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关键词： 文献微阅读   细胞生物学   实践式教学方式  

摘要： 英文文献阅读对提高本科生的课堂教学效果以及培养学生潜在的科学研究能力具有重要意义,但相关训练通常只面向研究生而非本科生。这一现象主要与本科生专业素养以及课堂教学学时等限制因素有关。通过对本科细胞生物学课堂开展文献微阅读,探讨将文献阅读的训练提前到本科生阶段的必要性和可行性。文献微阅读教学方式具有时间短、教师引导以及理论与实际科研相结合的特点。用实例阐述了文献微阅读的课堂解读方法,以及学生通过英文文献微阅读所能获得的帮助。文献微阅读对其他生物学课堂教学具有推广意义。

关键词： 微RNAs   胃肿瘤   细胞增殖   细胞凋亡   miRNA-372-3p  

摘要： 目的探讨miRNA-372-3p(miR-372-3p)在胃癌组织及细胞中的表达及其对RAB22A表达的调控,并探讨其对胃癌细胞生物学功能的影响。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测山西省肿瘤医院2018年12月至2019年12月70例胃癌确诊患者癌组织和癌旁组织中miR-372-3p的表达水平。在胃癌MGC-803和SGC-7901细胞中转染miR-372-3p抑制剂,并以miR-372-3p NC(空载体)作为对照;分别使用克隆形成实验、CCK-8法和流式细胞术检测细胞克隆形成能力、细胞增殖能力和凋亡水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测MGC-803细胞miR-372-3p和RAB22A表达的相关性。以miRNA-21(miR-21)作为阴性对照,采用蛋白质印迹法检测MGC-803、SGC-7901细胞RAB22A蛋白的表达。结果RT-PCR结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-372-3p相对表达量上调,差异具有统计学意义(0.51±0.37比0.77±0.48,t=1.98,P=0.005)。不同肿瘤长径和病理分级的胃癌组织中miR-372-3p表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。体外实验表明,低表达miR-372-3p能抑制MGC-803细胞和SGC-7901细胞克隆的形成[(211±4)个比(410±5)个,t=2.78,P=0.001;(244±8)个比(423±7)个,t=2.76,P=0.001],降低MGC-803和SGC-7901细胞增殖活性(MGC-803细胞48 h吸光度值0.39±0.06比0.57±0.03,t=3.18,P=0.01;MGC-803细胞72 h吸光度值0.50±0.05比0.81±0.06,t=2.78,P<0.01;SGC-7901细胞72 h吸光度值:0.50±0.09比0.79±0.09,t=2.77,P=0.01),提高MGC-803细胞早期凋亡率[(25.19±0.26)%比(20.02±0.04)%,t=4.30,P<0.05]。双荧光素酶报告基因实验发现,同miR-372-3p NC与RAB22A野生型基因共转染相比,miR-372-3p抑制剂与RAB22A野生型基因共转染后,MGC-803细胞荧光素酶活性下降,差异有统计学意义(1.00±0.04比0.53±0.06,t=3.18,P=0.01);蛋白质印迹法结果显示,敲低miR-372-3p能抑制MGC-803、SGC-7901细胞RAB22A蛋白表达。结论胃癌组织miR-372-3p表达上调,miR-372-3p可能促进RAB22A的表达并调控胃癌的发生发展,可作为潜在的治疗靶标。

关键词： Y1细胞   肾上腺皮质   类固醇激素   补肾   综述  

摘要： 肾上腺皮质功能减退、肾上腺糖皮质激素分泌减少是肾虚证发生的主要物质基础,因此肾上腺皮质细胞在探索肾虚及补肾机制研究方面具有重要价值。Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞(Y1细胞)已广泛用于肾上腺皮质功能的体外研究。综述Y1细胞的来源、不同细胞系的衍变、类固醇激素的合成途径以及Y1细胞增殖与功能相关的信号通路,以期为肾虚证发病机制、补肾中药的有效成分筛选及作用机制研究提供参考。

