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关键词： 细胞生物学   教学模式   课堂互动   主动实验   学生诉求   教学效率  

摘要： 细胞生物学教学工作涉及学生对基础知识的吸收,也影响其学习思维和素养培育,需要针对当前工作的不足进行改进,推动改革实践。该文以细胞生物学教学模式的不足为切入点,在此基础上分析细胞生物学教学模式改革的实践思路、价值,最后探讨细胞生物学教学模式改革的实践方法,从引入主动实验、加强信息化技术运用、组织综合考评、优化课堂互动4个方面具体分析,应对当前细胞生物学教学模式的不足,推动教学模式改革实践走向深入。

关键词： 科学技术协会   组织胚胎学   人体解剖学   研究论著   个案报告   神经生物学   医学影像   细胞生物学  

摘要： 《四川解剖学杂志》(双月刊)创刊于1980年,由四川省科学技术协会主管,四川省解剖学会主办,全国公开发行.本刊登载人体解剖学、组织胚胎学、人类学、神经生物学、细胞生物学、分子生物学、医学影像以及与基础医学相关的临床医学各学科的研究论著,并辟有"教学研究""技术与方法""综述""解剖变异""个案报告"等栏目.欢迎全国各地基础医学和临床医学工作者踊跃投稿.

关键词： 自噬   自噬流   细胞生物学   综合实验  

摘要： 将国际前沿理论和技术拆解和提炼及时补充到实验教学中,是提高实验教学水平和人才培养质量的重要途径之一。该研究以科研成果为基础设计了“自噬流的诱导和检测”综合性实验,包含细胞传代培养、细胞转染、自噬诱导与观察3个部分,形成系统性、综合性和探究性的模块化实验教学内容,通过细胞培养、转染技术在细胞中表达双荧光标记自噬体标志蛋白,经饥饿诱导细胞,在荧光显微镜下观察自噬体和自噬流变化。在本科生实验教学中的实践结果表明,该实验有助于培养学生科研思维和创新意识、提升学生分析问题和解决问题的能力。

关键词： Wnt/β-catenin信号通路   β-catenin   胰腺癌原代细胞   胰腺癌干细胞  

摘要： 目的分析β-catenin蛋白在胰腺癌干细胞恶性生物学特性维持过程中的作用及其机制。方法分离培养原代胰腺癌细胞,将胰腺癌细胞分为NC组和ADβ-catenin组,NC组细胞转染阴性空载病毒,ADβ-catenin组细胞转染β-catenin过表达慢病毒载体。采用流式细胞仪分析细胞株肿瘤干细胞表面标志物CD24、CD44及ESA的表达情况;分选出CD24^(+)CD44^(+)ESA^(+)细胞并扩大培养,通过检测分选出细胞的成球能力、克隆形成能力、增殖能力、侵袭迁移能力、细胞周期及凋亡情况;分析β-catenin过表达对胰腺癌干细胞生物学特性的影响。结果ADβ-catenin组细胞中β-catenin mRNA和蛋白的相对表达量显著高于NC组(P=0.016,P=0.015)。流式细胞仪分析结果显示,ADβ-catenin组细胞中CD24^(+)及CD24^(+)CD44^(+)ESA^(+)的细胞率显著高于NC组(P<0.05)。与NC组比较,ADβ-catenin组胰腺癌干细胞克隆形成能力、成球能力、侵袭与迁移细胞数均显著增加(P<0.05)。ADβ-catenin组细胞在24 h、48 h及72 h的光密度(OD)值均显著高于NC组(P<0.05)。与NC组相比,ADβ-catenin组G_(0)/G_(1)期细胞比例显著减少(P<0.05),S期细胞比例增高(P<0.05)。ADβ-catenin组的细胞凋亡率显著低于NC组(P<0.05)。结论β-catenin通过提高胰腺癌原代细胞中CD24^(+)CD44^(+)ESA^(+)的细胞率,促进胰腺癌干细胞成球能力,增强细胞增殖、侵袭与迁移能力,抑制细胞的凋亡,从而维持胰腺癌干细胞的恶性生物学特性。

关键词： CCT2   卵巢癌   EMT   治疗靶点  

摘要： 目的:探究CCT2在卵巢癌中的表达及对卵巢癌细胞生物学功能的影响。方法:通过TCGA和GTEx数据库分析在卵巢癌组织及正常卵巢组织样本中CCT2的表达差异;通过ICGC数据库分析并评价CCT2表达水平与患者预后的关系。免疫组化实验验证CCT2在卵巢癌组织及癌旁正常组织的表达差异。使用Western Blot实验对比正常卵巢细胞和卵巢癌细胞系CCT2表达水平。通过转染siRNA和质粒的方式构建CCT2沉默和CCT2过表达模型,并使用qPCR和Western Blot验证。利用CCK8及平板克隆方法检测CCT2对卵巢癌细胞增殖能力的影响,同时应用Western Blot验证细胞增殖相关蛋白(Ki67、PCNA)以及EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vitmentin)表达水平。使用Transwell法明确CCT2对卵巢癌细胞转移和侵袭能力的影响。并进一步通过裸鼠体内成瘤实验观察CCT2对肿瘤生长的影响。结果:CCT2在卵巢癌组织中高表达且与患者预后负相关。沉默CCT2可显著抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,反之亦然。体内成瘤实验结果证实CCT2沉默可有效减慢肿瘤生长速度。结论:CCT2在卵巢癌组织中高表达,可作为患者预后不良的分子标志物,可通过促进细胞增殖转移促进卵巢癌的进展。

