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关键词： 宫颈癌   核内不均一性核糖核蛋白   人乳头瘤病毒  

摘要： 目的探讨hnRNP E1对HPV16早期基因E2、E6表达的调控及宫颈癌细胞生物学功能的影响。方法采用体外细胞实验方法,对HPV16阳性人宫颈鳞癌SiHa细胞株采用hnRNP E1cDNA质粒上调hnRNP E1表达,于上调前、后采用Real-time PCR和Western blot分别检测各组细胞HPV16 E2、E6 mRNA和蛋白表达水平,同时,应用CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖、周期及凋亡。采用SPSS 22.0和Graphpad Prism 7.0软件进行相关资料分析。结果随着转染时间的增加(24、48、72 h),hnRNP E1过表达组的SiHa细胞活性及处于增殖状态的细胞数逐渐减少(P<0.05),而G0/G1期细胞比例增高,S、G2/M期细胞比例及增殖指数降低(P<0.05),晚期凋亡率和细胞总凋亡率逐渐增加(P<0.05)。hnRNP E1过表达组HPV16 E6 mRNA和蛋白表达水平低于空白组和空质粒组,差异有统计学意义(P<0.05),且随着HPV16 E6 mRNA和蛋白表达水平的降低,SiHa细胞增殖指数下降,而总凋亡率有增加趋势。3组间HPV16 E2 mRNA表达量差异无统计学意义(P=0.427),HPV16 E2蛋白未被检测到。结论hnRNP E1可抑制HPV16 E6的转录和翻译,进而抑制宫颈癌细胞增殖,促使凋亡,hnRNP E1可作为抑制宫颈癌变的潜在靶标。但本研究未发现hnRNP E1与HPV16 E2在SiHa细胞中的关系。

关键词： 生物学  

ISBN: (纸本)9787030654182

摘要： 本书介绍了细胞生物学常用的实验技术和方法，其编者们均为细胞生物学教学和研究的一线教师，在高等医学院校工作多年。本书将编者的科学研究工作经验融入到设计性和创新性实验的内容中，具有较强的实践性。 　　本书共三篇，包括细胞生物学基础性实验31个、综合性实验14个以及设计性和创新性实验选题10个。基础性和综合性实验主要描述实验方法与步骤，内容简明扼要，切实可行，主要试剂配制均有说明，实用性强；设计性和创新性实验选题主要是将细胞生物学技术应用于目前的研究热点领域，对学生进行创新能力和综合能力的培训，引导学生进行毕业论文设计和科研设计。

摘要： Computational biology is enabling an explosive growth in our understanding of stem cells and our ability to use them for disease modeling, regenerative medicine, and drug discovery. We discuss four topics that exemplify applications of computation to stem cell biology: cell typing, lineage tracing, trajectory inference, and regulatory networks. We use these examples to articulate principles that have guided computational biology broadly and call for renewed attention to these principles as computation becomes increasingly important in stem cell biology. We also discuss important challenges for this field with the hope that it will inspire more to join this exciting area.

关键词： 细胞生物学   双语教学   教学改革   农学  

摘要： 细胞生物学是农学种植类相关专业的基础课程,因其学科交叉强、知识更新快等特点,已成为双语教学实践的首选课程。开展细胞生物学的双语教学可以提高学生专业英语水平,更利于掌握最新的研究进展。该课程的建设基于应用型本科院校植物科学与技术专业需求、结合种植类专业特点、学生实际情况,强调教学理念转变、教学模式升级,努力提高学生的课程参与度,培养学生自主学习的意识与能力,为后续种植类相关课程的开设奠定理论基础。

