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关键词： 雌激素   乳腺癌   氧化应激   Nrf2   ROS   8-OHdG  

摘要： 目的探讨雌激素通过Nrf2/ROS信号通路对正常乳腺上皮细胞生物学改变的诱导作用。方法选取正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和MCF-12A,实验设立空白组和雌激素组(5 nmol/L)。分别采用MTT法、LDH实验、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、DCFH-DA荧光探针标记法和氧化酶活性测定、划痕实验、平板克隆实验、AnnexinV/PI双染色法检测干预后乳腺细胞的生物学表现;Western blot和PCR检测乳腺细胞中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白及mRNA表达水平。结果雌激素可诱导细胞活力、迁移和克隆能力的增强,同时降低细胞凋亡水平。雌激素可以诱导ROS的积累,抑制细胞中SOD、GPX、CAT和TAC等氧化酶的活性,进而促进细胞中LDH和8-OHdG的水平升高,导致细胞毒性和DNA氧化损伤增加。此外,Western blot和RT-qPCR结果表明,雌激素诱导后可抑制Nrf2、HO-1和NQO1的表达。结论雌激素可以诱导正常乳腺细胞的增殖和降低细胞凋亡,并通过调节Nrf2/ROS信号通路来增加DNA的氧化损伤,进而诱导乳腺细胞的生物学改变。

关键词： 输卵管   骨髓   间充质   干细胞   诱导分化   细胞培养   免疫调节  

摘要： 目的:从生物学特性及免疫调节方面对输卵管间充质干细胞(FTMSCs)与骨髓间充质干细胞(BMMSCs)进行比较研究,为临床选择使用间充质干细胞(MSCs)提供实验依据。方法:体外分离,培养及扩增人FTMSCs和BMMSCs,从细胞形态、倍增时间、细胞表型、诱导分化能力及免疫调节对FTMSCs和BMMSCs进行比较研究。结果:FTMSCs与BMMSCs在细胞形态、倍增时间、细胞表型及细胞分化方面无明显差异。FTMSCs的成骨能力强于BMMSCs,但BMMSCs比FTMSCs有更强的免疫抑制作用。结论:FTMSCs具有一定的免疫抑制功能,尽管弱于BMMSCs,但也是MSCs的主要来源。

关键词： 渗透压   氟化物   成釉细胞   生物学特性  

摘要： 目的观察DMEM培养基加入不同质量浓度氟化钠及渗透压变化对成釉细胞生物学特性的影响。方法将体外培养5 d的成釉细胞,换用含不同质量浓度氟化钠(0、42、84 mg/L)、氯化钠(58.5、117 mg/L)、甘油(0.05、0.09 mg/L)、山梨醇(1、1.5 mg/L)的DMEM培养基中,培养48 h,用MTT比色法检测各组成釉细胞存活及增殖情况,流式细胞仪AV-PI双染检验各组成釉细胞的凋亡率,Real-time PCR检测各组成釉细胞CK14、KLK4的mRNA表达。结果随着渗透压的增加,与对照组相比,MTT结果显示氟化钠组、氯化钠组、甘油组、山梨醇组的成釉细胞增殖活力均降低;流式检测结果显示:各组成釉细胞凋亡率增加;Real-time PCR结果显示:各组细胞CK14和KLK4的mRNA表达均下调;各检测结果中氟化钠组的变化均最为明显。结论成釉细胞生物学特性的改变主要由氟离子的毒性所致,而培养基的渗透压变化对成釉细胞的增殖能力、凋亡率及蛋白表达影响轻微。