关键词： 依托咪酯   结直肠癌   LncRNA FEZF1-AS1   miR-363-3p   凋亡  

摘要： 目的探讨不同浓度依托咪酯对结直肠癌细胞生物学功能的影响,并分析其潜在机制。方法使用0、4、16、64μmol/L依托咪酯分别处理结直肠癌细胞(LS513细胞)48 h,测定细胞存活率、凋亡率、迁移侵袭能力,并检测Bcl-2、BAX、Cleaved caspase-3及LncRNA FEZF1-AS1和miR-363-3p的表达水平。培养LS513细胞,分为三组:空白组、依托咪酯64μmol/L组、pcDNA-FEZF1-AS1组。比较三组细胞生物学功能。结果4、16、64μmol/L依托咪酯处理LS513细胞后,细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数均降低,凋亡率增加,且凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3、Bax表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.05);过表达LncRNA FEZF1-AS1后,LS513细胞LncRNA FEZF1-AS1表达升高,miR-363-3p表达降低,且过表达LncRNA FEZF1-AS1后LS513细胞存活率、迁移细胞数及侵袭细胞数升高,凋亡率降低(P<0.05)。结论依托咪酯可抑制结直肠癌细胞迁移、侵袭,并促进其凋亡,且可能通过调控LncRNA FEZF1-AS1/miR-363-3p信号轴发挥作用。

关键词： 细胞生物学   荧光蛋白   超分辨成像   成像技术   光化学特性   结构细节   光转换   染料分子  

摘要： 通过在时间或空间上精确控制荧光蛋白(FP)或染料分子的激活和失活,人们发展了一系列的超分辨率(SR)成像技术,并在细胞生物学领域取得了突破性的发现。此外,对于不同SR成像技术而言,FP的某种或者某些光化学特性对于其成像的时间和空间分辨率至关重要。早期我们的研究重点是通过改进光转换荧光蛋白(FP)的亮度、融合特性和光转换效率来提高单分子定位超分辨PALM成像的时空分辨率。还通过发展可抵抗锇酸固定和Epon包埋的光转换FP(包括mEosEM和mEosEM-E),我们发明了称为PALM-CLEM的创新光电关联(CLEM)技术,并实现了同层透射电镜切片SR CLEM成像。我们还发展了具有卓越开关对比度和亮度性质的光开关荧光蛋白,提高了SOFI、NL-SIM和RESOLFT成像技术的时空分辨率。此外,我们还致力于通过利用光调制FP的光闪烁和光转换来提高宽视场SR成像的时间分辨率。通过SIMBA、quick SIMBA、SOGO-SOFI等技术的发展,我们成功实现了仅用20帧原始宽场图片重建一张具有完整结构细节的SR图像。最近,我们实现了活细胞中单帧宽场超分辨成像,空间分辨率可达到65 nm。

关键词： 流式细胞仪   大型仪器设备   细胞生物学   本科实验教学  

摘要： 在流式细胞术检测细胞凋亡实验中,借助流式细胞仪平台,从教学模式、实验内容、仪器准备、教学素材等方面对细胞生物学实验课进行改革,取得了较好的教学效果。这种仪器平台与教学团队共同探索教学改革的模式,充分发挥大型仪器设备在人才培养方面的潜能,可为其他高校仪器平台建设提供参考。

关键词： 西北农林科技大学   临床兽医学   动物医学院   中共党员   细胞生物学   本科生课程   宁夏青铜峡   冷凉  

摘要： 王燕琴(1980),女,副教授,博士,中共党员,宁夏青铜峡人。2016年6月博士毕业于西北农林科技大学动物医学院,临床兽医学专业:2017年8月至今,就职于集宁师范学院生命科学与技术学院,主讲本科生课程有:细胞生物学、细胞生物学实验、专业英语等课程。王燕琴博士一直从事“高原冷凉环境对动物机体的影响”“冷凉环境对动物肠道微生物的影响”等领域的相关研究。

关键词： 细胞生物学实验   教学改革   小鼠腹腔巨噬细胞   NF-κB信号通路   细胞生物学实验教学  

摘要： 细胞生物学实验是细胞生物学课程教学的重要组成部分,对于帮助学生更好掌握相关理论知识,培养学生的实验操作能力、科研思维能力均具有重要作用。细胞信号转导是细胞生物学理论课内容的重要章节,目前在高校本科生细胞生物学实验教学中,鲜有关于细胞内信号通路转导检测和观察的实验。该团队根据自身的科研活动和教学经验累积设计了一个独立完整的综合性实验,包含4个相互联系的实验,意在探究小鼠腹腔巨噬细胞中NF-κB信号通路的活化情况,实验分别为:(1)小鼠腹腔巨噬细胞的提取及纯化;(2)炎性因子刺激下,RelA/p65在细胞内定位的观察;(3)小鼠腹腔巨噬细胞中炎症因子mRNA表达变化的检测;(4)小鼠腹腔巨噬细胞中炎症因子蛋白表达变化的检测。该综合性实验容易获得较纯的原代小鼠腹腔巨噬细胞,并且在提取的细胞中能够明显检测到细胞内信号通路的转导情况,实验结果易于观察。这样一个独立完整的综合性实验,不仅能够丰富和优化本科生细胞生物学实验教学的内容和模式,并且能够使学生从实验中真正深入地了解机体内炎症反应过程中信号通路的转导等相关知识,加深学生对于理论课程的理解。