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关键词： 精子相关抗原9   肾癌   迁移   侵袭   血管形成  

摘要： 目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默精子相关抗原9(SPAG9)基因对肾癌细胞生物学功能的影响。方法体外培养人肾癌细胞786-O和OS-RC-2(购自中国科学院上海细胞库);应用siRNA转染下调SPAG9在786-O和OS-RC-2的表达;分组采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)分析转染后SPAG9在786-O和OS-RC-2中mRNA及蛋白的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染24、48、72、96 h后786-O及OS-RC-2的增殖活性;Transwell法检测转染后786-O、OS-RC-2的迁移与侵袭能力;Western blot分析转染后786-O、OS-RC-2中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的蛋白表达量;利用小管形成实验观察SPAG9基因沉默后,786-O血管形成能力的变化。采用t检验。结果(1)RT-PCR及Western蛋白印迹结果提示siRNA能够有效沉默786-O及OS-RC-2中SPAG9 mRNA和蛋白的表达。si-Ctrl组表达量为参照和786-Osi-SPAG9组、OS-RC-2si-SPAG9组mRNA及蛋白的表达量为(0.41±0.02、0.12±0.03,t=14.420,P<0.01)、(0.64±0.02、0.13±0.01,t=36.690,P<0.01);(1.36±0.13、0.83±0.04,t=6.816,P<0.05)、(0.93±0.01、0.63±0.04,t=12.410,P<0.05)。(2)SPAG9基因沉默后对786-O以及OS-RC-2增殖能力无明显影响,差异无统计学意义(t=3.182、6.674,P>0.05)。(3)SPAG9敲低后的786-O以及OS-RC-2迁移、侵袭能力显著降低,si-Ctrl组和786-Osi-SPAG9组、OS-RC-2si-SPAG9组迁移细胞数目为(105.32±10.13)、(53.34±5.17)个(t=9.232,P<0.05)、(132.00±11.23)、(65.45±7.23)个(t=11.161,P<0.05);侵袭细胞数目为(88.33±16.56)、(32.08±6.79)个(t=6.093,P<0.05)、(90.67±13.01)、(28.67±4.02)个(t=5.924,P<0.05)。(4)SPAG9基因沉默后,786-O血管形成能力明显降低。si-Ctrl组、786-Osi-SPAG9组中平均管样结构数为12.56±2.40、3.05±0.86(t=2.254,P<0.05)。(5)Western blot显示转染后的786-O和OS-RC-2细胞中,MMP-2的蛋白表达量显著降低。si-Ctrl组和786-Osi-SPAG9组、OS-RC-2si-SPAG9组中MMP-2的相对表达量为0.37±0.02、0.24±0.01(t=8.712,P<0.001)、0.26±0.01、0.21±0.02(t=4.558,P<0.05);而TIMP-2的表达量显著升高,其相对表达量为0.52±0.03、0.59±0.03(t=2.720,P>0.05)、0.52±0.01、0.54±0.01(t=2.102,P>0.05)。结论SPAG9基因具有促进肾癌细胞迁移、侵袭及血管形成的能力,其机制可能与MMP-2的激活有关。

关键词： 膀胱移行细胞癌   长链非编码RNA-HIT   凋亡   增殖   侵袭  

摘要： 目的观察人膀胱移行细胞癌(BTCC)患者肿瘤组织及膀胱癌细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)HIT的表达,探讨lncRNA-HIT对膀胱癌细胞的生物学影响。方法应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2016年9月至2019年3月华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院54例BTCC患者手术切除的癌组织及其配对毗邻正常黏膜组织中lncRNA-HIT的表达水平;统计分析其表达水平与患者临床病理特征之间的相关性。采用短发卡RNA(shRNA)干扰lncRNA-HIT,观察其对膀胱癌细胞的凋亡、增殖及侵袭等生物学的影响。两组均数间比较用t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析。结果BTCC患者癌组织中lncRNA-HIT的表达量较配对癌旁正常组织上调(t=5.763,P<0.05);lncRNA-HIT在膀胱癌细胞株EJ、UMUC3和T24细胞的表达较正常膀胱细胞系SV-HUC-1细胞明显上调(t=15.030、13.020、14.050,P<0.05)。lncRNA-HIT异常增高与患者肿瘤分级(χ^2=6.862,P<0.01)、分期(χ^2=14.814,P<0.01)、淋巴结转移(χ^2=9.429,P<0.01)、远处转移(χ^2=12.523,P<0.01)等密切相关,但与性别(χ^2=0.441,P>0.05)和年龄(χ^2=0.106,P>0.05)无明显相关,体外靶向干扰实验显示下调lncRNA-HIT可以显著促进膀胱癌细胞的凋亡,抑制膀胱癌细胞增殖和其侵袭能力。结论lncRNA-HIT在BTCC患者肿瘤组织中显著增高。

关键词： 中国科学院   科研队伍   生物物理学   出国深造   贝时璋   细胞生物学   大学生   良师  

摘要： 每个人生命中都有难忘的、温暖的相遇。在我的人生路上,得遇恩师贝时璋先生便是此生幸甚之事。贝先生是我国生物物理学的奠基人,也是我走上科研道路的引路人。我是77级大学生,1983年从医学院毕业后,有幸进入中国科学院生物物理所贝时璋实验室,从事细胞生物学研究。当时,由于"文革"的原因,科研队伍出现严重断层。我第一次见贝先生时,他已经80多岁,大家尊称他为"贝老"。我在贝老身边学习和工作了六年,即使1989年出国深造之后,也与他保持着书信往来。

