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关键词： 再生医学   医学细胞生物学   深圳大学   人类的命运   阅历丰富   医学院   学识渊博   干细胞研究  

摘要： 他开拓进取,敢为人先,在自己所在的研究领域里脚踏实地,以更高、更好的标准要求自我;他习惯于忙碌的工作状态,但在研究工作中却得心应手、游刃有余,所以他的维度不断扩大;他亲身经历了21世纪再生医学的重要发展时期,做出过许多创造性业绩;他阅历丰富,学识渊博,思想深邃,和许多优秀的科学家一样,关心社会与人类的命运,他就是干细胞研究领域的权威专家周光前。

关键词： 电离辐射   Krüppel样因子5   放射性肠损伤   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨沉默Krüppel样因子5(KLF5)对电离辐射后体外培养的大鼠小肠上皮IEC-6细胞生物学功能的影响。方法给予大鼠小肠上皮IEC-6细胞12 Gy照射,分别在照后0、0.5、1、2、3、5、7、24 h,检测KLF5的表达。给予IEC-6细胞0、2、4、8、12和16 Gy X射线照射,照后3 h收集细胞蛋白,采用Western blot法检测IEC-6细胞中KLF5的表达。设计并合成特异性针对大鼠KLF5基因的shRNA靶序列,构建到慢病毒载体中,通过感染人胚肾293T细胞,对慢病毒进行包装和滴度测定。使用包装好的慢病毒感染IEC-6细胞,荧光显微镜下观察转染效率,转染72 h后分别采用实时-PCR和Western blot方法检测感染后细胞中KLF5 mRNA及蛋白的表达。后续实验分为阴性对照组、shKLF5组、单纯照射组、照射+shKLF5组4组。采用CCK-8法观察8 Gy照射后KLF5沉默细胞的增殖活性,流式细胞术检测8 Gy照射后KLF5沉默细胞的周期分布和凋亡,免疫荧光染色观察2 Gy照射后KLF5沉默细胞中γ-H2AX焦点数量。结果不同剂量射线照射后KLF5表达逐渐增加,呈现明显的剂量效应关系。12 Gy照射后KLF5表达呈现先升高后降低的趋势,照后5 h表达量最高。KLF5 shRNA慢病毒载体构建成功,感染的IEC-6细胞中KLF5 mRNA及蛋白水平均在转染72 h明显降低。照射+shKLF5组细胞在照射后24 h阻滞在G2/M期现象显著(t=11.56,P<0.05),细胞增殖明显受到抑制,其细胞凋亡率(12.49±0.63)%,明显高于单纯照射组(7.42±0.49)%,两组比较差异有统计学意义(t=10.98,P<0.05),照射+shkLF5组细胞核中各时间点的γ-H2AX焦点数量明显多于同一时间点阴性对照组(t=22.07、23.89、11.24、59.97、20.85,P<0.05)。结论成功构建KLF5 shRNA慢病毒载体,并建立KLF5敲低小肠上皮细胞株。下调细胞内KLF5表达,能够使细胞周期阻滞在G2/M期,抑制照射后细胞的增殖,促进细胞的凋亡,DNA双链断裂水平增加,修复延迟。

关键词： 高等细胞生物学   教学改革   教学方法  

摘要： 高等细胞生物学是生物科学专业研究生的必修课程之一,是学生进入科研阶段的重要的基础学科,改善教学方法,提高教学质量,增加学生的学习兴趣,是本次教学改革的重点。本次教学改革的目的是通过设置创新性科学问题,激发学生的"头脑风暴",在鼓励学生发挥想象力的同时培养学生创新性思维的能力。

关键词： 中国科学院   期刊影响因子   细胞生物学   自主创办   期刊引证报告   分子细胞   《细胞研究》   学术  

摘要： 6月29日最新发布的《期刊引证报告》显示,由中国科学院主管,中国科学院分子细胞科学卓越创新中心和中国细胞生物学学会共同主办的《细胞研究》影响因子为20.507,这是我国自主创办的学术期刊影响因子首次超过20。