关键词： Ce6-PDT   SW480   SW620   外泌体  

摘要： 目的探讨Ce6-PDT对不同转移潜能结肠癌细胞SW480和SW620生物学行为及其外泌体的影响。方法体外培养SW480和SW620,分为对照组(未进行Ce6-PDT处理)、Ce6-PDT组(加入不同浓度Ce6)。光动力处理后,荧光倒置显微镜观察细胞形态;MTT法检测细胞存活情况并计算得到细胞生长抑制率;采用划痕实验检测细胞0、24、48 h迁移状况,分析得到划痕面积数据。用超速梯度离心法分离外泌体,通过透射电子显微镜观察外泌体形态,纳米颗粒示踪分析检测外泌体浓度及粒径。结果Ce6-PDT处理后SW480和SW620细胞形态发生改变,且存在剂量依赖性。随着Ce6浓度的增加,SW480和SW620细胞生长抑制率逐渐增加,与对照组相比,Ce6-PDT组不同浓度Ce6干预的细胞生长抑制率差异均有统计学意义(P<0.01)。Ce6浓度为0.25、0.5、1.0μg/mL时,SW620细胞增殖抑制较SW480细胞更加明显。与对照组相比,SW480和SW620细胞经Ce6-PDT处理后,分泌的外泌体颗粒浓度明显减少。结论Ce6-PDT对迁移潜能强的细胞有更强的效果,并且可明显抑制SW480和SW620细胞外泌体释放量。

关键词： 细胞生物学   实验方法   创面修复   皮肤再生医疗技术   综述  

摘要： 创面修复是一个复杂的、连续的涉及多种特定细胞行为、形态、结构和功能的生物学变化过程,寻求科学合理的实验方法对深入探究创面修复机制具有重要意义。细胞生物学作为生命科学的四大基础学科之一,不仅能够研究创面修复过程中表皮细胞增殖、分化等的生物学行为,而且还可通过不同信号通路及其交互作用研究某种药物或技术在创面修复过程中的分子生物学作用机制,为部分医疗技术的临床应用提供理论依据。本研究对细胞生物学实验方法在创面修复研究中的应用进行了综述,以期为慢性难愈合创面的临床治疗提供参考。

关键词： 新医科   医学细胞生物学   教学改革   金课  

摘要： 健康中国2030战略实施需要医学教育培养出更多高素质卓越医学创新人才。依托新医科建设稳步推进金课体系建设是提高医学人才培养手段的重要抓手。本文通过系统分析医学细胞生物学课程教学所面临的问题,针对性地提出了该课程的金课建设路径:优化任课教师队伍建设;打造“教师、教材、教学方法、新信息技术”四位一体的教学新模式;必要的课程整合,提高教学质量;改革实验课教学;优化考试、考核方式等。

关键词： 三阴性乳腺癌   细胞系,肿瘤   RN A,长链非编码   Wnt/p-eatenin信号通路  

摘要： 目的探讨Linc00339对三阴乳腺癌发生发展的作用及其相关分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人乳腺正常上皮细胞和乳腺癌细胞中Linc00339的表达水平;采用质粒转染试验在MDA-MB-231细胞中过表达Linc00339;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MDA-MB-231细胞的活性;采用黏附试验、Transwell试验分别检测MDA-MB-231细胞的黏附、侵袭和迁移能力;采用Western blot检测MDA-MB-231细胞中APC、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平;采用qRT-PCR法检测MDA-MB-231细胞中miRNA-135a、miRNA-135b及miRNA-138的表达水平;将体外转染成功的MDA-MB-231细胞接种于裸鼠体内建立荷瘤裸鼠模型,观察和测量肿瘤块的体积和重量,采用Western blot检测裸鼠瘤体组织中APC、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平,采用qRT-PCR法检测裸鼠瘤体组织中miRNA-135a、miRNA-135b及miRNA-138的表达水平。结果与乳腺正常上皮细胞组(Hs578Bst)相比,乳腺癌细胞组(MCF-7、MDA-MB-468、MDA-MB-231)的Linc00339表达水平均显著上调,以三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞尤为显著;转染实验结果表明与pcDNA3.1组相比,Linc00339转染显著上调Linc00339表达水平并可显著增加MDA-MB-231细胞的活力;Linc00339过表达能够显著增加MDA-MB-231细胞的增殖、黏附、迁移和侵袭能力,增加荷瘤裸鼠肿瘤块的体积和重量;Western blot结果均表明体内外Linc00339过表达能够下调APC蛋白的表达和上调Wnt/β-catenin信号蛋白的表达,同时qRT-PCR结果表明Linc00339过表达能够上调miRNA-135b表达水平,而对miRNA-135a和miRNA-138无影响。结论 Linc00339可能通过miR-135b/APC介导的Wnt/β-catenin信号通路促进三阴乳腺癌的发生和发展。

