3CA组细胞共转染miR-152-3p inhibitor质粒和si-PIK3CA,转然后继续培养24~48 h;采用Western blot法检测各组MCF-7细胞中PIK3CA、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38和E-cadherin蛋白表达,四甲基偶氮唑盐法检测各组MCF-7细胞增殖活性,划痕实验检测各组MCF-7细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测各组MCF-7细胞侵袭能力。结果乳腺癌组织中miR-152-3p相对表达量显著低于正常乳腺组织,PIK3CA mRNA相对表达量显著高于正常乳腺组织(P<0.05)。MCF-7细胞中miR-152-3p相对表达量显著低于MCF-10A细胞,PIK3CA mRNA相对表达量显著高于MCF-10A细胞(P<0.05)。与空白组和阴性对照组比较,miR-152-3p mimic组和si-PIK3CA组MCF-7细胞中PIK3CA、p38、ERK、JNK和E-cadherin蛋白相对表达量显著降低,miR-152-3p inhibitor组MCF-7细胞中PIK3CA、p38、ERK、JNK和E-cadherin蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。miR-152-3p inhibitor+si-PIK3CA组与空白组和阴性对照组MCF-7细胞中PIK3CA、p38、ERK、JNK和E-cadherin蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞增殖能力实验结果显示,48、72、96 h时,miR-152-3p mimic组和si-PIK3CA组MCF-7细胞增殖能力显著低于空白组和阴性对照组,miR-152-3p inhibitor组MCF-7细胞增殖能力显著高于空白组和阴性对照组(P<0.05);48、72、96 h时,miR-152-3p inhibitor+si-PIK3CA组与空白组和阴性对照组MCF-7细胞增殖能力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,空白组与阴性对照组MCF-7细胞迁移和侵袭能力比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白组和阴性对照组比较,miR-152-3p mimic组和si-PIK3CA组MCF-7细胞迁移和侵袭能力显著降低,miR-152-3p inhibitor组MCF-7细胞迁移和侵袭能力显著增强(P<0.05);miR-152-3p inhibitor+si-PIK3CA组与空白组和阴性对照组MCF-7细胞迁移和侵袭能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-152-3p在乳腺癌组织中低表达,miR-152-3p可能参与了乳腺癌的发生与发展,miR-152-3p可能通过抑制PIK3CA表达而抑制MAPK信号通路的激活,进而抑制乳腺癌细胞的生长、增殖及侵袭转移。

关键词： 医学细胞生物学   网络教学资源   移动手机平台  

摘要： 医学细胞生物学是医学生的必修课,其既是生命医学课程的基础理论学科,又是一门较为综合性的前沿学科。由于医学细胞生物学课程内容多、课堂教学学时数相对较少、前沿进展迅速、教师课堂授课信息量大,学生单靠课堂时间不能很好地把握重难点,而刚入学的新生面临适应大学新环境等多种原因导致学生课后不能及时对所学知识进行归纳总结等,种种原因使医学细胞生物学课程的教学效果有待提高。依据手机用户的普及性、手机微信的经济性和手机学习的便捷和及时特点,教师可利用手机微信和网页浏览器互动平台将本教研室开发的医学细胞生物学网络教学共享资源库通过微信以手机报等形式发送给学生,让学生随时随地利用手机终端获得集文字、图形、图片和声音于一体的学习资料,提高网络教学资源利用率及教学效果。

关键词： 大黄素   慢性牙周炎   细胞活性   过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)   炎症因子  

摘要： 目的:观察大黄素对慢性牙周炎模型大鼠牙周膜细胞生物学特性的影响。方法:SD大鼠30只,其中20只构建大鼠慢性牙周炎模型并随机均分为模型组和大黄素组(n=10),10只大鼠设为对照组。大黄素组按2 ml/kg剂量灌胃给予大黄素,模型组和对照组正常饲养对照。于治疗2周后取牙周组织,FCM检测牙周膜细胞增殖周期和细胞活性,Western blotting法检测牙周膜组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和牙龈组织核因子κB的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测牙周膜组织中IL-6、IL-8和IL-1β的浓度。结果:模型组细胞增殖能力和细胞活性均降低,模型组G1/G0和G2/M较对照组明显升高,而S和G2+S明显降低(P<0.05);且模型组PPAR-γ表达降低、而NF-κB、IL-6、IL-8和IL-1β表达均增强(P<0.05)。与模型组比较,大黄素组牙周膜细胞G1/G0和G2/M较模型组明显降低,而S和G2+S明显升高(P<0.05), PPAR-γ高表达、而NF-κB低表达,IL-6、IL-8和IL-1β浓度降低(P<0.05)。结论:大黄素可促进大鼠牙周膜细胞增殖,增加细胞活性,并显著抑制牙周膜细胞炎症因子IL-6、IL-8和IL-1β的表达。

