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关键词： 康莱特注射液   Janus激酶2   信号转导与转录激活因子3   肺腺癌A549细胞   生物学行为  

摘要： 目的探讨康莱特注射液通过调控Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路对肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响。方法取对数生长期的肺腺癌A549细胞,分别向其中加入0、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/ml的康莱特注射液,处理24、48 h。采用CCK8法检测细胞增殖抑制率,依据半数抑制浓度(IC50),选取2.00 mg/ml的康莱特注射液进行后续实验。采用Transwell小室检测细胞迁移、侵袭情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞JAK2/STAT3信号通路蛋白[JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)]的表达水平。结果不同浓度康莱特注射液处理肺腺癌A549细胞24、48 h,细胞增殖抑制率随康莱特注射液浓度升高、作用时间延长而升高,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。康莱特组肺腺癌A549细胞的迁移、侵袭数均明显低于空白对照组,细胞凋亡率高于空白对照组,p-JAK2、p-STAT3表达水平均低于空白对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论康莱特注射液能够有效抑制肺腺癌A549细胞的恶性增殖、迁移和侵袭行为,诱导细胞凋亡,作用机制可能与JAK2/STAT3信号转导通路的调控有关。

关键词： 创新实践能力   细胞生物学   OBE+BOPPPS混合式教学模式  

摘要： 文章主张在细胞生物学实验课程引入OBE+BOPPPS混合式教学模式,以实践能力培养为导向,以微课、慕课、大学生创新课题、教师科研项目等教学形式为载体,建立细胞生物学实验线上线下教学模式。这种教学模式能提高学生的主动参与性,提高学生的实践能力和创新能力。

关键词： 宫颈肿瘤   Yes相关蛋白   细胞增殖   细胞迁移  

摘要： 目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)沉默对人宫颈癌(CC)SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:对人CC细胞株SiHa细胞进行体外培养,慢病毒YAPshRNA转染到SiHa细胞,建立稳定转染的YAP-shRNA实验组(sh-YAP组)和空载质粒对照组(对照组),采用Western blotting法检测YAP沉默效果;免疫荧光法检测2组细胞中肌动蛋白(F-actin)微丝数量及形态变化;CCK-8法、Transwell小室实验和细胞划痕实验检测2组细胞存活率、迁移及侵袭细胞数以及细胞划痕愈合率;Western blotting法检测2组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关标记物[E钙黏蛋白(E-cadherin)和锌指转录因子(Snail)]、DNA损伤修复相关蛋白γ(γ-H2AX)和凋亡相关蛋白[c-MYC和B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)]蛋白表达水平。结果:慢病毒YAPshRNA转染SiHa细胞后,SiHa细胞中YAP蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。免疫荧光实验,YAP沉默后SiHa细胞中F-actin微丝稀疏且排列规则,细胞数量减少、细胞呈现蜷缩的状态。CCK-8法,与对照组比较,sh-YAP组培养24和48 h后SiHa细胞存活率明显降低(P<0.01);Transwell小室实验和细胞划痕实验,与对照组比较,sh-YAP组的SiHa细胞迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05);Western blotting法,与对照组比较,sh-YAP组细胞中E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),c-MYC、Bcl-2和γ-H2AX蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:YAP基因沉默导致人CC SiHa细胞F-actin的解聚,并调控细胞凋亡和DNA损伤修复,可能会逆转EMT进程,从而抑制肿瘤细胞增殖和迁移。

关键词： 细胞生物学   科学能力培养   氧化应激   综合实验  

摘要： 设计了以“菊苣酸体外抑制氧化应激的药效学评价”为主题的细胞生物学开放性综合实验。以LPS诱导巨噬细胞RAW264.7构建炎症模型,通过CCK8法检测菊苣酸的细胞毒性并确定有效剂量;以ROS指示剂DCFH-DA染色为主线,结合全波长荧光酶标仪、荧光显微镜以及流式细胞术,并辅以DHE染色进行荧光显微镜观察评价菊苣酸抑制氧化应激的能力。该课程涵盖多学科实验技术,将基础实验与创新实验有机融合,在巩固基础知识的同时深化理解重点实验技术相关知识。为学生提供了一定的创新空间。

关键词： 结直肠癌   环状核糖核酸转化/转录域关联蛋白   环状RNA  

摘要： 目的分析环状核糖核酸转化/转录域关联蛋白(circTRRAP)对结直肠癌细胞生物学行为的影响。方法利用慢病毒转染结直肠癌细胞,将细胞分为circTRRAP组与NC组。RT-qPCR检测两组结直肠癌细胞中circTRRAP的表达量,通过体外实验分析两组结直肠癌细胞的增殖力、迁移力、侵袭力及细胞凋亡的变化。通过体内成瘤实验分析裸鼠皮下成瘤的变化(使用随机数字表法将12只6周龄BALB/c裸鼠分为过表达组和正常组,将大约1×10^(7)个过表达circTRRAP或正常的HCT116细胞皮下注射到过表达组和正常组裸鼠右腋窝区)。结果与NC组比较,circTRRAP组结直肠癌细胞中的circTRRAP mRNA相对表达量升高(P<0.05)。与NC组比较,circTRRAP组结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力上升,细胞的凋亡水平下降(P<0.05)。与正常组比较,过表达组肿瘤体积和重量均增加(P<0.05)。结论circTRRAP促进了结直肠癌细胞恶性表型的生物学行为,可能发挥促癌作用。

关键词： 细胞生物学   教学改革   课堂教学   成果导向教育   教学互动  

摘要： 教师优化课堂教学设计,通过课中发布围绕重难点知识精心设计的互动话题并适时开展随堂练习,积极开展细胞生物学课堂教学互动探索实践。调查结果表明,这种教学互动模式不仅能引导学生主动思考,提高了学生的课堂参与度,更重要的是促进他们对重难点知识的理解、掌握和运用能力,同时也能让教师在互动中了解学生对所学内容的理解掌握程度。这种教学互动模式为该课程的教学改革提供了参考。

关键词： J型禽白血病病毒   全基因组   感染性克隆   病毒拯救   致病性  

摘要： 本研究对湖北某鸡场送检疑似禽白血病感染病死鸡进行剖检，取其组织器官进行病毒分离鉴定、全基因克隆并构建gp85基因遗传进化树，确定该致瘤毒株为J型禽白血病病毒（ALV-J）并命名为HB19。根据HB19毒株全基因序列设计含有同源臂的引物利用无缝克隆方法将毒株基因组序列与克隆载体pUC-19连接，成功构建HB19的感染性克隆质粒pUC-ALV-P1P2P3，将其转染至鸡成纤维细胞（DF-1），进行病毒拯救试验。通过群特异性抗原ELISA检测试剂盒和间接免疫荧光检测，结果均为阳性，表明成功拯救HB19的重组病毒株rHB19。进一步对重组毒株的生物学特性进行研究，结果表明rHB19和HB19不仅在DF-1细胞上的复制能力保持一致，而且在感染雏鸡体内也具有相似的增殖和致病能力。本研究分离得到1株髓细胞瘤型ALV-J毒株并成功建立其反向遗传操作技术平台，为今后探索该毒株的致病机理、致瘤机制以及基因功能等研究奠定了基础。

关键词： 科研人员   医学细胞生物学   科学进展   回顾总结   年度  

摘要： 本文回顾总结了医学细胞生物学领域2024年度中国科研人员取得的五项重要科学进展,这些发现为相关疾病的治疗提供了新的方向。