关键词： 慢性阻塞性肺疾病   骨髓间充质干细胞   脂肪间充质干细胞   脐带间充质干细胞   临床实验  

摘要： 慢性阻塞性疾病(chronic obstructive pulmo-nary disease,COPD)是普遍存在、可及时预防、及时治疗的呼吸系统慢性疾病,是以小气道结构和(或)肺泡异常引起持续性气流受限并进行性加重为主要特征[1]。现慢性阻塞性肺疾病已逐渐成为了重要的公共卫生安全问题,根据GBD(全球疾病负担)研究,从1990年到2013年,COPD从全球疾病负担的第八位上升到第五位[2],且相关数据统计,仅在2017年,COPD在中国和美国地区造成1135.2万死亡人数,占当年全球COPD死亡总人数的三分之一[3]。COPD的发病率及死亡率因持续暴露于COP D危险因素及全球社会人口结构改变正逐步升高,预计到2020年将上升为全球致死疾病的第三位[4]。

关键词： 非小细胞肺癌   人表皮生长因子受体4   肺癌   恶性肿瘤  

摘要： 目的:探讨人表皮生长因子受体4(HER4)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达意义及其对NSCLC细胞生物学行为的影响。方法:选取2015年1月至2017年1月长治市人民医院呼吸与危重症医学科收治的经手术切除并经病理学证实的84例NSCLC患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,男55例,女29例,年龄(54.58±9.67)岁,年龄范围为33~75岁。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肺癌组织和癌旁正常肺组织中HER4的表达,分析HER4与患者临床病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析HER4与NSCLC预后的关系。HER4-siRNA转染H522细胞系沉默HER4的表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、侵袭小室(Transwell)法,流式细胞术检测细胞增殖、迁移和侵袭及凋亡情况。蛋白免疫印迹(Western blot)检测HER4和间质上皮转化(EMT)相关蛋白的表达。结果:NSCLC组织中HER4 mRNA的表达水平(3.80±0.64)显著高于癌旁正常肺组织(2.07±0.57),NSCLC细胞系H522中HER4 mRNA的表达水平(1.45±0.12)也显著高于人正常肺上皮细胞系BEAS-2B(0.78±0.06),差异有统计学意义(P<0.05)。将NSCLC患者按照HER4表达水平的中位值分为高表达组和低表达组,两组肿瘤淋巴结转移(TNM)分期、淋巴结转移比较,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步采用Kaplan-Maier法分析两组生存函数,结果显示低表达组总体生存期为(40.14±2.58)个月,优于高表达组的(30.45±2.58)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。低表达组5年生存率[38.1%(16/42)]高于高表达组[23.8%(10/42)],差异有统计学意义(P<0.05)。HER4-siRNA及阴性载体转染细胞后,RT-qPCR检测发现,HER4-siRNA组中HER4 mRNA的相对水平(0.52±0.04)低于空白组(1.00±0.01)和阴性组(0.96±0.06),Western blot检测显示,HER4-siRNA组中HER4蛋白表达水平(0.64±0.04)低于空白组(1.16±0.09)和阴性组(1.12±0.08),差异有统计学意义(P<0.05)。MTT试验结果显示,转染后,HER4-siRNA组H522细胞的增殖活性低于阴性组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell法检测结果显示,与空白组和阴性组相比,HER4-siRNA组中迁移和侵袭的细胞数量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,HER4-siRNA组上皮标志蛋白E-cadherin的表达水平显著高于空白组和阴性组,N-cadherin和Vimentin的表达水平则显著低于空白组和阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果显示,HER4-siRNA组中细胞凋亡率为(12.48±1.02)%,高于空白组(2.25±0.28)%和阴性组(2.69±0.35)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HER4可能是潜在的NSCLC预后和治疗的新的靶点。但关于HER4在NSCLC细胞的增殖、转移和凋亡中具体的作用机制,尚有待深入研究。

关键词： 细胞生物学实验   教研融合   抗肿瘤   药效学  

摘要： 将科研内容引入到实验教学过程中,促进科研与教学的有机结合,不仅可以增加学生对科研知识的学习兴趣,同时也有利于理论知识的巩固,对培养学生的创新能力和实践能力意义重大。以"抗肿瘤药物的体外药效学评价"为主题设计细胞生物学实验,以经典的广谱抗肿瘤药物阿霉素作为受试药物,通过MTT法检测阿霉素对5种不同肿瘤细胞的半数致死剂量,并运用流式细胞术检测阿霉素对各种细胞的促凋亡能力,从而研究阿霉素的抗肿瘤效果。实验过程中,学生学习了药物抗肿瘤活性研究的基本方法和原理,掌握了细胞培养的基本实验操作技能,熟悉了相关仪器的使用方法。学生的动手实践能力、分析问题和解决问题的能力、科研创新能力均有了较大提升。