关键词： 天冬氨酸   药物载体   基因治疗   纳米粒子   肿瘤  

摘要： 目的:以聚天冬氨酸作为主链,接枝胺基侧链和烷基侧链制备药物/基因共运输载体,考察不同侧链接枝率形成的纳米粒载体的载药及载基因性能,并筛选出性能较优的载体。方法:以D,L-天冬氨酸为单体,通过聚合反应合成聚天冬氨酸,然后以不同比例的N,N-二甲基亚二丙基三胺、3,3′-二氨基二丙胺和十二胺/十六胺/十八胺进行开环接枝,得到两亲性聚天冬氨酸-3,3′-二氨基二丙胺-N,N-二甲基亚二丙基三胺-烷基胺(PEEC)材料。采用氢核磁共振确认PEEC结构,用动态光散射法测定纳米粒胶束的粒径和表面电位,用芘荧光探针法测定临界胶束浓度,用琼脂糖凝胶电泳表征RNA阻滞能力,考查载药胶束的释放行为并且在细胞层面上研究材料的细胞毒性、细胞摄取和基因沉默效率。结果:成功合成了不同接枝率的PEEC材料,纳米粒胶束的粒径为250~350 nm,表面电位为27~45 mV,拥有较小的临界胶束浓度值,RNA阻滞的质量比约为0.8∶1;PEEC胶束有一定的细胞毒性,其载药能力和基因绑定能力良好,其中PEEC16-2在细胞水平上表现出较高的基因沉默效率。结论:PEEC具有共载药物/基因的能力,其中PEEC16-2胶束具有良好的药物包载和基因运输能力。

关键词： 细胞生物学   教学改革   人文教育  

摘要： 为落实立德树人的根本任务,实现全员、全程、全方位"三全育人"的要求,着力提升农林高校生命科学领域学生的专业背景及人文素养,文章根据《细胞生物学》课程当前的教学特点、存在问题与发展的前沿性,在《细胞生物学》课程教学上增加预习导读讲义与小组式反馈、在讲解过程中融入人文思想教育与创新思维,同时配备实验配套指导,取得了较好的教学效果。本文总结了在教学中的改革探索经验,以期为生命科学领域学科的教学发展提供借鉴。

关键词： 脂多糖类   脐带   间充质基质细胞   细胞增殖   体外研究  

摘要： 目的探讨炎症刺激对人脐带间充质干细胞生物学功能的影响及作用机制。方法无菌条件下取正常足月剖腹产脐带血40~60 ml,以Ficoll-Hypaque液梯度离心分离细胞,常规培养24 h后分为C组、LPSL组、LPSM组、LPSH组,C组加入完全培养液,LPSL组、LPSM组、LPSH组分别加入含有12.5、25、50μg/ml脂多糖(LPS)的等量培养液,观察不同浓度LPS孵育对脐带间充质干细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。结果孵育24 h和48 h,LPSL、LPSM、LPSH组间充质干细胞增殖活性均高于C组(P<0.05),且低剂量LPS诱导间充质干细胞的增殖能力最强(P<0.05),48 h增殖活性高于24 h(P<0.05)。随着培养时间增加,四组NF-κB、TLR4蛋白表达逐渐增加,LPSL、LPSM、LPSH组均高于C组(P<0.05),且随着LPS浓度升高,NF-κB、TLR4蛋白表达逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPSL、LPSM、LPSH组碱性磷酸酶(ALP)活力和钙结节数量均高于C组,LPSM组ALP活力和钙结节数量高于LPSH组,LPSL组ALP活力和钙结节数量高于LPSM组和LPSH组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论炎性反应可刺激人脐带间质干细胞增殖和成骨分化,低浓度的LPS可能是脐带间充质干细胞成骨分化的理想因子,在实际的临床疾病治疗中具有一定的意义和应用前景。

关键词： 细胞生物学   课堂教学模式   改革  

摘要： 细胞生物学是研究细胞的形态结构及生命活动规律的科学,是生命科学的重要分支,也是生物科学类专业的主干课。素质教育赋予学习的含义从课堂简单的吸收知识、很少加工,逐渐向学生在课堂选择性吸收知识,整合重构学科知识架构过渡,因此课堂教学模式也发生相应的转变:从“教师为主”转变为“以学生为主”。主要通过3方面进行改革与实践:1、以教为主向以学为主转变;2、以课堂为主向课内外结合转变;3、以结果评价为主向结果+过程综合评价为主转变。