关键词： 细胞凋亡   翻转课堂   实验教学   细胞生物学  

摘要： 细胞凋亡是生物界广泛存在的一种基本生命现象,是《细胞生物学实验》的重要教学内容。该文运用翻转课堂模式从课前知识准备–课堂活动设计–课后反馈三个环节在细胞凋亡实验课中的应用进行了探索研究。经过两年的教学实践,取得了良好的教学效果,为细胞生物学和其它实验课程的教学改革和实践提供了参考。

关键词： 巨噬细胞   原代培养   增殖   吞噬功能   极化  

摘要： 本研究旨在对比分析小鼠骨髓源巨噬细胞(BMDM)和腹腔巨噬细胞(PM)原代培养及巨噬细胞生物学特性差异,为合理选择原代巨噬细胞培养方法提供参考依据。原代培养小鼠BMDM和PM,细胞计数仪测定细胞数量,倒置显微镜观察形态学变化,流式细胞仪检测细胞纯度,CCK-8法测定细胞增殖,中性红吞噬实验测定细胞吞噬功能,实时荧光定量PCR分析巨噬细胞表型变化。结果显示,BMDM原代培养获取的细胞数量显著高于PM(P<0.01),PM贴壁及伸展时间早于BMDM。BMDM中F4/80+CD11b+百分比(98.30%±0.53%)高于PM(94.83%±1.42%),但无统计学差异(P>0.05)。在L929细胞条件培养基培养体系中,BMDM增殖能力显著高于PM(P<0.001)。吞噬实验发现,基础状态下BMDM吞噬能力显著高于PM(P<0.01),经LPS刺激24h后,除低剂量LPS(0.1μg/mL)外,BMDM吞噬能力均显著高于PM(P<0.01或P<0.001),提示BMDM吞噬能力在基础和激活状态下均强于PM。巨噬细胞极化实验发现,基础状态下Tnfα在BMDM中表达显著高于PM(P<0.001),Arg1和Ym1在BMDM中表达显著低于PM(P<0.001),这一差异在极化诱导剂(LPS+IFN-γ或IL-4)处理后依然存在。上述结果表明,原代培养BMDM较PM可获取更多细胞,且两种细胞在吞噬功能和极化状态上存在一定生物学差异,应谨慎合理选择巨噬细胞原代培养方法。

关键词： 生物物理学   学术期刊   系统生物学   神经科学   栏目设置   细胞生物学   学科范围   基因组学  

摘要： (2019年12月修订)1征稿范围与栏目设置1.1征稿范围本刊为国内外公开发行的全国性学术期刊,月刊,每月20日发行.征稿的学科范围是生物化学、分子生物学、生物物理学、细胞生物学、神经科学、免疫学,以及基因组学、蛋白质组学、系统生物学等相关学科领域.1.2栏目设置本刊设有综述与专论、研究快报、研究报告。

关键词： 宫颈癌   长链非编码RNA   母系表达基因3   临床病理特征   预后   细胞增殖   细胞侵袭   细胞迁移  

摘要： 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)在宫颈癌组织中的表达情况及其临床意义,并分析MEG3的表达情况对宫颈癌细胞生物学功能的影响。方法(1)收集68例宫颈癌组织及30例正常宫颈组织,应用实时荧光定量PCR检测组织中MEG3 mRNA表达情况;分析宫颈癌患者MEG3 mRNA表达情况与临床病理及预后的关系。(2)将宫颈癌HeLa细胞及SiHa细胞分别分为OE-MEG3组(转染MEG3过表达质粒)、NC组(转染空载质粒)和空白对照组(MOCK组),以及si-MEG3组(转染MEG3-小干扰RNA)、NC组(转染阴性对照小干扰RNA)、MOCK组。转染后检测各组的细胞增殖率、迁移及侵袭能力。结果(1)宫颈癌组织中MEG3 mRNA相对表达水平低于正常宫颈组织(P<0.05)。MEG3 mRNA低表达的患者肿瘤分化程度更低,国际妇产科联盟分期更高,浸润深度>50%及淋巴结转移发生率更高,中位生存时间及无瘤生存时间更短(均P<0.05)。(2)在HeLa细胞和SiHa细胞中,OE-MEG3组的细胞增殖能力、细胞侵袭数目、迁移数目均低于其他两组;而si-MEG3组的细胞增殖能力、细胞侵袭数目、迁移数目均高于其他两组(均P<0.05)。结论lncRNA MEG3在宫颈癌组织中呈低表达,这可能与患者的不良预后有关;lncRNA MEG3能抑制宫颈癌细胞的增殖及侵袭迁移能力,其或可作为抑癌基因参与宫颈癌的发生与发展。