关键词： 细胞生物学   骨架   形态学   真空度   冷却速率   显微结构  

摘要： 外界的剧烈变化会对细胞内部产生一定的影响,本文通过考马斯亮蓝染色法研究细胞骨架中的微丝在脱水过程中的形态变化。通过图像处理的方法对骨架图像的灰度峰度进行分析处理,发现随着脱水过程的进行,灰度图像出现弥散性下降,骨架形态更为疏松并伴随解聚等一系列形态变化。对图像的特征参数进行定量计算后,结果表明:持续真空环境下骨架的最终相对变化率为32.7%,持续低温环境下的最终相对变化率为59%。对细胞变形度研究结果表明,脱水过程会对细胞骨架产生较为显著的影响。

关键词： 肝癌   连翘苷   环状RNA_0054537   微小RNA-409-3p   磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路  

摘要： 目的探讨连翘苷对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对环状RNA_0054537(circ_0054537)/微小RNA(miRNA,miR)-409-3p的调控作用。方法体外培养肝癌细胞Hep3B,使用不同剂量(5、10、20μmol/L)的连翘苷处理Hep3B细胞;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测circ_0054537、miR-409-3p的表达量;双荧光素酶报告实验检测circ_0054537、miR-409-3p的靶向关系;Hep3B细胞中分别转染si-circ_0054537、pcDNA-circ_0054537,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果连翘苷可明显降低细胞活力[(1.276±0.110)个比(1.031±0.090)、(0.637±0.050)、(0.507±0.040)个,F=244.841,P<0.05],增高凋亡率[(7.34±0.62)%比(12.44±1.03)%、(22.86±2.12)%、(28.16±2.71)%,F=244.841,P<0.05],减少迁移细胞数[(154.15±12.76)个比(124.06±10.04)、(78.05±7.25)、(61.13±5.83)个]及侵袭细胞数[(112.04±10.08)个比(89.43±8.13)、(57.11±5.12)、(43.08±4.05)个,F=186.018、166.514,P<0.05],抑制circ_0054537的表达[(1.00±0.10)比(0.40±0.04),t=16.713,P<0.05],促进miR-409-3p的表达[(1.02±0.11)比(3.42±0.31),t=21.889,P<0.05];转染si-circ_0054537可明显抑制细胞活力[(1.264±0.10)比(0.686±0.06)]、迁移[(151.96±11.17)比(79.03±7.21)]及侵袭能力[(115.28±11.05)比(68.14±6.43),t=14.869、16.457、11.062,P<0.05],增高凋亡率[(7.26±0.71)%比(23.79±2.06)%,t=22.759,P<0.05];双荧光素酶报告实验证实circ_0054537可靶向结合miR-409-3p;转染pcDNA-circ_0054537可明显逆转连翘苷对Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的调控作用。结论连翘苷可通过下调circ_0054537的表达而上调miR-409-3p的表达从而抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及促进细胞凋亡。

关键词： “医学细胞生物学”   教学改革   实践  

摘要： 在国家加强医教协同发展的背景下,笔者对“医学细胞生物学”课程教学进行了系列改革探析。文章从课程改革建设的理念、措施和成效等方面作一论述。

关键词： 教学模式   “医学细胞生物学”   教学效果   体会  

摘要： 文章认为,教师在“医学细胞生物学”教学中采用多种不同教学方式,能够提高学生学习本课程的兴趣,并促使他们主动学习,同时提高了教学效果,是传统教学无法比拟的。

关键词： 留学生   医学细胞生物学   教学研究  

摘要： 来华留学生的高等教育渐渐成为我国高等教育的重要组成部分,医学细胞生物学作为基础医学的代表性学科,其在医学生培养中具有重要地位,但是目前国内关于留学生医学细胞生物学的教材、教学方式和学习评价方式等尚无标准化的模式。该文对作者所在院校近年来留学生医学细胞生物学的教学实践进行分析和总结,以期对于留学生医学细胞生物学的教学以及留学生其他相关课程的学习提供有益的借鉴和参考。

关键词： 细胞生物学   自主学习   思维导图   教学模式  

摘要： 长久以来,《细胞生物学》课程的教学大多沿用传统教学方法,即主要以教师讲、学生听为主,此教学方法强调对知识的传承,但学生的自主学习能力得不到充分发挥。在新形势下,自主学习能力是竞争激烈的现代社会重要的生存能力,对当代大学生来说,自主学习能力的培养比知识的获取更为重要。针对《细胞生物学》现有教学模式的不足,该文以学生自主学习能力培养为着眼点,在教学过程中,采用问题讨论式教学结合思维导图教学的教学模式,改变一考定成绩的考核评价体系,初步探究了旨在培养学生自主学习能力的《细胞生物学》课程教学模式。实施效果表明,该教学模式达到了预期教学目标,有助于培养学生的自主学习能力。

关键词： 细胞生物学   本科教学   学习积极性  

摘要： 细胞生物学是现代生物学的重点学科之一。针对如何在有限的时间内调动学生们的学习“细胞生物学”的学习积极性这一问题,本文总结了教学过程中的几点尝试,包括问题导向教学模式、诺贝尔奖项案例介绍模式、小组授课竞赛的模式、引进视频、动画教学模式、开设第二课堂模式等。