关键词： 国家重点实验室   兰州大学   植物生理学   著名生物学家   细胞生物学   生命科学学院   辛树帜   生物学系  

摘要： 兰州大学生命科学学院具有悠久的发展历史。早在1946年,在著名生物学家、教育学家、校长辛树帜教授和植物学家董爽秋教授的带领下,兰州大学建立了植物学系和动物学系,1951年合并为生物学系。1999年,由原兰州大学生物系、教育部直属兰州大学细胞生物学研究室和植物生理学研究室、干旱农业生态国家重点实验室合并成立了生命科学学院。

关键词： 无血清培养基   人脐带间充质干细胞  

摘要： 目的观察改良型无血清培养基对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)生物学特性的影响。方法采用组织块贴壁法从健康足月胎儿脐带中分离hUC-MSCs,用10%胎牛血清+DMEM/F12培养基(胎牛血清组)、MSCs无血清培养基(无血清1组)、OptiVitro MSC SFM-XF培养基(无血清2组)培养。采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测免疫表型,诱导分化实验检测多向分化潜能,CCK-8法检测细胞增殖情况,免疫学反应检测淋巴细胞亚群。结果胎牛血清组细胞呈梭形,漩涡状生长;无血清1组细胞体积较小,短梭形,呈无规则生长;无血清2组细胞体积较小,短梭形,呈漩涡状生长。三组细胞均表达CD44、CD73、CD90和CD105,不表达CD34、CD19、CD11b、CD45、HLA-DR。三组细胞均具有成脂、成骨、成软骨诱导分化能力,且组间无统计学差异(P>0.05)。三组细胞生长曲线呈"S"形,无血清2组生长较快。三组CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、B细胞、Treg细胞比例和TNF-α水平均无统计学差异(P>0.05)。结论改良型无血清培养基(OptiVitro MSCs SFM-XF培养基)培养的hUC-MSCs符合鉴定标准,且具有较高的增殖能力及细胞活性,可作为临床级hUC-MSCs培养的优选方案。

关键词： 利多卡因   miR-15a-5p   肝癌   肝癌细胞HepG2   凋亡   迁移   侵袭  

摘要： 目的探讨利多卡因对肝癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制。方法使用不同浓度利多卡因作用于肝癌细胞HepG2,正常培养的HepG2细胞为对照组。流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,qPCR检测细胞中miR-15a-5p表达。在细胞中转染miR-15a-5p、anti-miR-15a-5p及各自阴性对照的转染并使用0.1 mmol/L利多卡因处理细胞,观察其对HepG2细胞凋亡、迁移、侵袭的影响。结果与对照组相比,0.01、0.1和1 mmol/L利多卡因增加细胞凋亡率和Bax蛋白表达量(P<0.05),降低Bcl-2蛋白水平(P<0.05)。0.1 mmol/L利多卡因明显降低迁移细胞数、侵袭细胞数和MMP-2蛋白表达量(P<0.05),升高E-cadherin蛋白水平和miR-15a-5p表达量(P<0.05)。过表达miR-15a-5p增加细胞凋亡率、Bax和E-cadherin蛋白表达量(P<0.05),减少迁移细胞数、侵袭细胞数、Bcl-2和MMP-2蛋白表达量(P<0.05)。结论利多卡因通过调控miR-15a-5p表达抑制肝癌细胞迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

关键词： 《生命科学》   中文核心期刊   生物医学工程学   生物化学与分子生物学   生命科学部   细胞生物学   研究简讯   学术动态  

摘要： 中文核心期刊中国科技核心期刊CSCD核心期刊《生命科学》是由国家自然科学基金委员会生命科学部、中国科学院前沿科学与教育局、中国科学院生命科学和医学学部和中国科学院上海生命科学研究院共同主办的综合性学术期刊。本刊宗旨是以评述、综述、研究简讯(动态)等形式报道生命科学研究的发展趋势、学术动态和研究成果,以促进学术交流。欢迎踊跃投稿。1投稿范围细胞生物学与发育生物学、免疫学、遗传学、生物化学与分子生物学、生物医学工程学、药物学与药理学、动物学。