关键词： 非小细胞肺癌   miR-451   HCC827细胞   生物学性质   放疗敏感性  

摘要： 目的探讨miR-451在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者血浆中的表达及其对NSCLC细胞生物学性质及放疗敏感性的影响。方法 NSCLC患者69例为观察组,同期体检健康者53例为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测2组血浆miR-451 mRNA相对表达量。将人NSCLC细胞株HCC827随机分为空白对照组、miR-451组和慢病毒组,空白对照组不作处理,miR-451组和慢病毒组分别转染包含miR-451、无意义核苷酸序列慢病毒;转染24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖;转染72 h,采用Transwell小室试验检测细胞侵袭,采用划痕试验检测细胞迁移距离。再将3组细胞分为0、3、6、9 Gy 4个亚组,分别接受相应剂量的X线照射,采用MTT法检测细胞增殖和细胞存活。结果观察组血浆miR-451相对表达量(1.72±0.39)低于对照组(2.16±0.31)(P<0.05)。miR-451组细胞miR-451相对表达量(4.17±0.82)高于空白对照组(1.32±0.37)和慢病毒组(1.26±0.33)(P<0.05),空白对照组与慢病毒组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染24、48、72 h,miR-451组细胞增殖率均低于空白对照组和慢病毒组(P<0.05);转染72 h,miR-451组侵袭细胞数[(123.7±26.4)个]较空白对照组[(247.6±39.7)个]和慢病毒组[(254.5±38.2)个]少,细胞迁移距离[(45.2±8.8)μm]较空白对照组[(73.2±11.7)μm]和慢病毒组[(68.9±10.4)μm]近(P<0.05),空白对照组与慢病毒组比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-451组细胞在0、3、6、9 Gy剂量X线照射后的细胞增殖率和细胞存活率均低于空白对照组和慢病毒组(P<0.05),空白对照组与慢病毒组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-451在NSCLC患者血浆呈低表达;miR-451可抑制HCC827细胞增殖、侵袭与迁移,上调HCC927细胞对放疗的敏感性。

关键词： 长链非编码RNA-MT1JP   口腔鳞癌细胞   FBXW7   增殖   迁移  

摘要： 目的:探讨长链非编码RNA-MT1JP(long non-coding RNA-MT1JP,LncRNA-MT1JP)通过FBXW7对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学活性的影响。方法:qRT-PCR检测LncRNA-MT1JP在Cal-27、SCC-4、TSCCA口腔鳞癌细胞系和正常口腔上皮细胞系HOK中的表达,将TSCCA细胞系分成LncRNA-MT1JP基因沉默组和对照组,随后采用Lipofectamine TM 2000分别转染LncRNA-MT1JP-shRNA及对照序列LncRNA-MT1JP-NC;MTT法检测两组TSCCA细胞增殖;Transwell小室实验检测两组TSCCA细胞系迁移、侵袭能力;流式细胞仪检测两组TSCCA细胞系凋亡能力;Western blot法检测FBXW7基因蛋白的表达。结果:与正常口腔上皮细胞系HOK比较,LncRNA-MT1JP的相对表达量在口腔鳞癌细胞系Cal-27、SCC-4及TSCCA中显著增高(P<0.01)。TSCCA细胞系在转染24及48 h后,MT1JP基因沉默组与对照组比较OD值无显著的统计学差异(P>0.05);但在72及96 h后OD值显著降低(P<0.05)。与对照组比较,MT1JP基因沉默组TSCCA细胞迁移与侵袭数目显著降低(P<0.01)、凋亡率以及FBXW7基因蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。结论:LncRNA-MT1JP在口腔鳞癌细胞系呈高表达,MT1JP基因沉默有效抑制了TSCCA细胞系的增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡,该作用可能与MT1JP基因沉默后上调抑癌基因FBXW7的表达有关。