关键词： 高度浓缩生长因子   MC3T3-E1   增殖   分化  

摘要： 目的:观察高度浓缩生长因子(concentrated growth factor,CGF)对成骨细胞生物学性能的影响。方法:将MC3T3-E1细胞在CGF环境下进行培养,并设立空白对照组。扫描电镜观察成骨细胞在CGF表面的附着;培养1、4、7 d后,检测细胞增殖情况以及碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色观察矿化结节和成骨相关基因Runx2的表达。CGF浸出液培养细胞24 h后,以鬼笔环肽染色观察细胞骨架的形态变化。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:CCK-8比色显示,培养1、4、7 d,在相同时间点,实验组与对照组相比,CGF细胞增殖活性显著增强(P<0.05)。ALP活性检测显示,培养1 d后,实验组与对照组无显著差异(P>0.05);培养4、7 d后,实验组与对照组相比,ALP活性具有显著差异(P<0.05)。茜素红染色显示,CGF组钙化结节数量增多且面积较大。鬼笔环肽染色和DAPI染色可见,CGF组中细胞数量增多,细胞铺展面增大,肌动蛋白形态更为清晰。CGF可促进Runx2 mRNA表达(P<0.05)。结论:CGF可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化以及Runx2的表达。

关键词： 窄谱中波紫外线   白癜风   黑素细胞   生物学特性  

摘要： 目的:明确窄谱中波紫外线(narrow-band UVB,NB-UVB)对白癜风患者的黑素细胞生物学特性的影响。方法:提取34例白癜风患者皮损处黑素细胞进行体外培养。每例样本分组后分别接受不同的照射剂量(0、20、40、60、80、100 mJ/cm^2)的NB-UVB处理,照射后1 d采用免疫印迹法对黑素细胞中微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)、酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、自噬信号磷酸化磷酸腺苷蛋白激酶(p-AMPK)、P26蛋白的表达情况进行测定。照射后2d、3d、4d采用MTT法对黑素细胞的增殖活性进行测定,采用NaOH染色法对黑素细胞中黑素含量进行测定。结果:随着NB-UVB照射剂量的增加,LC3Ⅱ/Ⅰ和p-AMPK表达水平逐渐上调,p-mTOR和P26的表达水平逐渐下降。不同NB-UVB剂量下,黑素细胞增殖水平增加,但随剂量的增加,增殖的程度逐渐减弱。不同NB-UVB剂量黑素细胞中黑素水平升高,且呈剂量依赖式递增。结论:NB-UVB能够有效调节白癜风患者黑素细胞自噬相关蛋白表达水平,活化自噬信号通路,促进黑素细胞增殖及黑素合成能力。

关键词： 人民卫生出版社   出版发行   科学前沿   细胞生物学   分子生物学   标志性成果   最新研究进展   生命科学研究  

摘要： 由王宁利、刘旭阳教授主编的《基础眼科学前沿》(上下册)一书于2018年9月由人民卫生出版社出版发行。该书从分子生物学角度探讨眼病发生、发展及治疗,较为全面、系统地阐述了眼病在发病机制和治疗方面的最新研究进展。内容紧扣眼科领域分子生物学和细胞生物学的最新进展,从近年来生命科学研究标志性成果的角度审视眼科领域基础研究的发展方向。同时,突出基础与临床相结合,从分子水平分析眼病的发生机制并探讨新的治疗手段。