关键词： 双特异性抗体   抗EpCAM+CD3   生物学活性   报告基因法  

摘要： 目的:建立基于细胞的抗EpCAM+CD3双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)生物学活性报告基因测定方法(reporter gene assay,RGA)。方法:构建稳定表达萤光素酶(luciferase,Luc)的HcT116-Luc细胞为靶细胞,以Hu T78细胞为效应细胞,通过对样品浓度、孵育时间、细胞接种时间、效靶比和细胞接种密度进行优化建立报告基因法,根据人用药品注册技术要求国际协调会(International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use,ICH)Q2指导原则和《中华人民共和国药典》(2015)指导原则,对RGA法的特异性、准确性、精密度、线性、代次稳定性和耐用性进行验证。结果:建立RGA方法经优化后的检测条件:效靶比为10∶1;细胞接种密度为1.1×10^(4)细胞·孔^(-1);Bs Ab样品以3000 ng·mL^(-1)为起始浓度1∶3.5向下稀释9个浓度梯度(共10个检测浓度);系列稀释样品与细胞孵育时间为72 h。孵育结束后测定Luc强度并以4-参数模式拟合剂量-效应曲线,计算样品相对生物学活性。建立RGA法的特异性、耐用性均符合应用要求。采用50%,70%,80%,100%,120%,130%,150%和200%共8个效价浓度进行准确性、精密度和线性验证,8个效价浓度的生物学活性回收率在95.48%~107.37%,变异系数(coefficient of variation,CV)在4.80%~9.97%,均<10%,实测效价与理论效价线性回归分析相关系数r^(2)>0.99。第14~33代次HcT116-Luc细胞Luc表达情况稳定。结论:基于传代细胞建立的抗EpCAM+CD3 Bs Ab报告基因生物学活性测定方法操作简便,其特异性、精密度、准确性、耐用性方面符合应用要求,可作为此类双特异性抗体活性评价的方法,用于其质量控制中。

关键词： 低频超声   结肠癌   肿瘤干细胞   化疗   5-氟尿嘧啶  

摘要： 目的探索低频超声联合5-FU对结肠癌HT-29细胞及其干细胞增殖、凋亡的影响。方法培养人结肠癌细胞系HT-29及其肿瘤干细胞球,随机分为4组并给予相应处理:对照组、低频超声组(30 kHz,37℃,超声1 min)、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(药物浓度为5μg/ml)和联合组(低频超声+5-FU)。通过CCK-8实验检测不同处理对细胞活性的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率;qRT-PCR和Western blot检测凋亡相关基因的表达情况。结果与对照组和单独处理组相比,低频超声和5-FU联合处理组细胞增殖明显受到抑制,肿瘤干细胞球的数量、活性也明显降低,干性标志物CD133、CD44和Sox2表达下调,并且凋亡率增加,凋亡相关蛋白PARP裂解片段(cleaved-PARP)表达上调,抑凋亡蛋白Bcl-2表达下调(均P<0.05)。结论低频超声可增强5-氟尿嘧啶对结肠癌细胞活性抑制作用,并且低频超声联合5-氟尿嘧啶可以通过降低结肠癌干细胞的干性而促进诱导结肠癌干细胞凋亡。

关键词： 细胞生物学   办刊经验   中国科技期刊   学术期刊   中国科学院   中国科协   期刊影响因子   期刊引证报告  

摘要： 近日,《细胞研究》举办创建一流学术期刊座谈会,邀请中国科协、中科院、上海市的分管领导,以及高校和科研院所、兄弟期刊的专家与编辑,在创刊30周年之际,共同交流办刊经验,探讨中国科技期刊未来发展之路。《细胞研究》(Cell Research)由中国细胞生物学学会与中国科学院分子细胞科学卓越创新中心共同主办的英文期刊在今年最新期刊引证报告中,影响因子提升至20.507,这是中国自主创办的期刊影响因子首次超越20。

关键词： 细胞生物学   实验教学   微课   参与式教学   混合式教学  

摘要： 微课作为新型教学资源在实验教学中发挥积极的促进作用,但在实验微课的制作中,学生的参与度很低。教师秉承以学生为中心的教学理念,基于学生需求,充分发挥学生的主观能动性,共同完成了由学生全程参与的三个实验演示型微课的制作,并以这些微课作为线上资源进行了实验课混合式教学的应用与评价。学生参与式实验微课的制作促进了学生的学习主动性和积极性,锻炼了团队合作能力,强化了师生沟通。实施的混合式教学收到了满意的教学效果,学生的知识留存率、操作规范性和实验成功率均有显著提升,学生的反馈意见也为优化微课质量、提升教学效果、促进学生全面发展提供了宝贵意见。

关键词： 实验教学   半翻转课堂   半自主设计  

摘要： 文章将半翻转课堂和半自主设计两种教学模式相结合,在细胞生物学实验课程中实施了"半翻转课堂+半自主设计"教学模式。该模式注重"个体化教育"和"差异化教育",突出学生的主体地位及教师的主导作用,为实验教学改革提供了新思路。